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Addgene/pAAV-hSyn-GRAB_NE1m/1unit/123308-AAVrg
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| Item | Catalog # | Description | Quantity | Price (USD) | ||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Plasmid | 123308 | Standard format: Plasmid sent in bacteria as agar stab | 1 | $75 | Add to Cart | |
| AAV9 | 123308-AAV9 | Virus (100 µL at titer ≥ 1×10¹³ vg/mL)and Plasmid.More Information | Add to Cart | |||
| AAV Retrograde | 123308-AAVrg | Virus (100 µL at titer ≥ 7×10¹² vg/mL)and Plasmid.More Information | Add to Cart | |||
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Backbone
- Vector backbonepAAV vector(Search Vector Database)
- Backbone sizew/o insert(bp)4495
- Vector typeAAV
Growth in Bacteria
- Bacterial Resistance(s)Ampicillin
- Growth Temperature37°C
- Growth Strain(s)NEB Stable
- Copy numberHigh Copy
Gene/Insert
- Gene/Insert nameGPCR activation based NE sensor GRAB_NE1m
- SpeciesH. sapiens (human)
- Insert Size (bp)1998
- Mutationcontains a glycine-to-threonine mutation at position C1
- PromoterhSyn
Cloning Information
- Cloning methodGibson Cloning
Resource Information
- Supplemental Documents
- pAAV-hsyn-GRAB-NE1m addgene.gb
- Terms and Licenses
- UBMTA
- Industry Terms
- Not Available to Industry
Depositor Comments
Please visit images/Addgene/449546.full.pdf for BioRxiv preprint.
Information for AAV9 (Catalog # 123308-AAV9)(Back to top)
Purpose
Ready-to-use AAV9 particles produced from pAAV-hSyn-GRAB_NE1m (#123308). In addition to the viral particles, you will also receive purified pAAV-hSyn-GRAB_NE1m plasmid DNA.
Synapsin-driven expression of GRAB-NE1m norepinephrine sensor in neurons. These AAV preparations are suitable purity for injection into animals.Delivery
- Volume100 µL
- Titer≥ 1×10¹³ vg/mL
- Pricing$350 USD for preparation of 100 µL virus + $30 USD for plasmid.
- StorageStore at -80℃. Thaw just before use and keep on ice.
- ShipmentViral particles are shipped frozen on dry ice. Plasmid DNA (≥ 200ng) will also be included in the shipment.
Viral Production & Use
- Packaging Plasmidsencode adenoviral helper sequences and AAV rep gene, AAV9 cap gene
- BufferPBS + 0.001% Pluronic F-68
- SerotypeAAV9
- PurificationIodixanol gradient ultracentrifugation
Biosafety
Requestor is responsible for compliance withtheir institution"s biosafety regulations.Lentivirus is generally considered BSL-2. AAV isgenerally considered BSL-1, but may requireBSL-2 handling depending on the insert.Biosafety Guide
Resource Information
- Terms and Licenses
- Ancillary Agreement for Penn Vectors
- Terms of Use for Viral Vectors
- Industry Terms
- Not Available to Industry
Viral Quality Control
Quality Control:
- Addgene ensures high quality viral vectors by optimizing and standardizing production protocols and performing rigorous quality control (QC) (see a list of our QC assays). Thespecific QC assays performed varies for each viral lot. To learn which specific QC assays were performed on your lot, please contact us.
- Titer: the exact titer of your sample will be reported on the tube. The titer you see listed on this page is the guaranteed minimum titer. See how titers are measured.
Visit our viral production page for moreinformation.
Information for AAV Retrograde (Catalog # 123308-AAVrg)(Back to top)
Purpose
Ready-to-use AAV Retrograde particles produced from pAAV-hSyn-GRAB_NE1m (#123308). In addition to the viral particles, you will also receive purified pAAV-hSyn-GRAB_NE1m plasmid DNA.
Synapsin-driven expression of GRAB-NE1 norepinephrine sensor. These AAV preparations are suitable purity for injection into animals.Delivery
- Volume100 µL
- Titer≥ 7×10¹² vg/mL
- Pricing$350 USD for preparation of 100 µL virus + $30 USD for plasmid.
- StorageStore at -80℃. Thaw just before use and keep on ice.
- ShipmentViral particles are shipped frozen on dry ice. Plasmid DNA (≥ 200ng) will also be included in the shipment.
Viral Production & Use
- Packaging Plasmidsencode adenoviral helper sequences and AAV rep gene, AAV retrograde cap gene from rAAV2-retro helper (plasmid #81070)
- BufferPBS + 0.001% Pluronic F-68 + 200 mM NaCl
- SerotypeAAV retrograde (AAVrg)
- PurificationIodixanol gradient ultracentrifugation
Biosafety
Requestor is responsible for compliance withtheir institution"s biosafety regulations.Lentivirus is generally considered BSL-2. AAV isgenerally considered BSL-1, but may requireBSL-2 handling depending on the insert.Biosafety Guide
Resource Information
- Terms and Licenses
- Terms of Use for Viral Vectors
- Industry Terms
- Not Available to Industry
Viral Quality Control
Quality Control:
- Addgene ensures high quality viral vectors by optimizing and standardizing production protocols and performing rigorous quality control (QC) (see a list of our QC assays). Thespecific QC assays performed varies for each viral lot. To learn which specific QC assays were performed on your lot, please contact us.
- Titer: the exact titer of your sample will be reported on the tube. The titer you see listed on this page is the guaranteed minimum titer. See how titers are measured.
Visit our viral production page for moreinformation.
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Retrograde functionality is dependent on high viral titers. Addgene recommends not diluting your AAV preps prior to use.蚂蚁淘电商平台
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公司简介
蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
淘搜索全球供应信息，找到合适的产品后在蚂蚁淘下单，然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、
运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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正品保证： 全球直采 在线追溯
蚂蚁淘所有产品都是自运营的，我们已经跟国外多家厂方建立品牌推广合作关系, 获得对方的支持和授权； 同时客户可以通过订单详情查看到货物从厂方至客户的所有流程， 确保货物的来源； 正规报关，提供13%增值税发票。
及时交付： 限时必达 畅选无忧
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售后申请： 耐心讲解 优质服务
蚂蚁淘提供的产品在使用过程中如因产品质量问题有售后需求时， 您可通过我的订单提交您的“申请售后”， 蚂蚁淘产品顾问会第一时间为您处理， 在售后服务过程中如遇到问题也可致电蚂蚁淘客服热线：4000-520-616。
2021-08-23
可能原因 建 议 检测样本不表达目的蛋白 选择表达量高的细胞作为阳性对照，用于确定检测样本是否为阴性 检测样本低表达目的蛋白 提高上样量，裂解液中注意加入蛋白酶抑制剂 转移不完全或过转移 可以用丽春红染膜并结合染胶（考马斯亮蓝）后确定条带是否转至膜上或转移过头；适当调整转膜的时间和电流 抗体不 查看更多
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2021-09-06
去垢剂产品名称：去垢剂产品简介：上海通善生物是去垢剂最权威的供应商，提供去垢剂的报价，咨询，技术服务，欢迎来电021-61806666咨询选购。产品库存：现货。产品价格：询价。供 应 商：通善生物。供应商地址：上海市闵行区金平路788弄166号。去垢剂说明书：去垢剂其它信息：货号产品名称级别K610-1L0.1X SSC BUFFER WITH 0.2% SDS超纯级K611-1L0.1X SSPE BUFFER WITH 0.2% S 查看更多
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2021-09-05
本页关键字：amresco去垢剂样品 amresco报价 amresco去垢剂样品，amresco报价。提供amresco去垢剂样品报价、咨询及技术服务，欢迎来电订购amresco去垢剂样品。中国试剂网经营实验试剂、实验耗材、实验仪器及实验技术服务。公司简介 Amresco 是全球著名的生化试剂生产商，其产品种类齐全，质量稳定，性价比好。深受广大用户的喜爱。Amresco公司来自美国，成立于 1976 年，为高质量生化试剂 / 试剂盒的 查看更多
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2021-09-20
产品描述... CHS990(对应Anatrace货号CH210) 5G Cholestery hemisuccinate 450 徕创 CHS990(对应Anatrace货号CH210) 25G Cholestery hemisuccinate 19... 查看更多
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2021-09-16
高效的巨噬细胞去除试剂 查看更多
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2021-09-03
显微镜耗材、玻璃量器、陶瓷搪瓷石英制品、病理一次性刀片、OCT冷冻包埋剂、日本羽毛刀片、德国莱卡刀片、英国珊顿刀片、美国伯舒纳刀片、樱花包埋剂、徕卡包埋剂、珊顿... 查看更多
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麦迪康医疗用品贸易（上海）有限公司在发布的ANIOSYME DLT PLUS中性全效多酶清洁剂1L供应信息，浏览与ANIOSYME DLT PLUS中性全效多酶清洁剂1L相关的产品或在搜索更多与ANIOSYME DLT PLUS中性全效多酶清洁剂1L相关的内容。 查看更多
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2021-08-31
产品描述... OTM990(对应Anatrace货号O320) 1G n-Octyl-β-D-Thiomaltopyranoside, Analytical Pure 260 徕创 OTM990(对应Anatrace货号O320) 5G n-Oct... 查看更多
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超声波清洗机在如今的清洗设备行业发展是非常的迅速的，而同样的超声波清洗机在使用的时候也是离不开清洗机的辅助作用的。那么对于超声波清洗机在使用的时候最常用哪些清洗机呢？下面郑州生元仪器小编就来详细的给大家介绍下吧！ 一般而言，超声波清洗机常使用的清洗剂包括这样两种，它们分别是：化学清洗剂和水基清洗剂。通常而言，清洗介质属于化学作用，而超声波清洗机则是物理作用，这两种作用相结合共同作用，从而对清洗对象进行充分、彻底的清洗工作。超声... 查看更多
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2021-09-01
我们的产品拥有和Anatrace、Avanti同类产品相同甚至更好的质量,但是我们的价格是它们的一半或者更低。我们希望通过我们不懈的努力,使科学家在有限的经... 查看更多
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2021-09-18
细胞和亚细胞提取物的制备实验的相关实验步骤、实验技巧、实验protocol、实验经验及常见问题。从组织和细胞中提取蛋白可能是蛋白质组研究中最关键的一步，因为这一步影响了蛋白的产率、生物活性和特定目的蛋白结构的完整性。因此... 查看更多
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2021-08-27
厦门慧嘉生物科技有限公司在发布的 噻唑兰（MTT）去垢剂 -Detergent Reagent供应信息，浏览与 噻唑兰（MTT）去垢剂 -Detergent Reagent相关的产品或在搜索更多与 噻唑兰（MTT）去垢剂 -Detergent Reagent相关的内容。 查看更多
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RIPA提蛋白后总有透明粘稠的胶冻样物质,求解决办法 蛋白质和糖...123
claire樱奈2021-07-20
RAW细胞，6孔板，RIPA提取蛋白（提前加好PMAF），每孔100uLRIPA，冰上用tip倒过来刮细胞，放置15min，12000gX15min离心，取上清。做WB时，沸水煮5min,胶冻样物质还是存在。
操作过程中发现离心后还是有胶冻样物质，和上清混在一起无法分开，严重的时候基本上全是胶冻样物质。
这个胶冻样物质应该是DNA，园友提供的方法为用超声碎裂器，但是我们实验室没有。请问还有别的方法可以使用么？
去垢剂在膜蛋白研究中的应用 123
亡灵睾叹232017-10-02
蛋白质变性剂的作用是破坏蛋白质的次级键，如氢键、盐键和疏水力，引起天然构象的解体；它们并不破坏共价键，如肽键和二硫键，故不涉及一级结构的改变。变性剂有溶解型和沉淀型两类，SDS、尿素和胍盐是有效的溶解型变性剂，而三氯乙酸、甲醇、和氯仿/异戊醇是有效的沉淀变性剂。一般而言，变性剂应用时常大大过量，破坏氢键的变性剂用量至少两倍于氨基酸的克分子数，如1克蛋白质可可结合1.4g。 SDS溶于水可达25%，对温度敏感，W/V贮存液最为方便。需要注意的是SDS的钾盐是不溶性的，所以SDS溶液中要避免混入钾盐。 尿素极易溶于水，可达10mol/L,在8mol/L以上要注意温度以防止沉淀。尿素在水中缓慢分解形成氨及高度活性的氰酸离子，故要防止高温。 三氯乙酸与过氯酸（TCA，PCA）都是极好的沉淀剂，能沉淀蛋白质和核酸，前者应用更为广泛。
去垢剂作为添加剂生长蛋白质晶体是一项很有用的技术。非离子和两性离子结晶剂在膜蛋白结晶中已经得到很好应用,目前已经变成常规的实验手段。去垢剂在一些可溶蛋白中也起到了一定的作用,提高了晶体的质量和结果的可重复性 ,促进了单晶的生长, 但具体的影响机制尚不明确。其可能原因是去垢剂的引入使结晶液滴中的蛋白分子更具有亲水性,使溶液中同质蛋白质分子增加。向左转|向右转
去垢剂作为添加剂生长蛋白质晶体是一项很有用的技术。非离子和两性离子结晶剂在膜蛋白结晶中已经得到很好应用,目前已经变成常规的实验手段。去垢剂在一些可溶蛋白中也起到了一定的作用,提高了晶体的质量和结果的可重复性 ,促进了单晶的生长, 但具体的影响机制尚不明确。其可能原因是去垢剂的引入使结晶液滴中的蛋白分子更具有亲水性,使溶液中同质蛋白质分子增加。向左转|向右转
western出错原因123
tangzq2021-07-21
本人最近在做WB时遇到一个奇怪的问题
我要做的两个目的蛋白，分子量一个是140的，另一个是36，内参用的GAPDH。这几天刚刚要做小鼠组织的蛋白，就把新提取的组织蛋白和之前做过的细胞蛋白一起上了，细胞和组织的各上了3个孔。
电泳转膜孵育等条件都是以前做成熟的
之后显影，细胞蛋白的，两个目的和内参都出得挺好；但是小鼠的组织蛋白只有分子量140的那个显出条带了，36的那个显出来的像一片水渍一样，斑片状的黑，内参有时也这样、有时干脆什么都不显。不知道这是什么原因...按说细胞同样的蛋白做出来，WB的各个步骤应该不会有太大问题的。
有点怀疑蛋白提取的不好，我提组织蛋白的的操作是在冰上进行的，裂解液也加有PMSF，用BCA法测得的蛋白浓度大概也有3~5mg/ml。
在这里求助各位高手~望给我指点一下~不胜感激啊！
我要做的两个目的蛋白，分子量一个是140的，另一个是36，内参用的GAPDH。这几天刚刚要做小鼠组织的蛋白，就把新提取的组织蛋白和之前做过的细胞蛋白一起上了，细胞和组织的各上了3个孔。
电泳转膜孵育等条件都是以前做成熟的
之后显影，细胞蛋白的，两个目的和内参都出得挺好；但是小鼠的组织蛋白只有分子量140的那个显出条带了，36的那个显出来的像一片水渍一样，斑片状的黑，内参有时也这样、有时干脆什么都不显。不知道这是什么原因...按说细胞同样的蛋白做出来，WB的各个步骤应该不会有太大问题的。
有点怀疑蛋白提取的不好，我提组织蛋白的的操作是在冰上进行的，裂解液也加有PMSF，用BCA法测得的蛋白浓度大概也有3~5mg/ml。
在这里求助各位高手~望给我指点一下~不胜感激啊！
【求助】非离子型去垢剂是否影响包被_问答详情_去垢剂_其他_生化试...123
xiaxia_xmu2011-02-14
各位战友好！我纯化一个膜蛋白，计划用来做单抗，但膜蛋白里含有一定浓度（0.1%左右）的tritonX-100，请问这样是否会影响包被呢？如果影响那有没有替代筛选方案？
【求购】急求去垢剂SB 310 蛋白质和糖学技术讨论版论坛123
liuchenxi20042007-03-30
因2DE实验需要，急需上述去垢剂，北京地区。
关于膜蛋白提取去垢剂选择的问题 蛋白质和糖学论坛123
李征宇2004-12-22
文献上都强调要选用强的去垢剂，不知道各位在这方面有什么心得吗？是不是需要同时使用多种去垢剂。关于SB3-10，ASB14等，大家有建议吗？我准备根据文献同时使用CHAPS和ASB14。大家看如何
这煮蛋器里的加热胆上是垢还是什么?去垢剂去除不了123
2017-10-02
这煮蛋器里的加热胆（银色）上是垢还是什么？去垢剂去除不了，怎办？
【专题讨论】蛋白分离纯化及填料选择问题超强技术支持,尽管问:) ...123
chromatography2021-07-22
chromatography战友，
我打算用HPLC分离已经初步纯化的蛋白，大小40kd到200kd，机器是安捷伦1200.
目前只有C18的柱子，用来分环肽。
如果分比较大的蛋白，有什么效果相对好的柱子，请推荐一下。
在网上见到有人说C18也可以试着分析大蛋白，不知道会不会堵，洗不下来？
我打算用HPLC分离已经初步纯化的蛋白，大小40kd到200kd，机器是安捷伦1200.
目前只有C18的柱子，用来分环肽。
如果分比较大的蛋白，有什么效果相对好的柱子，请推荐一下。
在网上见到有人说C18也可以试着分析大蛋白，不知道会不会堵，洗不下来？
关于不同类型的缓冲剂和去垢剂的使用区别(转)_贺艳芬123
降龙一巴掌2021-07-23
实验中我们会使用到不同的缓冲系统以及一些去垢剂，
如常用于缓冲的Tris、HEPES、MPOS等等，去垢剂如NP40,Tween-20，TritonX100,CHAPS，脱氧胆酸钠，SDS等等，
大家能说说这些试剂的使用区别吗（最好讲讲某些情况下使用一些会优于另一些的例子）
有时候某些裂解液含10%左右甘油，又是为何？
平时我们用习惯了一些配方，可能有时候不太清楚为何有些是可替代的，有些是不可替代的，借此机会想听听大家的见解？
如常用于缓冲的Tris、HEPES、MPOS等等，去垢剂如NP40,Tween-20，TritonX100,CHAPS，脱氧胆酸钠，SDS等等，
大家能说说这些试剂的使用区别吗（最好讲讲某些情况下使用一些会优于另一些的例子）
有时候某些裂解液含10%左右甘油，又是为何？
平时我们用习惯了一些配方，可能有时候不太清楚为何有些是可替代的，有些是不可替代的，借此机会想听听大家的见解？
请问非离子型去垢剂,能进c18硅胶色谱柱吗? 药学 药物分析...123
huangxuliang2017-06-03
请问非离子型去垢剂NP40或者Triton-x100，能进c18硅胶色谱柱吗？
我有0.1M PB 和30%Triton X100,怎样配制成PBS中含有1%的Triton ...123
狸TA07382017-10-02
Triton X-100是一种非离子型去垢剂分子式：C14H22O(C2H4O)n用途：Triton X-100是一种比较温和的去垢剂（表面活性剂或称界面活性剂）,常作为添加剂使蛋白保持稳定,尤其是膜蛋白.性质：Triton X-100对细菌等微生物没有杀伤作用.2.Triton X-100在紫外波段下有光吸收（lambda max = 275 nm and 283 nm in methanol）,因此,当缓冲液中存在Triton X-100时不能通过测定280nm光吸收来进行蛋白定量.3.Triton X-100常与CHAPS等zwitterionic 去垢剂一起使用来纯化膜蛋白,使膜蛋白保持其天然构象.4.Triton X-100可以提高真核细胞细胞膜的通透性,因此在Immunostaining时常使用含 0.1%-0.5%Triton X-100的PBS或TBS.5.Triton X-100非常稳定,密封避光 +2 to +8℃条件下可以长期保存.6.Triton X-100是透明,略显粘稠,稍微发黄的液体.7.Triton X-100的密度为1.07 g/ml,pH6.0-8.0（5%的溶液）.8.Triton X-100可以高压灭菌.9.用Triton X-100来裂解细胞时,0.1% Triton X-100就足够了,不过,达到0.5%时也没问题.10.蛋白酶K在含1% Triton X-100的溶液中依然保持活性.11.可以使用Amberlite hydrophobic XAD resins and Rezorian A161 cartridges 来去除Triton X-100 .去垢剂(又称表面活性剂)是一类即具有亲水基又具有疏水基的物质,一般具有乳化、分散、和增溶作用,可分阴离子、阳离子和中性去垢剂等多种类型,中性去垢剂在蛋白提取中应用的较多.中性去垢剂又称非离子表面活性剂,对蛋白质的变性作用影响较少,宜于蛋白质或酶提取之用.一般市售中性去垢剂有聚乙二醇类,如PEG200；多元醇类表面活性剂,如山梨醇、司盘类和吐温类；聚氧乙烯醇醚,如苄泽类、平平加类；聚氧乙烯烷基苯酚醚,如Igepal CO、乳化剂OP、Triton、Pluronic(用作消泡剂、润湿剂、增溶剂)、泡敌.中性去垢剂作用后可通过Sephadex LH-50柱除去；也可直接上DEAE-Sephadex柱层析分离目的蛋白,不必先除去去垢剂.
核酸提取常见试剂的作用原理复习课程123
freshmannasn2021-07-24
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