SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)实验原理和操作步骤
实验方法原理 | 该方案由方案蛋白质的SDS-PAGE实验中介绍的标准SDS-PAGE衍变而来。虽然在进行变性凝胶电泳时多选用SDS-PAGE,但阴禽子去污剂SDS仍然存在一些局限。例如,SDS在低温下会结晶,某些情况下还会使蛋白质聚集或沉淀,而且有些蛋白在SDS凝胶中不能很好地溶解或者出现异常的迁移现象。这些情况下,可选择采用阳离子去垢剂进行PAGE。这里讲到的不连续、阳离子去垢剂PAGE方法参照了Atkins等(1992)。这个系统中使用的是阳离子去垢剂CTAB(十六烷基三甲基溴化铵),其浓缩胶以两性离子精氨酸(作为浓缩溶液)和tricine[N-三(羟甲基)甲基甘氨酸]为缓冲体系。如果样品没有经过煮沸和外加还原剂,一些由CTAB电泳系统分离的蛋白质仍保持其酶学活性。 | ||
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实验材料 | 冷冻干燥后的蛋白样品或块状蛋白样品 试剂、试剂盒 | |
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发布于 : 2021-08-29
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