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| 实验材料 | 细胞 试剂、试剂盒 | PBSTdT反应混合液 仪器、耗材 | Parafilm膜 实验步骤 | 1.用无菌镊子将一无菌盖玻片放入35mm培养皿中。 2.将大约1X104细胞接种于无菌盖玻片上，培养24~48小时。凋亡诱导时，细胞铺满不超过80%。如细胞贴壁不太好，可以用纤连蛋白、聚赖氨酸或血清预处理盖玻片，以使细胞更好地贴壁生长。 3.诱导凋亡后，用pH7.2的PBS轻轻洗细胞1次，不要除去垂死细胞，用冰冷的甲醇固定10分钟。 4.室温空气干燥玻片5分钟，在pH7.2的PBS中温育10分钟重新水合。 5.按上述方法进行TUNEL反应。将合适的Parafilm膜放入温室，膜上加50μlTdT反应混合液，放盖玻片，细胞朝下在反应液上。37℃孵育1小时。 6.从室温中取出盖玻片，放回35mm培养皿中。用PBS洗细胞3次，用FlooroGuard固定液固定到载玻片上。 |
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发布于 ： 2018-08-03
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