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提供商: | 北京众智领先科技有限公司 |
服务名称: | 实时定量PCR服务 |
Real-TimePCR常用的两种方法为:SYBRGREEN(荧光染料掺入法)和Taqmanprobe(探针法)。
SYBRgreen法:
在PCR反应体系中,加入SYBR荧光染料,SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信号,而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。
TaqmanProbe法:
PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一段寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。
扩增曲线图
熔解曲线图
1. 根据基因序列设计特异性的引物和荧光探针;
2. 提取样品的RNA/DNA,并反转录成cDNA
3. Real-TimePCR,进行实验结果分析;
4. 提供完整的实验报告。
您需要提供的信息
1. 新鲜且足量的样本材料,或直接提供纯化好的总RNA或DNA(大于5ug/样品)。
2. 提供已知的全长基因序列,GeneID,详细背景资料,DNA/RNA来源、丰度等。
服务周期
小于15个样本(包括RNA提取,反转录,引物验证,检测完成),15个工作日。
大于15个样本,根据具体情况而定。
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发布于 : 2018-09-13
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