实验方法原理 | 肌肉组织由肌细胞和肌纤维组成,带有横纹结构,通常选用Mallory磷钨酸-苏木精染色法(PTAH)显示横纹肌的变化情况。染色剂与所选择的组织成分能够牢固地结合,呈蓝色或棕红色。 | ||||||||
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实验材料 | 石蜡组织切片 试剂、试剂盒 | 苏木精磷钨酸蒸馏水高锰酸钾水溶液硫酸水溶液二甲苯乙醇中性树胶 实验步骤 | Mallory磷钨酸-苏木精染色液:苏木精0~1g,磷钨酸2g,蒸馏水100ml。将苏木精置20ml蒸馏水中加热溶解,再将磷钨酸溶于80ml蒸馏水中。苏木精冷却后加入磷钨酸水溶液,混合后置室温数周至数月成熟,可久存。如急用,可再加入0.177g高锰酸钾而促其成熟。 酸性高锰酸钾液:0.5%高锰酸钾水溶液50ml,0.5%硫酸水溶液50ml。 1.石蜡组织切片,常规脱蜡至水。 2.自来水洗1min,蒸馏水洗1min。 3.在酸性高锰酸钾液中氧化5~10min。 4.自来水洗1min,蒸馏水洗1min 5.用1%草酸液漂白2min。 6.自来水洗,蒸馏水洗2次。 7.入Mallory磷钨酸-苏木精染色液中12~48h。 8.直接用95%乙醇分化30s。 9.无水乙醇急速脱水,二甲苯透明和中性树胶封固。 注意事项 | 1.磷钨酸-苏木精配制后在室温下自然成熟,可用多年,使用时不要摇动。 2.95%乙醇快速分色时,注意切片上保持一定的红色,无水乙醇脱水后,迅速用滤纸吸干、透明和封固。 其他 | 结果:横纹肌呈紫蓝色,结缔组织纤维呈棕红色。 |