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Abnova/Chicken Anti-Goat IgG (H&L) secondary antibody (Biotin)/1kit/PAB10566
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Abnova/Chicken Anti-Goat IgG (H&L) secondary antibody (Biotin)/1kit/PAB10566
品牌 / 
Abnova
货号 / 
PAB10566
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  • Specification
  • Product Description:
  • Chicken anti-goat IgG recognizes goat IgG whole molecule. This secondary antibody was purified using antigen affinity chromatography. The antibody is conjugated with Biotin.
  • Immunogen:
  • Goat IgG whole molecule
  • Host:
  • Chicken
  • Reactivity:
  • Goat
  • Form:
  • Liquid
  • Conjugation:
  • Biotin
  • Purification:
  • This product was prepared from monospecific antiserum by immunoaffinity chromatography, followed by solid phase adsorption(s) to remove any unwanted reactivities.
  • Conjugation Note:
  • 10-20 BAC molecules per chicken IgG molecule
  • Recommend Usage:
  • The optimal working dilution should be determined by the end user.
  • Storage Buffer:
  • In 20 mM KH2PO4, 150 mM NaCl, pH 7.2 (0.01% sodium azide)
  • Storage Instruction:
  • Store at 4°C. For long term storage store at -20°C.Aliquot to avoid repeated freezing and thawing.
  • Note:
  • This product contains sodium azide: a POISONOUS AND HAZARDOUS SUBSTANCE which should be handled by trained staff only.
  • Datasheet:
  • PDF DownloadDownload
  • Publication Reference
  • 1.
  • Protein biotinylation.Bayer EA, Wilchek M.Methods Enzymol. 1990;184:138-60.
  • Applications
  • Western Blot
  • Immunohistochemistry
  • Immunofluorescence
  • Enzyme-linked Immunoabsorbent Assay
  • Application Image
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当有大量的样本,多个微卫星标记需要分型时,需要本单元描述的分型方法。例如,用全基因缉的方法做一个疾病的连锁分析研究,需要在 500 个个体里检测 300 个标记,这样就要 150000 次基因分型。本单元描述的技术是用 Perkin-Elmer 的自动 DAN 测序系统,但也可以修改用于其他的自动荧光测序系统。 查看更多>
本法的显著优点在于 ASO 探针只需注意两个参数:①同一个探针池中所有 ASO 探针长度一致(本方案中优化的 ASO 探针长度为 17 个碱基对);②寡核苷酸探针和目标序列的错配单碱基位置不可位于 ASO 探针的末端(本方案是基于单个错配碱基位于距离 ASO 探针 5'端 5~7 个碱基对)。 查看更多>
上海君伯生物科技有限公司在发布的CRISPR-Cas9基因突变小鼠供应信息,浏览与CRISPR-Cas9基因突变小鼠相关的产品或在搜索更多与CRISPR-Cas9基因突变小鼠相关的内容。 查看更多>
You need to buy glass slides with frosted, sandblasted ends (Fisher Scientific, Catalog N. 12-552). Frosting by painting (e.g.Superfrost) should not be used. P 查看更多>
人类基因突变是指DNA分子中发生碱基对的替换、增添和缺失,而引起的基因结构的改变,叫基因突变(gene mutation)。... 查看更多>
端粒是真核生物染色体末端的特异DNA-蛋白结构,端粒DNA是一系列重复的富含G的DNA序列,这一序列在生物进化中有高度的保守性(人重复序列为TTAGGG)。已确认端粒在保护基因组DNA不被降解、防止染色体有害的结合(如染色体末端融合、重排、染色体移位和染色体缺失)中起重要作用。 查看更多>
本章介绍了酵母遗传学实验相关技术和方案。 查看更多>
20x SSC:3M NaCl0.3M Na-citrate; pH7.0Hybridization Sol"n:5x SSC0.5% (w/v) Blocking Reagent0.1% (w/v) N-lauroylsarcosine, Na-salt0.02% (w/v) SDS50% (w/v) formam 查看更多>
上海杏园瑞民生物工程有限公司在发布的WNT Signaling Pathway PCR Array WNT信号通路基因表达PCR芯片供应信息,浏览与WNT Signaling Pathway PCR Array WNT信号通路基因表达PCR芯片相关的产品或在搜索更多与WNT Signaling Pathway PCR Array WNT信号通路基因表达PCR芯片相关的内容。 查看更多>
2021-07-20
中国将开发自主知识产权肿瘤基因表达谱芯片 查看更多>
2018-12-18
生命是个神秘的个体,它由无法计量的细胞组成。生物学家的工作在于袪魅,发现无知,再解决无知。脑部的神经分布最密集,因此与之有关的疾病更是难以解决的问题。 12月14日的S 查看更多>
辣是一种痛觉而非味觉。迄今哺乳动物中只有人类可通过后天训练适应辣这种痛觉,甚至获得愉悦,其他动物都难以忍受。然而,中国科研人员最新发现,东南亚的一种小动物树鼩也能 查看更多>
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cloneez pcr克隆试剂盒怎么样123
纯洁的小伤vn72021-09-06
我没用产品我直都用
ClonExpress II One Step Cloning Kit同源重组克隆试剂盒同原理重组效率高我实验室都用克隆试剂盒基本用重复实验功推荐使用产品
【求助】关于RNAi的载体问题123
天籁无声602021-07-23
看了好多国内的文章,发现构建小干扰RNA载体时首先需要将特异性干扰RNA片断克隆入T载体,然后再亚克隆入表达载体。这样做的目的是什么呢?
我刚考上硕士,导师就让我克隆一个基因,可我啥也不会,怎么办?
我已经知道了这个基因在其他物种中的序列和它所编码的蛋白质的序列,导师的意思是让我把它在大豆中克隆出来。我该怎么办?
听导师说,可能要用到RT-PCR。谁能帮帮我?
感激不尽啊!
嘿嘿说喜欢却喜欢像我吃都辣椒基变异辣椒食用油基变异豆喜欢吃点却喜欢吃怕吃身体所要异我认基变异毕竟没现现象
注意事项
(1)酵母双杂交照设定 规酵母双杂交操作般设定阳性照、阴性照及显色系统照三种照MATCHMAKER GAL4酵母双杂交筛选系统例:
阳性照:pGADT7-T + pGBKT7-53其T蛋白53蛋白已经明确酵母细胞内能够发结合并启报告基表达两种蛋白
阴性照:pGADT7-T + pGBKT7-lam其已经明确T蛋白lam蛋白酵母细胞内能发结合 系统显色照pGADT7-Pcl1该表达质粒转入酵母细胞能引起-半乳糖苷酶-半乳糖苷酶泌检测显色系统否问题
(2)假阳性现象种原能造假阳性结见三种:
筛文库蛋白自身具转录性能够启报告基表达——种情况需要筛候选蛋白进行自激验证
酵母细胞内能同含止种文库蛋白其种文库蛋白与诱饵蛋白相互及结合
种情况需要阳性克隆再划板2~3确保每酵母克隆含种文库蛋白诱饵蛋白;另外划板数宜否则现蛋白表达质粒丢失情况 其些明原造假阳性—种情况需要筛候选文库质粒表达诱饵蛋白质粒重新共转入酵母细胞或者通酵母杂交式重新验证必要pGADT7-cDNA质粒与pGBKT7-bait质粒载体调构建pGADT7-bait与pGBKT7-cDNA并重新酵母细胞验证真阳性结合调能酵母细胞做阳性结
(3)见问题及参考案 转化效率低—尽量使用新鲜培养基及新鲜、且直径2~3 mm左右酵母克隆确保酵母力;用于转化质粒使用前进行乙醇沉淀提高质粒纯度浓度
杂交效率偏低—能由于表达融合蛋白酵母细胞毒性某些情况液体培养基酵母换琼脂糖固体培养板比较种情况采用共转化进行试验;或者单转酵母克隆别铺5块10 mm培养板待克隆刮取所克隆于5 mL 0.5×YPDA重悬再按照规杂交操作步骤进行操作 背景高—使用HIS3作报告基由于HIS3基具定程度泄漏表达能现背景高情况使用适量HIS3蛋白竞争性抑制剂3-AT(3-amino-1,2,4-triazole)降低背景;或者再增加种更加严格报告基筛选Ade
诱饵蛋白具自激现象——采用克隆突变产自激段氨基酸序列敲除或突变种能破坏两蛋白间相互作用
才能判断试剂盒筛蛋白晶体
您线粒体蛋白提取试剂盒产品特点:1.离吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜柱与柱间吸附量差异极重复性克服产试剂盒膜质量稳定弊端
2.使用优质溶胶液含传统溶胶液碘化钠高氯酸盐抑制收酶切、连接克隆等游反应
3.独特溶胶液/结合液配溶胶结合两种功能统试剂盒运用于琼脂糖DNA收、PCR产物清洁纯化、酶切产物纯化收等种情况节省需购买种试剂盒费用
4.溶胶液/结合液调制黄颜色便于观察溶胶效监测pH值变化达佳结合效提高收效率
5.改进溶胶液配,提高缓冲能力稳定性即使品变化能PH缓冲佳结合范围内
6.快速、便需要使用毒苯酚、氯仿等试剂需要乙醇沉淀.
酵母双杂交系统应用遇问题假阳性较二转化效率偏低所谓假阳性:待研究两蛋白间没发相互作用情况报告基激主要原由于BD融合诱饵蛋白单独激作用或者种融合蛋白激作用外蛋白激另外AD融合靶蛋白DNA特异性结合则单独激报告基表达排除假阳性需要作严格照试验应诱饵靶蛋白别作单独激报告基鉴定目前几公司推酵母双杂系统都采用报告基且每报告基游调控区各相同减少量假阳性另外报告基通整合染色体使基表达水平稳定消除由于质粒拷贝数变化引起基表达水平波造假阳性即使根据严格照实验证明确实发蛋白间相互作用应面进行析:
(1)种相互作用否细胞内自发即蛋白细胞命否同间表达且定位同区域
(2)某些蛋白依赖于遍蛋白蛋白酶解途径员具普遍蛋白间相互作用能力
(3)些实际没任何相互作用相同模体(motif)两亲a-螺旋蛋白质间发相互作用十酵母双杂交技术直消除假阳性面断改进并且已取较效〔23〕
酵母双杂交应用遇假阴性现象所谓假阴性即两蛋白本应发相互作用报告基表达或表达程度甚低至于检测〔4〕造假阴性原主要两 面:融合蛋白表达细胞毒性应该选择敏性低菌株或拷贝数低载体二蛋白间相互作用较弱应选择高敏菌株及拷贝载体目前假阴性现象虽实验主要问题应予重视
CDS真转录区域UTR区外显(些基DNA存转录或翻译或存变剪切等)获序列用于构建各种表达载体验证基功能
准备做双荧光酶报告基因,设计了A转录因子过表达质粒,和启动子报告基因,考虑能不能直接用A转录因子蛋白代替A转录因子过表达质粒;这样用报告基因转染细胞再加A转录因子到细胞培养液中培养,这样能不能行得通?
酵母双杂交系统的原理及123
终极至尊粉7362021-07-30
酵母双杂交系统利用杂交基通激报道基表达探测蛋白-蛋白相互作用主要二类载体: a 含DNA -binding domain载体; b 含DNA-activating domain载体述二类载体构建融合基 测试蛋白基与结构域基必须阅读框内融合融合基报告株表达其表达产物定位于核内才能驱报告基转录例GAL4-bd具核定位序列(nuclear-localization sequence) GAL4-ad没GAL4-ad氨基端或羧基端应克隆自SV40T-抗原段序列作核定位序列图" class="ikqb_img_alink">
酵母双杂交系统析蛋白-蛋白间相互作用效快速 面应用 仍存些局限性⑴双杂交系统析蛋白间相互作用定位于细胞核内 许蛋白间相互作用依赖于翻译加工糖基化、二硫键形等 些反应核内进行另外些蛋白确折叠功能赖于其非酵母蛋白辅助 限制某些细胞外蛋白细胞膜受体蛋白等研究⑵酵母双杂交系统重要问题假阳性由于某些蛋白本身具激转录功能或酵母表达发挥转录激作用 使DNA结合结构域杂交蛋白特异激结构域情况激转录另外某些蛋白表面含种蛋白质低亲力区域 能与其蛋白形稳定复合物 引起报告基表达 产假阳性结
许研究者双杂交系统进行改进发展例采用假阳性显示析双筛选系统减少假阳性发;发展哺乳物双杂交系统更研究蛋白间相互作用其双筛选系统用二种同报告基(用lacZHIS3)优势vii:⑴ 用同启表达位于酵母二染色体报告基 明显减少假阳性⑵ 通营养型筛选增强筛选能力 尤其适用于较库容量选蛋白较少情况筛选
哺乳物双杂交系统Ⅷ种基水平重建转录功能基础体内析系统种兴趣蛋白与Gal4--DNA结合结构域构融合蛋白另种蛋白与单纯疱疹病毒VP16蛋白激结构域融合蛋白表达表达些融合蛋白载体与报道载体(CAT)共同转染哺乳物细胞系报道质粒含Gal4结合位点游cat基假两融合蛋白相互作用则cat报道基表达水平明显增高用系统证实P53蛋白与T抗原相互作用 酵母双杂交系统相同结且较酵母双杂交系统更快速转染48h内结并且哺乳物细胞能更模仿体内蛋白-蛋白相互作用哺乳物双杂交系统作酵母双杂交系统辅助手段图" class="ikqb_img_alink">
双杂交系统建立力于真核物调控转录起始程认识细胞起始基转录需要反式转录激参与80代工作表明转录激结构组件式(modular), 即些往往由两或两相互独立结构域构, 其DNA结合结构域(DNA binding domain简称BD)转录激结构域(activation domain简称AD)转录激发挥功能所必需前者识别DNA特异序列并使转录激结构域定位于所调节基游转录激结构域同转录复合体其作用启所调节基转录两结构域其连接区适部位打 仍具各自功能且同两结构域重建发挥转录激作用酵母双杂交系统利用杂交基通激报道基表达探测蛋白-蛋白相互作用单独BD虽能启结合能激转录同转录激BDAD形杂合蛋白仍具激转录功能酵母细胞Gal4蛋白BD与肠杆菌酸性激结构域B42融合杂合蛋白仍结合Gal4结合位点并激转录主要二类载体: a 含DNA -binding domain载体; b 含DNA-activating domain载体般编码蛋白基融合明确转录调控DNA-结合结构域(GAL4-bd LexA-bd); 另蛋白基融合转录激结构域(GAL4-ad VP16)述二类载体构建融合基 测试蛋白基与结构域基必须阅读框内融合融合基报告株表达 其表达产物定位于核内才能驱报告基转录例GAL4-bd具核定位序列(nuclear-localization sequence) GAL4-ad没 GAL4-ad氨基端或羧基端应克隆自SV40T-抗原段序列作核定位序列目前研究用binding-domain基:GAL4(1-147); LexA (E coli转录抑制)DNA-bd编码序列用activating-domain基:GAL4(768-881)疱疹病毒VP16编码序列等
双杂交系统另重要元件报道株报道株指经改造、含报道基(reporter gene)重组质粒宿主细胞用酵母细胞 酵母细胞作报道株酵母双杂交系统具许优点: 〈1〉 易于转化、便于收扩增质粒〈2〉具直接进行选择标记基特征性报道基〈3〉酵母内源性蛋白易同源于哺乳物蛋白结合激结构域融合基转入表达结合结构域融合基酵母细胞系 蛋白间作用使转录重建导致相邻报道基表达(lacZ) 析蛋白间结合作用
酵母双杂交系统能体内测定蛋白质结合作用 具高度敏性主要由于:①采用高拷贝强启表达载体使杂合蛋白量表达②信号测定自平衡浓度条件进行 免疫共沉淀等物理达条件需进行洗涤降低信号强度③杂交蛋白间稳定度激结构域结合结构域结合形转录起始复合物增强 者与启DNA结合 三元复合体使其各组结合趋于稳定④通mRNA产种稳定酶使信号放同 酵母表型 X-Gal及HIS3蛋白表达等检测均敏图" class="ikqb_img_alink">
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