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ZYMO RESEARCH/Genomic DNA Clean & Concentrator-10/25 Preps/D4010
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ZYMO RESEARCH/Genomic DNA Clean & Concentrator-10/25 Preps/D4010
品牌 / 
ZYMO RESEARCH
货号 / 
D4010
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Purify high molecular weight DNA from enzymatic reactions and dilute samples.
Highlights

  • Quick, 5-minute clean-up of large-sized DNA from any enzymatic reaction or impure preparation without messy precipitations.
  • Unique spin column for low volume elution of ultra-pure, high-yield DNA.
  • Eluted DNA is ideal for PCR, endonuclease digestion, sequencing, etc.
Description

The Genomic DNA Clean & Concentrator-10 (gDCC) is a gDNA clean up kit that provides quick, 5 minute recovery of ultra-pure, large-sized DNA (e.g., genomic, mitochondrial, plasmid (BAC/PAC), viral, phage, WGA DNA, etc.) from any enzymatic reaction or impure preparation (e.g., Proteinase K digestion). There is no need for organic denaturants, chloroform, or messy precipitations: simply add the specially formulated ChIP DNA Binding Buffer to a sample and then transfer the mixture to the supplied Zymo-Spin Column. Eluted DNA is suitable for sequencing, PCR, endonuclease digestion, and other enzymatic procedures. This gDNA clean up kit is also compatible with smaller DNAs (50 bp to 10 kb) from PCR, digestions, crude plasmid preparations, cDNA synthesis, etc.


Applicable ForEluted DNA is ideal for ligation, sequencing, labeling, PCR, microarray, transfection, transformation, restriction digestion procedures, and any other sensitive downstream application
Elution Volume≥ 10 µl of DNA Elution Buffer
EquipmentMicrocentrifuge
PurityA260/A280 > 1.8, A260/A230 > 1.8
Sample SourceEnzymatic reactions or impure preparations containing genomic DNA.
Sample StorageEluted DNA can be used immediately or stored at ≤ -20°C.
Size Range50 bp to 200 kb
YieldRecovery of DNA ranges from 70 - 95%

Q1: What is the lower limit and minimal amount of DNA that can be recovered?

Picogram levels of DNA can be recovered. The limitation is based on sensitivity of detection method.

Q2: How can I process naked DNA stored in DNA/RNA Shield?

Use the standard protocol (add 2 or 5 volumes of DNA binding buffer depending on DNA size).

Q3: What should I do if I did not add ethanol to the DNA Wash Buffer before starting?

The DNA will be eluted off the column during the wash step. Rebind samples using the appropriate amount of DNA Binding Buffer and wash the column with the properly prepared wash buffer.

Q4: What happens if more DNA was loaded on the columns than the stated maximum binding capacity?

Oversaturation of the column can result in total DNA loss due to clogging of silica matrix.

Q5: How many times can columns be reloaded?

Zymo Research recommends no more than 5 times, as binding efficiency might decrease.

Q6: What is the minimum input volume of DNA sample?

Working with volumes below 50 µl can result in decreased recovery. Zymo Research recommends raising the starting volume to 100 µl with water to ensure optimal binding conditions.



Cat #NameSizePrice
C1002-25Zymo-Spin IC-XL25 Pack$34.00
C1002-50Zymo-Spin IC-XL50 Pack$66.00
D5201-1-50ChIP DNA Binding Buffer50 ml$37.00
C1001-50Collection Tubes50 Pack$15.00
C1001-500Collection Tubes500 Pack$52.00
C1001-1000Collection Tubes1000 Pack$90.00
D4003-2-6DNA Wash Buffer (Concentrate)6 ml$10.00
D4003-2-24DNA Wash Buffer (Concentrate)24 ml$33.00
D3004-4-1DNA Elution Buffer1 ml$11.00
D3004-4-4DNA Elution Buffer4 ml$10.00
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本方案基于一种 DNA 测序反应,该反应测定紧邻测序引物(在方案中称为 SNP 引物)3'端的一个碱基的性质。SNP 引物设计成可以紧邻于待分型 DNA 的多态位点上游夏性。当目的 DNA 和合适的经染料标记的终止分子(terminator) 以及 DNA 聚合酶温育时,在多态位点出现的等位碱基的互补碱基使 SNP 引物延伸。通过检测组装的终止分子类别,就能推知目的 DNA 上出现的等位碱基 查看更多>
SSLP 是含有短的简单序列重复的 DNS 片段,如 (CA),这些重复分散存在于真核基因组 DNA 中。由于这些 SSLP 在长度上的多态,即等位基因间重复次数的多态,SSLP 是非常有用的遗传学标志。用这些方法达到自动化分型每个标志的关键步骤是选择合适的重复单元侧翼序列的 PCR 引物。 查看更多>
本单元所讲的是用来诊断营养不良基因缺失的一种多重 PCR 方法。许多缺失末端能被确定,依据翻译可读框的结果来预测疾病(如 DMD 与 BMD) 的严重程度。 查看更多>
尽管整合性转化的频率很低,但可以通过与整合位点同源的克隆化基因内的限制性位点将质粒线性化以提高转化效率。得到的整合体含有完整的质粒,两侧为基因的完整拷贝。 查看更多>
随着转基因农作物的大量种植,其安全性问题也日益受到人们的重视。2002年我国要求对转基因农作物实行标签管理。抗草甘膦(glyphosate)大豆 (商品名,roundup ready soybean)是在传统大豆株Variety A5403中转入外源基因CAMV-35S启动子、抗草甘膦基因CP4-EPSPS和NOS终止子而得到。它是目前使用最广的转基因作物之一,每年至少有 800万吨转基因大豆进入我国市场。因此,研究抗草甘膦大豆的快速检测方法具有重要意义。目前采用PCR检测转基因大豆的方法大多是采用琼脂糖 查看更多>
尽管整合性转化的频率很低,但可以通过与整合位点同源的克隆化基因内的限制性位点将质粒线性化以提高转化效率。得到的整合体含有完整的质粒,两侧为基因的完整拷贝。 查看更多>
Athena Enzyme Systems公司产品介绍【代理商代购现货】 查看更多>
多聚酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)是一种模拟天然DNA复制过程,在体外扩增特异性DNA(或RNA)片段的新技术。本实验是将待检双链DNA经94℃高温变性 成单链作模板,然后加入一对人工合成的寡核苷酸引物,引物分别与待扩增DNA片段的两端互补,经55℃ 低温退火,引物与模板互补结合。在72℃条件下,结合于模板上的引物在DNA聚合酶的催化下,利用反应体系中的4种dNTP为原料,按碱基互补配对的方式 延伸合成两条新的DNA链。所扩增的DNA可作为下一轮扩增反应的模板。重复 查看更多>
Easy Subcloningby Michael KoelleSubcloning should be easy and fast, and work every time. The following protocols minimize the number of manipulations required 查看更多>
PCR可用以指数扩增位于两个特定引物杂交位点之间的DNA片段,而在连接介导 的单侧PCR中,本质上,它只需要一个引物杂交位点的特异性,第二个引物是通过连 接反应加上的单一接头。这个接头和旁侧的基因特异性引物一起可以对任 何DNA片段进行指数级的扩增。由于一个确定的已知长度的序.列被加于每个片段,可以完整地扩增一些复杂的DNA群体,如分辨率达到单碱基水平的序列梯。来源:《精编分子生物学实验指南》第五版 查看更多>
对CGG重复片段的PCR分析要比Southern分析(基本方案2)快,且能够准确确定正常片段(6~45次重复)、中间状态(45~55次重复)及前突变单体情况(55~200 次重复)。PCR同时也能够检测出各世代间重复次数的小的改变。在PCR反应中用7-deaza-2'-dGTP代替dGTP可以完成常规PCR反应无法完成的全突变(>200次重复)的扩增。 查看更多>
在质粒载体中进行平末端片段的克隆 1.分别设立两个反应,用适当的限制性内切核酸酶消化1~10μg质粒DNA和外源DNA片段,使它们能产生平末端。2.苯酚:氯仿抽提与乙醇沉淀法纯化出已被消化的载体和外源DNA片段。3.分别用TE(pH 8.0)重新溶解纯化出的两种DNA沉淀,使终浓度为100 ng/ml。 假设1 bp 查看更多>
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辩论稿:克隆的好处与坏处123
梅桂华丽2021-09-01
克隆许优点:
1)克隆技术减轻些能母亲性痛苦
2)克隆实验实施推遗传发展制造物器官移植辟前景
3)克隆技术用于治疗神经系统损伤神经组织再干细胞修复神经损伤
克隆许缺点避免: 1)克隆技术干扰自演化程
2)克隆技术种昂贵技术需要量资金物专业参与失败率高
3)克隆技术应用于体导致代遗传性状工控制4)克隆技术用于创建超或强壮体魄智力迟钝外克隆技术效使用类遗传男性失意义
所说科技双刃剑优点缺点并没标准答案看着使用
选择目基,并设计相应引物;
  用引物PCR扩增目基片段;
  选择合适(抗性标记、酶切位点等)克隆载体(保真扩增),并PCR片段连接入克隆载体;(般用Taq酶PCR产物末尾自带A,Solution 1作用与两端各带T线性T载体直接相连)
  连接产物转化入受态肠杆菌,使含抗素培养基扩增;
  肠杆菌提取质粒(即前面连接产物),酶切鉴定测序鉴定均误目基片段切并与新表达载体连接,再转化入肠杆菌扩增,再提质粒,即想要目基片段克隆.
请问哪位行家知道拓扑异构酶怎么做免疫组化,有哪些技术和方法?
想要通过克隆基因的方法了解一个基因的功能,如何设计引物呢?
听说种找相近物种该基全序列做比找内含位置再设计引物内含区域测序没用种能能说具体操作选物种用软件比较序列
我刚考上硕士,导师就让我克隆一个基因,可我啥也不会,怎么办?
我已经知道了这个基因在其他物种中的序列和它所编码的蛋白质的序列,导师的意思是让我把它在大豆中克隆出来。我该怎么办?
听导师说,可能要用到RT-PCR。谁能帮帮我?
感激不尽啊!
真核表达载体克隆基因的时候把内含子也克隆进去了,在转到细胞里面表达时,这段内含子会被正确剪切掉吗?
工复制基
本实乃菜鸟若问题问清楚请指点
我现在需要克隆一个基因的全长编码序列,不知道该怎么办?能教教我吗?还有,我想请教一下,有没有什么网站可以明了的查到某种动物一个基因的外显子数目?谢谢了!
我的题目是鸡Mx基因的克隆,我的策略是先根据该基因家族(dynaminfamily)的氨基酸保守区设计简并引物克隆出该基因CDNA的部分片段,然后根据该片段序列设计基因特异性引物,利用RACE技术得到cDNA的3‘和5’末端,然后根据末端序列设计引物扩增出该基因全长cDNA.

我用简并引物从鸡cDNA中扩增出一个片段,约250bp,测序后拿来BLAST时却发现,与之同源性最高的并不是其它的Mx基因,而是人的某一个基因,比对的结果中与该序列同源性较高的有人及鼠Mx基因,但是同源性并不是很高。该基因在同一种生物的不同品种中具有多态性,已经有其它的鸡的Mx基因被克隆,按道理如果该片段是Mx基因的一部分它应该与其它的鸡的Mx基因有很高的同源性才对呀,所以,我怀疑简并引物PCR扩增出来的该片段不是Mx基因,因为RACE试剂盒很贵,现在也不敢继续作下去,怕作下去得不到什么结果。现在贴上我BLAST结果中score排在最前面的部分,还请有经验的兄弟帮我分析分析。我不胜感激。

Sequencesproducingsignificantalignments:(bits)Value

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gi|56720|emb|X52711.1|RNMX1RatmRNAforMx1protein402.1
最近有一些战友对荧光原位杂交技术比较感兴趣,我整理了相关资料和自己的心得,和大家交流一下。不妥之处,请大家指出,共同讨论学习。

内容发布在蚂蚁淘和螺旋网上,有兴趣的战友也可以去那里看一下。

内容分三部分:

一、概述

1、克隆性染色体异常是肿瘤的特征

2、染色体异常常见的类型

3、染色体异常的检测方法

二、荧光原位杂交及其探针

1、荧光原位杂交的原理

2、荧光原位杂交的探针

三、荧光原位杂交探针的制备和荧光原位杂交(按试验流程介绍)

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FISH.pdf(1237.91k)