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101Bio//(1 mL, 100 rxn, 20 ul/rxn)/W0690-1
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101Bio//(1 mL, 100 rxn, 20 ul/rxn)/W0690-1
品牌 / 
101Bio
货号 / 
W0690-1
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4000-520-616
2x Es Taq Master Mix (with dye)

Name

2x Es Taq Master Mix (with dye)

Cat. #

W0690-1
$ 39.00
(1 mL, 100 rxn, 20 ul/rxn)
W0690-5
$ 99.00
(5 mL, 500 rxn, 20 ul/rxn)
How to pay with

Application

  • Routine PCR
  • T/A cloning
This product is for research use only.

Specifications

Polymerase:Es Taq
Hot Start:N/A
Fidelity:High fidelity
GC-Rich PCR Performance:High
Amplification Range:6 kb
Exonuclease Activity:5´→3´
Reaction Speed:1 kb / 30 seconds
Reaction Format:Master Mix
Product Overhang:3"-A

Description and features

This Master Mix contains Es Taq DNA Polymerase, PCR buffer, Mg2+, dNTP, PCR stabilizer and PCR enhancer.The concentration is 2x.

Es Taq DNA Polymerase possesses 5´→3´ DNA polymerase and 5´→3´ exonuclease activity. The polymerase has the high amplification efficiency and low mismatching as Taq DNA polymerase and high fidelity of Pfu DNA polymerase. Es Taq Polymerase catalyzes the non-template directed addition of an adenine residue to the 3´-end of both strands of DNA molecules to make it suitable for T/A cloning.The amplification range of Es Taq is ~ 6 kb.

This unique Master Mix recipe makes the system very reliable.More than 98% of PCR reaction can get successful amplification during the first try.It also works well on complicate templates.

The Master Mix contains dye, and can directly run electrophoresis after PCR reaction.

Shipping / Storage

Ship at 4℃. Store at -20℃ for up to 1 year and avoid freeze-thaw cycles. Stored at 4℃ for up to 3 months.

Quality control

This product is tested for no exogenous nuclease activity;no host DNA contamination tested (by PCR);able to amplify single copy gene from multiple genomes; and no significant enzyme activity decrease after storing at 2 ~ 8oC for 3 months.

Manual (protocol)

101Bio.com 2x Es Taq Master Mix

Components

ComponentsAmount
W0690-1W0690-5
2x Es Taq Master Mix1 mL1 mL x 5
RNase-Free Water1 mL5 mL

PCR reaction system

2x Es Taq Master Mix, convenient, save time and reliable

Note: The recommended primer concentration for PCR is between 0.1-1.0 µM of each primer. The use of higher concentrations of primers can have higher amplification effect. Low primer concentration will generally ensure cleaner product and lower background.

PCR reaction conditions

2x Es Taq Master Mix, convenient, save time and reliable

Note:

  • The recommended annealing temperature is about 5℃ below Tm of primers. If extra bands are observed, higher annealing temperatures should be considered. The absence of product indicates the need for a lower annealing temperature.
  • PCR extension time is depended on the size of target gene sequence.Es Taq DNA polymerase is approximately 1 kb DNA / 30 seconds.
  • The number of PCR cycles will basically depend on the downstream application of the PCR product.

PCR result examination

This Master Mix contains dye for electrophoresis.After PCR, directly load 5 µL of PCR product to agarose gel to run electrophoresis.No need to add loading buffer.

Exosome IsolationPurity > 95%
Protein Extraction1 min total protein, 40 min membrane protein
3D Cell Culture Gel30% < mkt="">
PCR Kits50% < mkt="">
Beta-Hexosaminidase Activity Colorimetric Assay Fast and sensitive, High-throughput
Endotoxin-Free Plasmid Kitsmaxi, midi and mini-prep
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内容来源:广东药学院实验指导手册。 查看更多>
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This was probably derived from Birnboim and I"ve used it since 1984 for isolation of recombinant plasmids from E. coli for routine screening. All solutions are 查看更多>
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marker
[英] [ˈmɑ:kə(r)][美] [ˈmɑ:rkə(r)]
n. 标识,标记;记号笔,阅卷人;防守队员;特征

同反义词
同义词
buoy signal memorial
相关例句
1. Draw your child's outline with a heavy black marker.(14.11K)
用浓黑色的毡笔画出你孩子的轮廓。
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步测十英尺,然后在地上做出标记.
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他击出一个超过365英尺标志的直飞球.

来源:生物谷2016-02-2610:26

2016年2月26日讯/生物谷BIOON/--药物的发现是一项非常艰巨的工作,其需要化学家们从数百万种化合物中筛选最终寻找最适合的那一个,而DNA技术或许就可以明显加速药物的发现之旅。

在麻省沃尔瑟姆市一个普通混凝土楼房二楼的实验室冰箱中保存着一个具有明确标识的检测管,该管中含有天文学数字尺度那么多的混合物,而这些众多的化合物属于制药公司葛兰素史克(GSK)所有,其中包含有1万亿个特殊的DNA标记的分子,其数量是银河系中行星数量的10倍。

这些文库可以帮助制药公司和生物技术公司快速鉴别出可以和疾病蛋白配对的候选药物,尤其是那些很难靶向作用的参与疾病的特殊蛋白质;药物的发现通常都从科学家们开始组装大量的化合物文库开始,随后研究者就会检测这些化合物靶向作用蛋白的效力,这些化合物通常会被加入到每一个包含靶点的孔中来观察是否化合物是否会影响这些靶点的活力,这种方法称之为高通量筛选(high-throughputscreening,HTS),其通常是利用机器人设备自动化地对数百万种化合物进行检测,但目前这种技术的花费非常昂贵,而且有时候并不总是会成功。

过去一些年里,药物化学家已经通过利用条形码样的DNA来对化合物进行标记从而帮助发现更加有用且有效的化合物,这些DNA编码的文库通常会提供多种药物寻找的优势;这样一来研究者们就会将所有DNA标记的分子置于单一的混合制剂中,随后引入靶向蛋白,这样一来结合靶向蛋白的任何一种化合物就会被轻松鉴别出来,而这都得感谢DNA条码的帮助。1992年科学家们首先提出DNA编码文库,DNA编码文库并不会取代高通量筛查技术,很多制药公司目前已经重金投资到了HTS中,而且利用DNA编码技术有时候并不能合成一些化合物,但相比较而言DNA编码技术却会为科学家们提供一种快速、高效且廉价地寻找结合靶点的化合物的技术,比如泛蛋白连接酶,其会对蛋白进行标记并进行处理,同样也可以在癌症疗法中被靶向标记。

大即是美(Bigisbeautiful)

当前GSK公司拥有世界上最大的DNA编码文库(DNA-encodedlibrary),该文库是一般公司200万化合物高通量筛查文库的50万倍。构建DNA编码文库有很多种方法,最大的一种,就像GSK公司的,其是通过利用DNA记录的方法来进行的。化学结构单元,比如氨基酸、胺类和羧酸类,其都可以被合成同时通过化学反应被标记以“DNA条形码”,第二种结构元件就会加入到反应混合物中从而制造一种新分子,同时DNA条形码就会被加长;通过加入四种元件,化学家们就可以开发出药物样的分子,由于存在数千种的结构元件,因此潜在的组合将会是非常巨大的。

相比常规的HTS文库而言,DNA编码文库非常容易维护且使用,一种DNA编码文库可以被储存于单一的检测管中,而HTS文库则需要机器人设施,而相应的设施需要足够大才可以储存每一种化合物。

未来DNA编码文库不仅将会更大更加广泛,而且还会提供很多机会帮助快速应用于临床中去,随着常规筛查的进行,药物化学家们有时候不得不花费数年时间来调节化合物使其变得特殊且安全地用于临床中。相比之下,大尺寸的DNA编码文库意味着科学家们可以寻找到更加适合临床使用的化合物,尽管有些化合物仍然需要优化,但至少科学家们距离成功已经很近了。

其它生物技术公司也相继表示对DNA编码文库非常感兴趣,这些公司不仅利用DNA标签来鉴别特殊化合物,而且以其作为模板来制造新的DNA标签,DavidLiu是来自哈佛大学的一位化学家,他的学生开发出了一种“DNA-模板”方法,同时利用该方法构建了特殊环状分子的文库(macrocycle,包含15个原子以上的大环),这些大型稳定的环状分子可以在多个位点同靶点相互作用,从而增强结合反应的特异性。(GSK和X-Chem公司的DNA编码文库中拥有大量的macrocycle分子)。

首先Liu开发了一种单链DNA模板作为向导,随后将DNA标记的结构元件加入到反应器中,依赖于DNA碱基配对,在物理性上将标记的结构元件从一个结合到另一个,最终的反应就会将线性的结构元件转化成为环状的macrocycle分子,而每一个该分子都会被限制成为特殊的DNA条形码。目前Liu的团队构建的包含14000个大分子的文库已经带来了部分成功,2014年,他们就报道发现了一种特殊稳定的小分子可以有效阻断胰岛素降解酶类(IDE),该酶和2型糖尿病直接相关,为此研究者们还准备研究IDF在健康和疾病中所扮演的角色。

甜蜜的筛选(SweetScreens)

一旦文库建成,下面的乐趣就是鉴别可以吸附靶点的分子了;很多研究依赖于“亲和筛选”来寻找目的化合物,正因为如此他们工程化操作蛋白质使其靶向作用一系列纯化的标签,随后利用纯化标签离开结合对,并且通过包含文库的混合体,最后一步就是利用DNA测序仪来阅读和小分子相关的DNA标识符,这种方法最终就会产生大量的靶向蛋白。但基于亲和的方法往往尤其不足之处,“笨拙”的DNA标记有时候反而会阻碍其同靶点的反应,同时就会使得很多潜在的候选化合物流失,但因为DNA编码文库非常巨大,因此这些损失通常情况下可以被忽略不计;然而有问题的是小分子和其标签通常会结合到纯化柱上,这样就会产生假阳性的结果,纯化的标签也会被靶向蛋白的结构所干扰,从而引入不可靠的数据。

当然很多公司都相继解决了上述问题,Vipergen公司就是其中一个,该公司拥有5000万个分子的DNA模板文库,它们也希望开展这项浓缩的策略;公司的行政总裁NilsHansen表示,试想一下,我们可以冻结蛋白混合物文库并且将其切割成为非常小的小方冰块,如果这些冰块足够小,每一个都包含有单一的靶向蛋白,那么在这个尺寸下进行靶点结合的小分子就会在包含靶点的小方冰块中进行持续过度反应。

当前利用游离漂浮的可溶性蛋白进行DNA编码文库的筛选非常好,但很多潜在的药物靶点都嵌合到了细胞表面,这就使得利用传统的亲和筛查技术变得不太可能,比如大约有40%的被批准的药物都可以靶向作用膜结合的G蛋白偶联受体,因为这些受体分子通常在细胞外部感知分子的存在,为此筛选膜结合蛋白的技术就必须更新换代。其中一种方法就是将DNA编码的文库同完整的可以过度表达膜结合靶点的细胞混合,随后小型分子就会在细胞表面同靶点进行结合;当研究者冲洗掉未结合的文库后,他们就可以通过加热细胞并且阅读被洗脱的DNA标签来鉴别出结合小型分子;在这一方面GSK公司已经利用该方法鉴别出了一系列潜在的受体抑制剂,这些受体参与到了精神分裂症及中枢神经系统障碍的发病中。

当然X-Chem公司也开始看到了进行膜结合蛋白筛查的商机,Wagner表示,从历史观点上来讲,我们的程序主要还是利用可溶性的蛋白,但考虑到最近数据的转变我们已经开发出了相对困难的膜结合蛋白。

未来DNA编码文库的规模还会扩大,而且新型的筛选方法也会打开未知的生物空间,DNA编码文库也将会成为帮助制药公司探索发现新药的支柱之一。(生物谷Bioon.com)

那里能够检查

线粒体tRNA赖氨酸基因上发生1个A8344G突变,该基因与MERRF(伴破碎红纤维的肌阵挛性癫痫)相关。

谢谢,有人知道的吗?
tRNA(转运RNA):多数tRNA由70-90个左右的核糖核苷酸组成并折叠成三叶草形,作用是在蛋白质合成过程中运输氨基酸;
mRNA(信使RNA):是由细胞核内的DNA转录来的,它携带遗传信息,在蛋白质合成时充当模板,决定肽链的氨基酸排列顺序;mRNA存在于原核生物和真核生物的细胞质及真核细胞的某些细胞器(如线粒体和叶绿体)中;
rRNA(核糖体RNA):是核糖体的组成成分,它是3类RNA中相对分子质量最大的一类RNA,与蛋白质结合而形成核糖体,其功能是作为mRNA的支架,使mRNA分子在其上展开,实现蛋白质的合成。
这是本人给研究生讲课的有关酶抑制剂的幻灯,该幻灯图文并貌,有许多动画。本课程是以郭宗儒编蓍的《药物化学总论》为参考书。

下载地址:/pub/其他资料/药化ppt/

请问大神,siRNA一定是瞬转;如果瞬转,比如只能维持个2-3天,那么如果我想观察药物A作用于siRNA干预的细胞的效果,但是这个药物A需要作用10天,那么我间隔2-3天加一点SIRNA,这样可以吗,谢谢大神了

已经在mirbase数据库下载水稻的所有miRNA序列,可以比对某种昆虫的转录组文库寻找靶基因吗?

可以用targetscan或者miRwalk网站吗?有什么方法吗?

最近用TaqMan探针做已知位点的SNP分型,用FAM和VIC分别标记对应探针,试验中发现纯合子中不配对的探针信号也会上升(如图一,GG型只允许FAM上升,结果VIC也上升;图三只允许VIC上升,结果FAM同时上升。。),想问一下是什么原因?怎么解决?谢谢大家!


marker

英 [ˈmɑ:kə(r)] 美 [ˈmɑ:rkə(r)]
n.标识,标记; 记号笔,阅卷人; 防守队员; 特征
复数: markers

双语例句

1. Draw your child's outline with a heavy black marker.
用浓黑色的毡笔画出你孩子的轮廓。

2. He put a marker in his book and followed her out.
他在书里夹了一个书签后便随她出去了。

3. He placed a marker where the ball had landed.
他在球落地的地方放了个标记。

4. Step off twenty feet and then place a marker in the ground.
先步测20英尺,再在地上做出标记.

5. Step out ten feet and then put a marker in the ground.
步测十英尺,然后在地上做出标记.

请问各位大侠,我在做不同公司相同因子ELISA的时候,尽管已经换算成一样的理论浓度,A公司的标准品在B公司产品上却检测不出来或者OD值差别特别大,是什么原因,请各位大侠不吝赐教,**~~

这种题要根据题干内容来定。
(1)人的免疫球蛋白细胞 cDNA文库(cDNA 文库是把内含子去除后的裸DNA,人的和牛的DNA是不能识别的就是因为内含子的缘故,cRNA反转录后的是去除后的)。
近期刚接触有关黄色短杆菌(G+)的代谢途径修饰,根据相关文献及实验室已有资料,选择pk18mobsacB这一穿梭型的自杀载体进行敲除。
目标基因全长1800bp,通过重叠延伸的方式获得的自杀敲除组件,左右同源序列均为500bp左右,构建自杀载体(确认载体没有问题),期望进行目标基因的失活处理,但将近1个月的时间,不见任何目的克隆,故在此请各位战友指点。
采用电转的方式将自杀载体(约6700bp)导入黄色短杆菌,感受态的细胞制备采用相关文献方式,甘氨酸和吐温-30的方式进行摇菌并制备电转感受态,1800v电转(电压进行过梯度,1200、1500、1800、2200、2500。1800v效果相对较好,故选之),但电转效率仍是较低,复苏2h,浓缩涂板LBG+kan(kan浓度20ug/ml),平板克隆很少,几次都只有20个左右的克隆。
1)克隆很少,原因可能跟菌株的电转效率有关,不知战友有没有谷氨酸棒杆菌或黄色短杆菌相关较好的电转经验,还请指教?
2)抗性平板克隆很少,还可能和重组效率有关,但根据pk18mobsacB质粒的特性,既然能在抗性平板生长,理论上应该是已经进行了一次重组了,但结果是不管我用pk18载体本身的Kan序列引物还是最终诱导进行PCR验证,均未证实到一次重组的发生,更不要说获得敲除失活的目的菌株了。问题是这个带有抗性的克隆到底是携带了什么使其同样具有抗性(显微检验不是杂菌)?如何有效提高或促进自杀载体在宿主内的重组效率呢?或是更有效的准确的检测验证手段??
3)利用自杀载体的方式进行黄色短杆菌(或谷氨酸棒杆菌)的基因敲除缺失比较不易,不知有没有正在做这方面相关研究的战友,希望能够多多交流和学习。。。
不知道我的疑惑讲清楚了没有,若哪里不清楚还请指出,我再细说。。。期望xdjm们的帮助啊。。。先谢过了。。