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nanocomposix/NanoXact Silver Nanoplates – PVP/25 mL/SPPN1064-25M
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nanocomposix/NanoXact Silver Nanoplates – PVP/25 mL/SPPN1064-25M
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nanocomposix
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SPPN1064-25M
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Peak Wavelength(> 90% peak absorbance)Typical DiameterEstimated Thickness
660 nm40 nm ± 15 nm10 nm
800 nm70 nm ± 20 nm10 nm
980 nm100 nm ± 30 nm10 nm
1064 nm150 nm ± 30 nm10 nm
Peak Wavelength(> 90% peak absorbance)ConcentrationExample Certificate of Analysis(How do I read this?)
660 nm0.02 mg/mLDownload Example CoA
660 nm1 mg/mLDownload Example CoA
800 nm0.02 mg/mL
800 nm1 mg/mLDownload Example CoA
980 nm0.02 mg/mL
980 nm1 mg/mLDownload Example CoA
1064 nm0.02 mg/mLDownload Example CoA
1064 nm1 mg/mLDownload Example CoA

Note: approximate ranges below are dependent on size

  • pH of solution: 8.5 to 10.0
  • Particle surface: PVP
  • Solvent: aqueous 5 mM borate
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这里是一份GIBCO的低糖DMEM粉剂配制说明(普通高糖的DMEM培养基配法是一样的):TO PREPARE 1*LIQUID 1. Measrue out 5% less distilled water than desired total volume of medium using a mixing conta 查看更多>
DNA文库严格来讲应称作cDNA文库,中文名称是基因文库,是指某生物基因组中所有可表达的基因片段,经mRNA反转录后获得相应的cDNA的集合,将这些cDNA的集合经转入和克隆后贮存于受体细胞群落中,这个受体细胞群落即构成该生物的cDNA文库。... 查看更多>
1. 做实验要按规程,减压一定要用园底瓶,不可用锥形瓶,容易内吸爆炸,如果仅仅是回收溶剂,尚无大碍,如果是旋去溶剂得样品,萃取 查看更多>
Isolation of Actin and Myosin FilamentsLEVEL III Materials Relaxing Solution0.1 M KCl0.001 M MgCl5 mM ATP0.016 M NaHPONaHPOAdjust pH to 7.30.05 M Sodium phosph 查看更多>
Mouse ImmunizationOrder 6 six week old Balb/C mice and let the ARC know they are coming. Have your antigen ready for when they arrive. Once they get there earm 查看更多>
DescriptionAllows one to test the capability of adherent cells to survive and replicate following insult with chemicals or radiation. Procedure1. Grow the cell 查看更多>
Four hours after boosting with hCG, the females are ready to begin laying eggs. The best test is to see if there are eggs in the holding buckets. Also, the clo 查看更多>
SNP的检测知识:人类基因组中存在着广泛的多态性,最简单的多态形式是发生在基因组中的单个核苷酸的替代,即单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms, SNPs)。SNP通常是一种二等位基因的 查看更多>
Cell Isolation Techniques Methods and MaterialsWorking With EnzymesAll of the enzymes Worthington offers for tissue dissociation applications are available as 查看更多>
Log in radioactive material received and deduct amount of radioactive material used in each experiment in Radioisotope Log Book. Clear your bench top work area 查看更多>
Materials: P3X63Ag8.653 murine myeloma or YB2/0 (maintained at < 1 x 106/ml)50 w/v PEG 1500, warmed to 37° CMedium: IMDM supplemented with 20 fetal bovine s 查看更多>
Saghai-Maroof MA, Soliman KM, Jorgensen RA, & Allard RW (1984) PNAS 81:8014-8018DNA successfully isolated from fungal species of Cochliobolus, Aternaria, a 查看更多>
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cDNA文库构建SMART法 123
2519455062021-08-18

CDNASizeFractionation做完后的电泳检测,发现条带的大小都在5000bp左右,感觉是哪里有问题。前面步骤检测很好。不知道有问题没有?请哪位高人指点一下。
基因的表达是DNA-RNA-蛋白,期间有转录水平调控、转录后调控、翻译后调控等多种调控机制影响该基因的表达.所以蛋白水平高低的原因就可能是多方面的.蛋白表达多,可能是mRNA多,也可能mRNA变化不大,而是翻译多了;蛋白表达少,原因亦然.从2个水平检测一个基因的表达,可以更全面地了解该基因在该组织某个时期或某种条件下的变化受到什么水平的调控.
正常 因为mRNA的翻译效率不同啊 而且对mRNA的检测更加灵敏 当然也就是更加不准确 WB也是各种不准 反正肯定效率不同啦
基因组dna文库和cdna文库的区别 123
流泪的魔术师2017-12-07
一、 DNA文库和cDNA文库的概念
将某种生物的基因组DNA切割成一定大小的片段,并与合适的载体重组后导入宿主细胞进行克隆。这些存在于所有重组体内的基因组DNA片段的集合,即基因组文库,它包含了该生物的所有基因。
以mRNA为模板,经反转录酶催化,在体外反转录成cDNA,与适当的载体(常用噬菌体或质粒载体)连接后转化受体菌,则每个细菌含有一段cDNA,并能繁殖扩增,这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。
二、 DNA文库和cDNA文库的构建原理
DNA文库:用限制性内切酶切割细胞的整个基因组DNA,可以得到大量的基因组DNA片段,然后将这些DNA片段与载体连接,再转化到细菌中去,让宿主菌长成克隆。这样,一个克隆内的每个细胞的载体上都包含有特定的基因组DNA片段,整个克隆群体就包含基因组的全部基因片段总和称为基因组文库。
cDNA文库:以mRNA为模板,经反转录酶催化,在体外反转录成cDNA,与适当的载体常用噬菌体或质粒载体连接后转化受体菌,则每个细菌含有一段cDNA,并能繁殖扩增,这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。
三、DNA文库和cDNA文库的用途
基因组含有的基因在特定的组织细胞中只有一部分表达,而且处在不同环境条件、不同分化时期的细胞其基因表达的种类和强度也不尽相同,所以cDNA文库具有组织细胞特异性。cDNA文库显然比基因组DNA文库小得多,能够比较容易从中筛选克隆得到细胞特异表达的基因。但对真核细胞来说,从基因组DNA文库获得的基因与从cDNA文库获得的不同。DNA文库所含的是带有内含子和外显子的基因组基因,而从cDNA文库中获得的是已经过剪接、去除了内含子的cDNA展开
各位大神,我想构建一个植物-马铃薯的CDNA文库,不知道构建一个植物文库要多久时间,还有技术上的困难点是什么,希望懂得伙伴不吝赐教,谢谢了
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由于最近要从X动物体内扩增代谢有关的基因,但是用活体组织研磨提取的RNA反转录做模板的效果不佳。实验室之前有构建过这个的CDNA文库(CloneMiner?IIcDNALibrary),请问我能把cDNA文库提质粒来当模板吗?
由于对cDNA文库一无所知,有很多疑问。
1.cDNA文库如果取一部分出来接种,那原始文库是不是就不完整了?
2.能将原始cDNA文库接种扩大培养吗?
请有经验的给点指导,谢谢!
mRNA模板经反转录酶催化体外反转录cDNA步骤应该与DNA复制程类似需要原料mRNA模板四脱氧核糖核苷酸逆转录酶能量注意:获DNA片段含非编码区序列专业答).构建cDNA文库:物细胞总mRNA模板用反转录酶合互补双链cDNA接载体转入宿主建立基文库cDNA文库1、mRNA提取及其完整性确定1)总RNA提取RNA提取:APGC或NP-40或应用试剂盒提取总RNA2)mRNA离高等真核物mRNA3'端均poly(A)尾总RNA通寡聚(DT)纤维柱离mRNA或利用磁珠制备纯mRNA某些情况裂解细胞用蔗糖梯度制备mRNA-核糖体复合物作提取mRNA替换途径3)mRNA纯化①按照总mRNA进行级主要用琼脂糖凝胶电泳蔗糖密度梯度离进行级;②聚核糖体免疫纯化利用抗体纯化合目肽4)mRNA完整性确定确定mRNA完整性三种:①直接检测mRNA;②测定mRNA转译能力;③检测总mRNA指导合cDNA第链能力2、cDNA合克隆1)cDNA第链合用亲层析mRNA根据mRNA3'端poly(A)尾结构原理用12~20核苷酸oligo(dT)与纯化mRNA混合oligo(dT)与poly(A)结合作反转录酶引物反转录反应产物条RNA-DNA杂交链oligo(dT)结合mRNA3'端合全cDNA需要反转录酶mRNA端移另端种全合难达尤其mRNA链建立种随机引物合cDNA随机引物种度6~10核苷酸由4种碱基随机组DNA片段与oligo(dT)仅与mRNA3'端结合同mRNA同位点结合随机引物合产物RNA-DNA杂交体cDNA克隆载体前必须种杂交体RNA转变DNA链即形双链DNA2).双链cDNA合合cDNA第二条链两种种利用cDNA第链3'末端现发夹环特征种发夹结构反转录酶第链末端返折并且进行复制第链结合cDNA第二链提供用引物用种合双链cDNA端发夹环用单链特异S1核酸酶切S1核酸酶处理修剪cDNA顺序使cDNA丢失mRNA5'端部顺序另种用肠杆菌RNaseH进行修饰RNaseH能识别RNA-DNA杂交并其RNA切割短片段些RNA短片段仍与cDNA第链结合新合DNA所取代新合DNA存切口用DNA连接酶些切口连接起形条完整DNA链RNaseH优于S1核酸酶能获包括mRNA5'端全部或绝部更顺序cDNA3)cDNA重组载体合cDNA与载体DNA进行连接般3种:①借助于末端转移酶3'-OH端合均聚物能力双链cDNA线性化载体DNA3'-OH端别加均聚核苷酸链;②双链cDNA线性化载体DNA别用Klenow片段进行末端补平用T4DNA连接酶进行齐连接形重组体;③通粘性末端连接4).转化重组载体DNA定条件转化入肠杆菌形携带质粒菌株同重组DNA含同cDNA基整转化含自mRNA群体各种cDNA基转化群体构该mRNA全部遗传信息cDNA基文库5).目cDNA克隆鉴定用于cDNA文库筛选鉴定目cDNA主要3种:①核酸杂交②免疫杂交检测③cDNA同胞选择

已经在mirbase数据库下载水稻的所有miRNA序列,可以比对某种昆虫的转录组文库寻找靶基因吗?

可以用targetscan或者miRwalk网站吗?有什么方法吗?

要工作了,接着一个老师用smart方法构建的CDNA文库做,单位的要求是一年之内发一篇SCI,不知cDNA文库都可以继续哪些工作,有哪些应用?
我大概了解的一下,cDNA文库可以用来做酵母双杂交,也可以做基因功能研究,有没有具体的课件或者文章可以了解呢?
转录组即某个物种或特定细胞在某一功能状态下产生的所有RNA(包括mRNA,smallRNA及non-coding RNA等)的总和。转录组测序是指利用第二代高通量测序技术进行cDNA测序,全面快速地获取某一物种特定器官或组织在某一状态下的几乎所有转录本。相对于传统芯片而言,转录组测序无需预先设计探针,即可对任意物种的任意细胞类型的转录组进行检测,能够提供更精确的数字化信号,更高的检测通量以及更广泛的检测范围,是目前深入研究转录组复杂性的强大工具。

基因表达谱指通过构建处于某一特定状态下的细胞或组织的非偏性cDNA文库,大规模cDNA测序,收集cDNA序列片段、定性、定量分析其mRNA群体组成,从而描绘该特定细胞或组织在特定状态下的基因表达种类和丰度信息,这样编制成的数据表就称为基因表达谱。
反义RNA是指能和mRNA完全互补的一段小分子RNA或寡聚核苷酸片段,反义DNA是指能与基因DNA双链中的有义链互补结合的短小DNA分子。反义RNA和反义DNA主要是通过mRNA的翻译和基因DNA的转录而发挥作用[10]:1)抑制翻译。反义核酸一方面通过与靶mRNA结合形成空间位阻效应,阻止核糖体与mRNA结合,另一方面其与mRNA结合后激活内源性RNase或ribozyme,降解mRNA[3];2)抑制转录。反义DNA与基因DNA双螺旋的调控区特异结合形成DNA三聚体(triplex),或与DNA编码区结合,终止正在转录的mRNA链延长[3]。此外,反义核酸还可抑制转录后mRNA的加工修饰,如5'端加帽、3'端加尾(poly a)、中间剪接和内部碱基甲基化等,并阻止成熟mRNA由细胞核向细胞浆内运输。向左转|向右转
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