
The Advantage HD Polymerase Mix provides maximum fidelity and extended PCR product length, making it particularly useful for applications that require high accuracy, such as cDNA cloning, site-directed mutagenesis, and mutation genotyping (i.e., SNP analysis).
The Advantage HD Polymerase Mix consists of a novel DNA polymerase with a hot-start antibody, and comes with a tube of 5X buffer (with Mg2+).
The Advantage HD Polymerase Mix provides maximum fidelity and extended PCR product length, making it particularly useful for applications that require high accuracy, such as cDNA cloning, site-directed mutagenesis, and mutation genotyping (i.e., SNP analysis).
The Advantage HD Polymerase Mix consists of a novel DNA polymerase with a hot-start antibody, and comes with a tube of 5X buffer (with Mg2+).
Advantage HD Polymerase Mix provides outstanding accuracy due to the presence of 3" → 5" exonuclease activity that results in an extremely low error rate. It also performs extremely well on GC-rich and other more complex templates. The Advantage HD Polymerase Mix amplifies targets of up to 8.5 kb from human genomic DNA, 10 kb fromE. coligenomic DNA, and 22 kb from lambda DNA. The amplification efficiency of Advantage HD Polymerase Mix is greater than that of wild-typeTaq polymerase.
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我用来扩增一个1.1kb的基因,用TAKARA的EXtaq和其他的总是出现突变不知道这个酶能不能完全保真,另外末端是否加A
但是也有以RNA为模板的DNA聚合酶和RNA聚合酶 (也就是反转录酶和RNA依赖的RNA聚合酶),它们的结合位点在RNA上.
也就是说,模版是谁,结合位点就在谁上。
2.结合位点就是启动合成DNA或者RNA的碱基序列,如RNA聚合酶结合位点是转录起始位点,是一段特殊的位于编码基因上游的DNA序列.这段DNA序列可以结合RNA聚合酶,从而起始转录过程.经典的RNA聚合酶结合位点是TATA box.
TATA box是编码序列前的4个碱基.在大多数生物的基因前面都有TATA着4个碱基序列的存在,它就是一个RNA聚合酶结合位点.
解旋酶:在DNA复制、转录时,作用于DNA双链,将双链DNA解开形成单链。
RNA聚合酶:在转录过程中,作用于游离的核糖核苷酸,将它们连接形成mRNA链
DNA连接酶作用于基因工程,用于连接两个DNA片段间的磷酸二酯键。
可分为以下几个类群:(1)依赖DNA的DNA聚合酶;(2)依赖RNA的DNA聚合酶;(3)依赖DNA的RNA聚合酶;(4)依赖RNA的RNA聚合酶。前两者是DNA聚合酶,它使DNA复制链按模板顺序延长。如在原核生物中仅就大肠杆菌中已被发现的就有三种(分别简称为PolⅠ,PolⅡ和PolⅢ等);DNA聚合酶只能在有引物的基础上,即在DNA或RNA引物的3′-OH延伸,这DNA的合成方向记为5′→3′。换言之DNA聚合酶催化反应除底物(αNTP)外,还需要Mg2+ 、模板DNA和引物,迄今细胞内尚无发现可从单体起始DNA的合成。同样,上述(3)和(4)是催化RNA生物合成反应中最主要的RNA合成酶,它们以四种三磷酸核糖核苷(NTP)为底物,并需有DNA模板以及Mn2 及Mg2 的存在下,在前一个核苷酸3′-OH与下一个核苷酸的5′-P聚合形成3′,5′-磷酸二酯键,其新生链的方向也是5′→3′。RNA聚合酶也大量存在于原核和真核生物的细胞中。如大肠杆菌RNA聚合酶分子量4.8×105,由5条多肽链组成,分别命名为α,α,β,β′,和γ,全酶可用α2ββ′λ表示。真核生物RNA聚合酶分子大于5×105,由10~12个大小不等亚基组成。聚合酶除作为自然界生命活动中不可缺少的组分外,在实验室中大多用作生命科学研究的工具酶类之一。

