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莫彷徨2011
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选择目基,并设计相应引物; 用引物PCR扩增目基片段; 选择合适(抗性标记、酶切位点等)克隆载体(保真扩增),并PCR片段连接入克隆载体;(般用Taq酶PCR产物末尾自带A,Solution 1作用与两端各带T线性T载体直接相连) 连接产物转化入受态肠杆菌,使含抗素培养基扩增; 肠杆菌提取质粒(即前面连接产物),酶切鉴定测序鉴定均误目基片段切并与新表达载体连接,再转化入肠杆菌扩增,再提质粒,即想要目基片段克隆.
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