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NEB/NEBNext® RNA First Strand Synthesis Module/E7525S/24 reactions
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Description:
TheNEBNextRNAFirstStrandSynthesisModuleisdesignedforsynthesisofCDNAfromRNAfragmentsusingProtoScriptIIReverseTranscriptaseandrandompriming.SinglestrandcDNAcanbeuseddirectlyforsecondstrandcDNAsynthesis.
FunctionalValidation
Eachsetofreagentsisfunctionallyvalidatedtogetherthroughconstructionandsequencingofatranscriptomelibraryandsequencedona.
LotControl
Thelotsprovidedaremanagedseparatelyandqualifiedbyadditionalfunctionalvalidation.Individualreagentsundergostandardenzymeactivityandqualitycontrolassays,andalsomeetstringentcriteriaintheadditionalqualitycontrolslistedoneachindividualcomponentpage
ReagentsSupplied
Thefollowingreagentsaresuppliedwiththisproduct:
| Storeat(°C) | Concentration | |
| NEBNextFirstStrandSynthesisReactionBuffer | -20 | |
| RandomPrimers | -20 | |
| ProtoScript®IIReverseTranscriptase | -20 | 200,000units/ml |
| MurineRNaseInhibitor | -20 |
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蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
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2018-12-26
一 原理：IP是利用抗原蛋白质和抗体的特异性结合以及细菌蛋白质的“prorein A"特异性地结合到免疫球蛋白的FC片段的现象活用开发出来的方法。目前多用精制的prorein A预先结合固化在argarose的beads上，使之与含有抗原的溶液及抗体反应后，beads上的prorein A就能吸附抗原达到精制的目的。 查看更多
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2018-12-26
RNA-isolation (TRIZOL method)Isolation of RNA from whole worms using TRIZOL reagent (Gibco-BRL).1) Wash worms from a 60 mm plate with 1 ml DEPC-treated water.2 查看更多
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2018-12-26
SNP的检测知识：人类基因组中存在着广泛的多态性，最简单的多态形式是发生在基因组中的单个核苷酸的替代，即单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphisms, SNPs）。SNP通常是一种二等位基因的 查看更多
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2018-12-26
I. Safety Procedures A. ChemicalsA number of chemicals used in this laboratory are hazardous. All manufacturers of hazardous materials are required by law to s 查看更多
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2018-12-26
8 eggs per day, day 7- day 13 cut CAM, wash in precooled PBS, in 10 ml WASH 1 (PBS, 5 mM EDTA, COMPLETE) on ice cut in pieces in petri dish on ice centrifuge 4 查看更多
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2018-12-26
NOTE: The sooner after cell fusion you can do a limiting dilution, the better your chances of retaining strong positive hybridomas. Remove spleen cells from 1 查看更多
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2018-12-26
The scanning translation initiation model suggests that 40S ribosomal subunit preloaded with factors bind to the 5’ end of the mRNA near the cap. The 48S subu 查看更多
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2018-12-26
General comments: Antibodies, like most proteins, do not like to be freeze-thawed. Avoid repetitive freezing of your solution. The best way to store your antib 查看更多
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Isolation of Actin and Myosin FilamentsLEVEL III Materials Relaxing Solution0.1 M KCl0.001 M MgCl5 mM ATP0.016 M NaHPONaHPOAdjust pH to 7.30.05 M Sodium phosph 查看更多
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众所周知，科研工作者在进行医药方面的科学研究之前，需要制定完善的统计研究设计方案，那么什么样的设计方案才称得上是完善的呢？一般来说，完善的设计方案需具备以下几个条件：实验所需的人力、物力和时间资源；实验设计的“三要素”和“六原则”均符合专业和统计学要求，对实验数据的收集、整理、分析等有一套规范的规定和正确的方法。而其中准确把握统计 查看更多
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2021-08-29
An important part of characterizing any protein molecule is to determine its size and shape. Sedimentation and gel filtration are hydrodynamic techniques that 查看更多
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The Fc Epsilon Receptor 1 signaling pathway in mast cells uses multiple core signal path to achieve its necessary ends. Through the BTK protein and PKC Mast ce 查看更多
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【求助】请教个基因组文库构建的问题 核酸基因技术讨论版...123
zyism_2021-07-23
基因组酶切后，切胶回收浓度大概为多少才可以进行下一步实验？为什么二十几的浓度和载体连不上呢？载体也明明去磷酸化了，单连载体的时候也不会自连。那为什么把载体和酶切后的基因组连起来转化后挑菌做PCR验证却有很多空载呢？我的基因组酶切大小为2kb~4kb。上面那排7kb~10kb的带是什么东西呢？
...知道要写基因组文库还是cdna文库还是部分基因文库～怎 123
lushao7202017-12-07
这种题要根据题干内容来定。
（1）人的免疫球蛋白细胞 cDNA文库（cDNA 文库是把内含子去除后的裸DNA，人的和牛的DNA是不能识别的就是因为内含子的缘故，cRNA反转录后的是去除后的）。
（1）人的免疫球蛋白细胞 cDNA文库（cDNA 文库是把内含子去除后的裸DNA，人的和牛的DNA是不能识别的就是因为内含子的缘故，cRNA反转录后的是去除后的）。
基因组文库和cDNA文库的区别_123
2017-12-07
对于真核生物来说，cDNA文库里面获取的基因缺了内含子和非编码区等。
cDNA是DNA转录成RNA再逆转录获得的，而在转录时，原DNA上的内含子和非编码区都会被加工切掉，只剩下原DNA编码区上的外显子对应的RNA片段，再逆转录的话，得到的cDNA就跟原DNA不同了。
所以要基因组测序，提供cDNA文库是不够的
cDNA是DNA转录成RNA再逆转录获得的，而在转录时，原DNA上的内含子和非编码区都会被加工切掉，只剩下原DNA编码区上的外显子对应的RNA片段，再逆转录的话，得到的cDNA就跟原DNA不同了。
所以要基因组测序，提供cDNA文库是不够的
cDNA文库的构建方法与原理 123
Onobel2021-08-23
不知道大家做过人的retina的CDNA文库构建吗？
我从未做过，不知道以下四种：
StandardcDNALibraries
LargeinsertcDNALibraries
NormalizedcDNALibraries
SubtractedcDNALibraries
其中StandardcDNALibraries和NormalizedcDNALibraries，SubtractedcDNALibraries有啥区别阿？
我只是想构建文库，以后可以用来做southern的probe，或者以后可以拿来做做蛋白方面的等等。
还有两个问题：
1.大家cDNA文库构建的时候都是先直接提取mRNA的吧？大家推荐以下用什么kit？
2.先提取总RNA然后再提取mRNA；直接从组织中提取mRNA.这两者有什么主要区别？
不好意思，如果提的问题是有错误，多多包涵。。。
我从未做过，不知道以下四种：
StandardcDNALibraries
LargeinsertcDNALibraries
NormalizedcDNALibraries
SubtractedcDNALibraries
其中StandardcDNALibraries和NormalizedcDNALibraries，SubtractedcDNALibraries有啥区别阿？
我只是想构建文库，以后可以用来做southern的probe，或者以后可以拿来做做蛋白方面的等等。
还有两个问题：
1.大家cDNA文库构建的时候都是先直接提取mRNA的吧？大家推荐以下用什么kit？
2.先提取总RNA然后再提取mRNA；直接从组织中提取mRNA.这两者有什么主要区别？
不好意思，如果提的问题是有错误，多多包涵。。。
多功能酶标仪的用途有哪些123
天阶小雨2021-07-21
下列关于cDNA文库和基因组文库的说法中.不正确的是( )A.cDNA...123
hispringapril2017-12-07
目的基因来自真核生物，受体细胞为原核细胞，需要用CDNA文库。
基因组文库是一个比较笼统的概念。这个文库可以指某种真核生物的基因组，也可以指某种原核生物的基因组。实质是将某种生物的全部遗传信息贮存在一个受体菌群体中，做为目的基因的来源。
基因组文库是一个比较笼统的概念。这个文库可以指某种真核生物的基因组，也可以指某种原核生物的基因组。实质是将某种生物的全部遗传信息贮存在一个受体菌群体中，做为目的基因的来源。
CDNA文库筛选 实验方法 123
小柒pfum2021-07-22
1 核酸杂交
用,靠.规模析文库克隆.
1)同源探针:至少含所需cDNA克隆部确切序列.用于部克隆离cDNA文库全克隆.
2)部同源探针:探针序列与所要筛选cDNA克隆序列相关相同.用于克隆家族基.
3)总cDNA探针:
通反转录酶均匀掺入放射性核苷酸或通总或级离poly(A)+mRNA进行末端标记获cDNA探针.
cDNA扣除探针:
第种mRNA制备cDNA探 针, 连续与20倍量第二种mRNA杂交;
收未杂交cDNA探针, 再与100倍量第种mRNA杂交, 使原mRNA些特异序列高度富集.
* 主要用于探测cDNA文库与调节水平所差别mRNA克隆.
5)合寡核苷酸探针
2 特异性免疫检测
cDNA表达文库,目基表达产 物能与特异性抗体发免疫反应,通酶加检测
3 cDNA克隆同胞检测
cDNA文库若干组含10-100克隆易于处理亚cDNA文库,每组亚cDNA文库进行检测,鉴定阳性库再断其更细库进行检测,直获阳性单克隆.
4 cDNA克隆确证
cDNA克隆含编码某特定蛋白质完整氨基酸序列放读框.
第四节 目基离
外源基:
插入载体内特定片段基.
目基:
些已或者准备要离,改造,扩增或表达特定基或DNA片段.图" class="ikqb_img_alink">
用,靠.规模析文库克隆.
1)同源探针:至少含所需cDNA克隆部确切序列.用于部克隆离cDNA文库全克隆.
2)部同源探针:探针序列与所要筛选cDNA克隆序列相关相同.用于克隆家族基.
3)总cDNA探针:
通反转录酶均匀掺入放射性核苷酸或通总或级离poly(A)+mRNA进行末端标记获cDNA探针.
cDNA扣除探针:
第种mRNA制备cDNA探 针, 连续与20倍量第二种mRNA杂交;
收未杂交cDNA探针, 再与100倍量第种mRNA杂交, 使原mRNA些特异序列高度富集.
* 主要用于探测cDNA文库与调节水平所差别mRNA克隆.
5)合寡核苷酸探针
2 特异性免疫检测
cDNA表达文库,目基表达产 物能与特异性抗体发免疫反应,通酶加检测
3 cDNA克隆同胞检测
cDNA文库若干组含10-100克隆易于处理亚cDNA文库,每组亚cDNA文库进行检测,鉴定阳性库再断其更细库进行检测,直获阳性单克隆.
4 cDNA克隆确证
cDNA克隆含编码某特定蛋白质完整氨基酸序列放读框.
第四节 目基离
外源基:
插入载体内特定片段基.
目基:
些已或者准备要离,改造,扩增或表达特定基或DNA片段.图" class="ikqb_img_alink">
rna干扰123
fupeining2021-08-29
你在哪看到加的
什么是cDNA?_浙江嘉兴王甫荣123
冷漠MAYO2021-08-17
网站在线客服软件回头客CRM有这些特点。
1、属性自定义
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老师您好,最近在做干扰,说SiRNA起效需46小时,那我认为在某一...123
蚂蚁囊浇312021-08-22
基因的表达是DNA-RNA-蛋白,期间有转录水平调控、转录后调控、翻译后调控等多种调控机制影响该基因的表达.所以蛋白水平高低的原因就可能是多方面的.蛋白表达多,可能是mRNA多,也可能mRNA变化不大,而是翻译多了；蛋白表达少,原因亦然.从2个水平检测一个基因的表达,可以更全面地了解该基因在该组织某个时期或某种条件下的变化受到什么水平的调控.
基因组文库的类型有()_123
风生Ohg32起2017-12-07
cDNA文库
以mRNA为模板，经反转录酶催化，在体外反转录成cDNA，与适当的载体常用噬菌体或质粒载体连接后转化受体菌，则每个细菌含有一段cDNA，并能繁殖扩增，这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。基因组含有的基因在特定的组织细胞中只有一部分表达，而且处在不同环境条件、不同分化时期的细胞其基因表达的种类和强度也不尽相同，所以cDNA文库具有组织细胞特异性。cDNA文库显然比基因组DNA文库小得多，能够比较容易从中筛选克隆得到细胞特异表达的基因。但对真核细胞来说，从基因组DNA文库获得的基因与从cDNA文库获得的不同，基因组。DNA文库所含的是带有内含子和外显子的基因组基因，而从cDNA文库中获得的是已经过剪接、去除了内含子的cDNA
基因组文库
用限制性内切酶切割细胞的整个基因组DNA，可以得到大量的基因组DNA片段，然后将这些DNA片段与载体连接，再转化到细菌中去，让宿主菌长成克隆。这样，一个克隆内的每个细胞的载体上都包含有特定的基因组DNA片段，整个克隆群体就包含基因组的全部基因片段总和称为基因组文库。
将某种生物的基因组DNA切割成一定大小的片段，并与合适的载体重组后导入宿主细胞进行克隆。这些存在于所有重组体内的基因组DNA片段的集合，即基因组文库，它包含了该生物的所有基因。展开
以mRNA为模板，经反转录酶催化，在体外反转录成cDNA，与适当的载体常用噬菌体或质粒载体连接后转化受体菌，则每个细菌含有一段cDNA，并能繁殖扩增，这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。基因组含有的基因在特定的组织细胞中只有一部分表达，而且处在不同环境条件、不同分化时期的细胞其基因表达的种类和强度也不尽相同，所以cDNA文库具有组织细胞特异性。cDNA文库显然比基因组DNA文库小得多，能够比较容易从中筛选克隆得到细胞特异表达的基因。但对真核细胞来说，从基因组DNA文库获得的基因与从cDNA文库获得的不同，基因组。DNA文库所含的是带有内含子和外显子的基因组基因，而从cDNA文库中获得的是已经过剪接、去除了内含子的cDNA
基因组文库
用限制性内切酶切割细胞的整个基因组DNA，可以得到大量的基因组DNA片段，然后将这些DNA片段与载体连接，再转化到细菌中去，让宿主菌长成克隆。这样，一个克隆内的每个细胞的载体上都包含有特定的基因组DNA片段，整个克隆群体就包含基因组的全部基因片段总和称为基因组文库。
将某种生物的基因组DNA切割成一定大小的片段，并与合适的载体重组后导入宿主细胞进行克隆。这些存在于所有重组体内的基因组DNA片段的集合，即基因组文库，它包含了该生物的所有基因。展开
基因诊断与基因治疗习题及答案123
Kyoya392021-07-27
反义RNA是指能和mRNA完全互补的一段小分子RNA或寡聚核苷酸片段，反义DNA是指能与基因DNA双链中的有义链互补结合的短小DNA分子。反义RNA和反义DNA主要是通过mRNA的翻译和基因DNA的转录而发挥作用[10]：1）抑制翻译。反义核酸一方面通过与靶mRNA结合形成空间位阻效应，阻止核糖体与mRNA结合，另一方面其与mRNA结合后激活内源性RNase或ribozyme，降解mRNA[3]；2）抑制转录。反义DNA与基因DNA双螺旋的调控区特异结合形成DNA三聚体（triplex），或与DNA编码区结合，终止正在转录的mRNA链延长[3]。此外，反义核酸还可抑制转录后mRNA的加工修饰，如5'端加帽、3'端加尾（poly a）、中间剪接和内部碱基甲基化等，并阻止成熟mRNA由细胞核向细胞浆内运输。向左转|向右转
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