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1 确定基因中同源性小的片段做干扰载体的目的片段，防止干扰到材料中含有的其他同源基因；2 确定干扰载体中可以用的2个酶切位点，3 设计2对带有不同酶切位点的引物，分别扩增正、反向片段，并检查序列是否正确没有突变；4 将正向片段连接到酶切过的干扰载体中，pcr鉴定； 5 再将反向片段连上去，pcr鉴定。
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