Description: TheflashBACsystemisanewplatformtechnologyforthe productionofrecombinantbaculoviruses. Mostimportantly, flashBAChasbeenspecificallydesignedtoremovetheneedto separaterecombinantvirusfromparentalvirusbyplaquepurificationoranyothermeans. Theproductionofrecombinant virushasbeenreducedtoaone-stepprocedureininsectcellsandisthus fullyamenabletohighthroughputand automatedproductionsystems.
TheflashBACtechnologyhasbeendevelopedbythesame teamthatproducedthetriple-cut,linearDNA(BacPAK6) systemthathasbeenthestalwartofthebaculovirusexpression systemforthepast10years. Attheheartof flashBAC technologyisanAcMNPVgenomethatlackspartofan essentialgene(ORF1629)andcontainsabacterialartificial chromosome(BAC)atthepolyhedringenelocus,replacingthepolyhedrincodingregion.Theessentialgene deletionpreventsvirusreplicationwithininsectcellsbutthe BACallowstheviralDNAtobemaintainedandpropagated,asacirculargenome,withinbacterialcells. CircularviralDNAis thenisolatedfromthebacterialcellsandpurified. Thisisthe flashBACDNAprovidedinthiskit.
Arecombinantbaculovirusisproducedbysimplytransfecting insectcellswithflashBACDNAandatransfervectorcontaining ‘thegeneunderinvestigation’. Homologousrecombination withintheinsectcells(1)restoresthefunctionoftheessential geneallowingthevirusDNAtoreplicateandproducevirus particlesand(2)simultaneouslyinserts‘thegeneunderinvestigation’underthecontrolofthepolyhedringenepromoter andremovestheBACsequence. Therecombinantvirus genome,withtherestoredessentialgene,replicatestoproduceBVthatcanbeharvestedfromtheculturemediumofthe transfectedinsectcells(andformsaseedstockofrecombinant virus). AsitisnotpossIBL efornon-recombinantvirusto replicatethereisnoneedforanyselectionsystem.
Thisone-stepproceduregreatlyfacilitatesthehighthroughputproductionofbaculovirusexpressionvectorsviaautomated systems. However,itisalso ofbenefittothesmallresearch groupjustrequiringoneorafewrecombinantbaculoviruses preparedinindividualdishesofcells.
TheflashBACsystemisbackcompatiblewithallbaculovirustransfervectorsbasedonhomologousrecombinationininsect cellsatthepolyhedringenelocus. Thisincludesvectorsusing thepolyhedrinpromoter,dual,tripleandquadrupleexpression vectorsandthosethatuseothergenepromoterssuchasp10,ie1etc.ExamplesincludepBacPAK8/9,pAcUW31and pBacPAK-His1/2/3(BD BiosciencesClontech)butnotvectors suchaspFastBac™,which aredesignedforsite-specific transpositionin E.coliusingtheBac-to-Bac® system(Gibco BRL).
TheflashBACsystemalso maximisesproteinsecretionand membraneprotein targeting.Baculovirusgenomescontain severalauxillarygenes,whicharenon-essentialforreplication ininsectcellculture. Oneoftheseischitinase(chiA),whichencodesanenzymewithexo-andendochitinaseactivity. In aninfectedinsect,chitinase(togetherwithcathepsin)facilitates hostcuticlebreakdownandtissueliquefactionattheverylate stagesofinfection,soreleasingthevirustoinfectmorehosts. Confocalandelectronmicroscopyobservationsofinsectcells infectedwithAcMNPVhaveshownthatchitinaseistargetedto theendoplasmicreticulum(ER)whereitisdenselypackedina para-crystallinearray,severelycompromisingthefunctionand efficacyofthesecretorypathway. DeletionofchiAfrom flashBAChasimprovedtheefficacyofthesecretorypathwayandresultedinagreatlyenhanced(upto60-foldinsome instances)yieldofrecombinantproteinsthataresecretedormembranetargeted(incomparisonwithrecombinantviruses thatsynthesisechitinase).
AdvantagesoftheflashBACsystem : • Simpletouse • Onestepproductionofrecombinantvirusininsectcells • Nostepsneededtopurifyrecombinantvirus • Amenabletohighthroughputandautomatedsystems • Maximisesproductionofsecretedandmembrane-targeted proteins• Back-compatiblewithahugerangeoftransfervectors
AdditionalInformation: Name FlashBAC-BaculovirusExpressionSystem(96reactions) RelatedProductNames FlashBAC-BaculovirusExpressionSystem(96reactions) StABI lity Guaranteed6months Storage flashBACDNA:Storeat4°C.ControltransfervectorDNA(containinglacZreportergene):Storeat-20°C. IntendedUse ResearchUseOnly
蚂蚁淘电商平台ebiomall.com
公司简介
蚂蚁淘(www.ebiomall.cn)是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台,
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
淘搜索全球供应信息,找到合适的产品后在蚂蚁淘下单,然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、
运输到中国口岸,最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
正品保证: 全球直采 在线追溯
蚂蚁淘所有产品都是自运营的,我们已经跟国外多家厂方建立品牌推广合作关系, 获得对方的支持和授权; 同时客户可以通过订单详情查看到货物从厂方至客户的所有流程, 确保货物的来源; 正规报关,提供13%增值税发票。
及时交付: 限时必达 畅选无忧
蚂蚁淘的运营团队都是有着多年经验的成员,他们熟悉海外采购、仓储物流、报关等环节; 同时通过在线的流程监控,蚂蚁淘的进口速度比传统企业提高了50%以上, 部分产品甚至能做到7-10天到货,即蚂蚁淘的“时必达”服务。
轻松采购: 在线下单 简单省事
蚂蚁淘的价格是真实透明的,并且具有很大的价格优势,不需要繁杂的询价比价; 报价单与合同可以直接在线生成或打印;就像在京东购物一样, 您的鼠标点击几 次即完成在蚂蚁淘的采购,订单详情会告诉您所有进程。
售后申请: 耐心讲解 优质服务
蚂蚁淘提供的产品在使用过程中如因产品质量问题有售后需求时, 您可通过我的订单提交您的“申请售后”, 蚂蚁淘产品顾问会第一时间为您处理, 在售后服务过程中如遇到问题也可致电蚂蚁淘客服热线:4000-520-616。
锐赛生物特别活动周系列之 (一) 293系列专用转染试剂 POLO3000 来源:上海锐赛生物技术有限公司2012-8-27 访问量:2911评论(0)标签: 锐赛生物/R&S 锐赛生物/R&S 锐赛生物特别活动周系列之 (一) — 293系列专用转染试剂 POLO3000 POLOdeliverer™ 3000系公司自主知识产权、独特配方的阳离子型转染试剂,具有转染效率高...
查看更多>
Polyplus转染试剂引用文献库, Polyplus转染试剂引用文献库 http://www.polyplus-transfection.com/technical-resources/product-citations/ ...
查看更多>
恩晶生物siRNA/shRNA/RNAi研究工具产品 一、siRNA/shRNA/RNAi系列套装产品 siRNA/shRNA/RNAi系列套装产品覆盖所有人、小鼠和大鼠的基因,保证基因沉默。 现举行购买siRNA/shRNA/RNAi系列套装产品送价值为900元的0.3ml高效配套转染试剂。二、恩晶生物的转染试剂 EnoGeneFec™转染试剂以最高的转染效率、使用方便、细胞毒性小、生物可降解为...
查看更多>
高效、低毒性siRNA转染试剂,成功转染的细胞包括:BxPC3, H1299, MDA-MB453, PC-3, A7R5, NRK-49F, RAT2, COS7, A549, DU145, HEK293, HeLa, HeLa S3, HepG2, HT-1080, HT-29, MCF7, MCF10a, hMSC, SKBR3, 786-O, C2C12, CHO K1, ES-D3, ES-E14TG2a, H9C2, H2122, HBEC34, HCC193, HCC366, HCT116,
查看更多>
EZ-TransTM哺乳动物细胞转染试剂盒是由仁源生物技术(上海)有限公司代理或销售的仁源生物技术(上海)有限公司品牌的试剂,产品来源于上海。仁源生物技术(上海)有限公司是中国最权威的EZ-TransTM哺乳动物细胞转染试剂盒试剂销售服务商之一,在上海等地方销售EZ-TransTM哺乳动物细胞转染试剂盒试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业EZ-TransTM哺乳动物细胞转染试剂盒仪器产品及图片,以便挑选到性价比高,合适的EZ-TransTM哺乳动物细胞转染试剂盒产品
查看更多>
Polyplus-transfection 转染试剂 10周年真情大奉送,促销时间:2011.07.01-2011.10.30
查看更多>
转染试剂的选择及转染技术 转染技术是指将外源分子如DNA、RNA等导入真核细胞的技术,它是研究基因表达调控,突变分析等的常规工具。随着功能研究的兴起,其应用越来越广泛。以下就向大家介绍一些转染的技术要点及市面上主要的转染试剂类型的选择。 常规转染技术可分为两大类,一类是瞬时转染,一类是稳定转染(永久转染)。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中,因此一个宿主细胞中可存在多个拷 贝数,产生高水平的表达,但...
查看更多>
查看更多引用文献Recent Product & Service Citations1. Xiao W, Fan Y, Wang N, Chuang PY, Lee K, He JC. Knockdown of RTN1A attenuates ER stress and kidney injury in albumin overload-induced nephropathy. Am J Physiol Renal Phy...
查看更多>
济南思科生物科技有限公司在发布的SignaGen转染试剂 for PC-12 Cell供应信息,浏览与SignaGen转染试剂 for PC-12 Cell相关的产品或在搜索更多与SignaGen转染试剂 for PC-12 Cell相关的内容。
查看更多>
/* Style Definitions */ table.MsoNormalTable {mso-style-name:普通表格; mso-tstyle-rowband-size:0; mso-tstyle-colband-size:0; mso-style-noshow:yes; mso-style-priority:99; mso-style-qformat:yes; mso-style-parent:""; mso-paddi...
查看更多>
罗氏X-tremeGENE 9和X-tremeGENE HP的转染试剂、 罗氏公司新推出了两款高性能的DNA转染试剂,为其细胞分析产品线再添新军。这两款名为X-tremeGENE 9和X-tremeGENE HP的转染试剂沿用了X-tremeGENE siRNA转染试剂的前缀,应该与大名鼎鼎的Fugene 6不属于一类。据罗氏介绍,这两个产品是多组分的独特试剂,并非脂质体。它们能够提供高的转染效率、重复性和细胞存活率。这两款新产品都...
查看更多>
常见问题
蚂蚁淘所售产品均为正品吗?
蚂蚁淘的创始人兼CEO是钟定松先生,具有十年的从业经验,在业界享有良好的口碑;
Ebiomall是跨境直采平台,我们直接从厂家采购,自己的团队负责国际物流和清关,中间没有第三方,蚂蚁淘承诺所售产品仅为正品,假一罚十。
下单后可以修改订单吗?
未确认状态的订单可以修改,打开“订单详情”页面,点击右上角的“修改订单”即可,若已审核确定,则订单无法修改。
商品几天可以发货?
现货产品付款审核后即可发货,大部分期货产品在3周左右即可到货,提供时必达服务的产品订单审核十天内即可发货。
订单如何取消?
如订单处于未确定状态,进入“我的订单"页面,找到要取消的订单,点击“取消订单”按钮。
可以开发票吗?
本网站所售商品都是正规清关,均开具13%正规发票,发票金额含配送费金额,另有说明的除外。
如何联系商家?
蚂蚁淘任何页面都有在线咨询功能,点击“联系客服”、“咨询”或“在线咨询”按钮,均可咨询蚂蚁淘在线客服人员,
或拨打4000-520-616,除此之外客户可在
联系我们 页面找到更多的联系方式。
收到的商品少了/发错了怎么办?
同个订单购买多个商品可能会分为一个以上包裹发出,可能不会同时送达,建议查看订单详情是否是部分发货状态;如未收到,可联系在线客服或者致电4000-520-616。
退换货/维修需要多长时间?
一般情况下,退货处理周期为客户收到产品一个月内(以快递公司显示签收时间为准),包装规格、数量、品种不符,外观毁损、短缺或缺陷,请在收到货24小时内申请退换货;特殊商品以合同条款为准。
商品咨询
Signagen 转染 试剂(transfectionreagent)
—DNA转染试剂Polyjet-适用于普遍的哺乳动物细胞
LipoD293-适用于悬浮细胞的转染(包括昆虫细胞SF9)-对于普遍的哺乳动物细胞具有更优异的转染效率
—DNAandsiRNA转染试剂
Lipojet-适用于大多数哺乳动物细胞的转染-低毒性(无需换液)-用量少-DNA/RNA共转染(co-transfection)-效果优于Lipofectamine2000
—siRNA转染试剂
GenMute-适用于大多数哺乳动物
细胞转染 -低毒性(无需换液)-用量少-DNA/siRNA共转染(co-transfection)PepMute-适用于普遍的哺乳动物细胞的转染
不同的转染试剂有不同要求, 生物通小编个人经验是转染试剂细胞毒性高 的要求长满一些,细胞多一些,就算死伤惨重 也还能留下多些活口,嘿嘿,对于质粒转染来 说这并非评判转染试剂好坏的标准,毕竟只要 转进去就算OK 了,但是对于RNAi 实验来说 就不同了),将siRNA 和转染试剂混合物加 入共同温育一段时间,更换培养基,再培养 24-48 小时检测mRNA 含量等等。 创新的方法是反向转染。这种方法称为 everse tr ansfection 或者neofection,和传统 转染方法相比区别在于,传统方法需要提前一 天接种铺板,培养24 小时后等细胞到一定汇 合度再加转染复合物转染;而反向转染则是不 用预先接种细胞,先加入转染试剂和siRNA 混合物在培养板上共同温育,然后再加入细胞 铺板,培养。这个方法的好处不单是可以节约 一整天的时间,而且转染效率高。
786-o cell用什么转染试剂 内毒素是革兰氏阴性菌细胞壁(cellwall)上的特有成分,主要是脂多糖中的类脂A,在细菌被裂解时被释放出来,由于其化学结构和特性,在质粒的纯化过程中很容易混入质粒DNA一同提取出来。内毒素的存在会严重的影响质粒转染细胞的效率,此外会激活造血细胞(如B细胞、巨噬细胞等)的非特异免疫反应,造成实验的假阳性,所以转染级质粒的提取纯化必须去除内毒素。
请问您具体需要购买什么产品呢?麻烦详细描述一下,方便小v准确为您解答。
我们都是直接用脂质体的 lf2000 。操作和质粒的一样。 可能我没理解你的问题 回答不太清楚 不好意思
脂质体的转染毒性是最大的,很明显,那么多的细胞死亡是由于转染的细胞毒性导致的。对于这一点我有两个建议,一个是减少DNA的用量,我一般做转染,对于任何细胞,只要是12孔板,一般都是用1ugDNA,这个量绝对够了。,因为质粒转染进入细胞的本质,和病毒感染没区别,质粒的各种元件会从宿主细胞内抢夺细胞机器大量开始转录翻译你的目的蛋白,在这个过程中会产生大量的没有正确折叠蛋白,这些异常折叠蛋白进一步引起ER stress导致细胞凋亡。因此你用DNA太多,本身就有细胞毒性。另外就是脂质体本身的毒性。事实上,对于293系的细胞系,最好用的是PEI这种东西。毒性小,转染效率高,一般对293系列的细胞系可以轻易达到80%。polyscience有粉末买,买回来后直接在分子纯度的水里配置成1ug/uL的溶液,和你的质粒按照1ug DNA/6ug PEI对293进行转染。 而且直接使用自制的PEI非常便宜,在293上远比商品化的脂质体要好。 另外,如果你们实验室确实钱多,不怕花钱,建议你取用Promega的FugenHD,那个转染效率比脂质体更好,而且毒性小,至于价格。。。。。。。。。。。也更高。。。。。。。。。 另外,你说漂浮的细胞有表到GFP,那个不一定是真的GFP,很多时候
试剂方面,大致下面三个组分。DNA转染试剂制备复合物需要的基础培养基或者150mM氯化钠溶液。
悬浮细胞NB4用哪种转染试剂比较好 DXY721认为: 悬浮细胞和贴壁细胞在转染过程中差别不大,主要差别在于转染后的筛选,当然如果你做的是瞬时转染就不存在筛选的问题了。 其实转染的过程很简单,问题是能不能转的进去的,转染率能有多少,转进去是否可以稳定表达目的蛋白等等。 我们也是用脂质体做悬浮细胞的转染,说明书上都有具体的操作过程,将脂质体和目的基因按比例混合,然后加到细胞悬液里就OK了,说的简单,实际上还是有一些细节要注意的,比如脂质体和目的基因混合的比例,转染的细胞数,细胞的代数,细胞的状态,有的还要求在转染的前一天传代一次,不过不要怕,这些在脂质体说明书上都有明确的说明,按照说明书做就可以了。 jinghuanlv认为: 悬浮细胞和贴壁细胞转染还是有很大不同的。 脂质体转染的原理基于电荷吸引原理,先形成脂质体-DNA复合物,散布在细胞周围,然后通过细胞的内吞作用,将目的基因导入细胞内,而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞高出很多倍,所以,脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。 我们实验室转染悬浮细胞是用的电穿孔法,目前为止,悬浮细胞转染的最好方法还是电转,我们实验室用的电转仪是Bio-Rad的,使用条件是电压250V,电容975uF,效果不错,不妨一用。
如果提质粒的试剂盒没有去内毒素功能提出的质粒一般就有内毒素
想用RNAiMAX或者lipo2000转染 siRNA,但是看了下转染试剂 的说明书和锐博的siRNA说明书,觉得分别对siRNA的用量描述差别挺大的呀,不知道到底该参考哪个呢。
以24孔板为例在siRNA说明书中写到,siRNA终浓度是50nM的话,加入浓度为20μM的siRNA1.25ul,每孔体积是500ul,那这样的话,每孔最终siRNA的量是25pmol。
但是在RNAiMAX或者是lipo2000说明书中,一个写的每孔siRNA用量是5pmol,一个是500ng,这与siRNA厂家所提供的量相差也太多了吧。
到底该看哪一个呢。
ps.一旦siRNA的量和体积确定下来之后,转染试剂的量和siRNA1:1的加就可以了吗?
请各位大神解答。
1.siRNA说明书中的用量,红线圈出
2.RNAIMAX说明书中siRNA的用量。
3.lipo2000说明书中siRNA用量
各位战友,我准备做MiRNA转染 前列腺癌细胞,现在知道的转染试剂 Lip2000,一种是英骏生物公司的,另外一种是赛默飞 (Thermo Fisher),我不知道该选择哪一种转染效果好一点,有了解这方面的朋友请知道一下我,谢谢!