【求助】如何克隆基因的全长编码序列
2021-07-23
问题描述：
我现在需要克隆一个基因的全长编码序列，不知道该怎么办？能教教我吗？还有，我想请教一下，有没有什么网站可以明了的查到某种动物一个基因的外显子数目？谢谢了！
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dtlxj76
用户
1.上NCBI网站差该基因的cDNA序列，当然还有物种区别，比如你要克隆人的基因，就查人的该基因的cDNA序列，2.然后设计该基因的上下游引物。3.提取该种组织的RNA，可用Trizol法4.反转录成cDNA，5.利用反转录的cDNA为模板，PCR扩增目的基因，6.将其克隆到载体上。大致思路是这样的，当然，还有很多细节，遇上再说。还是在NCBI网站上有。
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胡长圣
用户我也做的和你的差不多，也是要克隆一个基因，请问扩增出来的怎么知道是全长呢？而且怎么知道克隆的就是你想要的东西？
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