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发布人旧人旧城丶捈h 发布时间 2021-08-19

ROX Reference Dye,可用于需要Dye的Real Time PCR扩增仪,用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR扩增仪上,用以校正孔与孔之间产生的荧光信号误差.并不是每次都会用到.一般有ROX Reference Dye和ROX Reference Dye II两种,针对不同的PCR仪.一般ABI PRISM 7000/7700/7900HT和7300 Real-Time PCR System使用ROX Reference Dye,而7500 Real-...

qPCR过程中有关RNA的问题

发布人 cneagle66 发布时间 2021-08-18

请教园友：一般做mRNA表达的时候，需要注意提取的RNA中是否有DNA污染，或者通过设计跨内含子的引物来解决。那么，检测MmiRNA的时候，需要注意RNA中DNA污染的问题么？

荧光定量 PCR,扩增曲线或溶解曲线异常怎么办?_实验方法_

发布人月亮欠我九条鱼发布时间 2021-08-17

跑到还有半小时的时候，跳出一个对话框：“analysiscannotproceed:notenoughsamplesdefined”，最后做出来的结果有扩增曲线但是没有熔解曲线，请各位大神帮忙解释一下。

荧光定量PCR中,起始拷贝数是什么?怎么来的?

发布人天空飘飞的云发布时间 2021-08-16

这个指的就是样本中原有目标DNA的数量。在另外的一组管子中，加入已知拷贝数的DNA同时扩增，每个管子中加入的数量是不同的，但是从最小数目到最大数目的这个范围涵盖了样本中DNA拷贝数。PCR反应完成后，把已知拷贝数DNA的量和PCR荧光Ct值制成标准曲线，再把待测样本的CT值和该标准曲线比对，就可以得到样本中的起始拷贝数了

定量pcrCT请问做荧光定量PCR时,CT值的结果在30左右,而不是2025...

发布人 Mis願发布时间 2021-08-15

realtimeRT-PCR，测了模板CDNA浓度1800ng/ml，纯度在1.96左右，但是检测内参GAPDH，CT值都有30多，目的基因的CT更大了。请问问题在哪里，CT值大不就是因为模板量不够吗，可是现在这个浓度显然是充足的，怎么解释？

请教大神!荧光定量PCR cDNA加样量的问题核酸基因技术讨论版...

发布人 nanakaro 发布时间 2021-08-14

各位战友我实验室用的是Therimosci公司的SYBR试剂盒，说明书上要求DNA的量<500ng但是测得CDNA浓度都在1000-2000多ng/ul我第一次没注意500ng的问题就直接加了2ulcDNA结果CT值非常高如果按500ng算，加的就不到1ul的量了，这样CT不是更高了嘛这样加对吗？？

实时荧光定量pcr分析中cy5,fam,red是什么意思

发布人櫴7潩鳧4蝕发布时间 2021-08-13

普通的PCR大多数是定性实验，而实时荧光定量PCR则定量和定性都可以做。应用领域也不一样，普通PCR一般应用于基因组克隆、DNA测序、RNA反转录等，而实时荧光定量PCR一般应用于mRNA表达量分析、绝对定量、蛋白表达、SNP分析、阴阳性解析等领域。不是定量PCR比PCR好，而是两者应用与不同的领域，起到了不同的作用。荧光定量PCR较普通PCR不同的一点就是可以实时检测PCR扩增产物，从而可进行绝对定量或者相对定量。

用普通的TAQ酶可以扩增出基因条带,用高保真酶扩增不出来了该怎么...

发布人胜仔发布时间 2021-08-12

本人之前尝试过用普通的Taq酶扩增2kb的条带，但是老是扩不出来。:(我想问一下各位老师有没有试过用普通的Taq酶扩长片断呢？另外还有个问题就是要是我用PrimeSTARTMHSDNApolymerase可以扩出长片断吗？谢谢。

等温扩增是PCR的补充还是代替??来看看他们的优劣势!

发布人固始县80tcTG 发布时间 2021-08-11

乙肝荧光定量pcr检测要多少钱_即问即答_家庭医生在线即问即答

发布人 13632844080 发布时间 2021-08-10

定量检测包括总RNA提取和纯化、（可能还需要做mRNA提取和纯化）、RT、定量PCR还需要反转录用的引物、定量PCR用的一对引物、荧光信号源（荧光染料或荧光标记的探针，看你用什么策略来做定量PCR）报价要看你需要服务商提供什么服务，如果你只提供实验材料，要求服务商做以上全部工作，只检测一个指标（一个基因的表达水平变化），价格大约每个样品350-500元，多一个指标大约多90元。一般至少做一组数据两个样品嘛，所以你按1000块一组样品预算吧。

【求助】荧光实时定量PCR要购买哪些试剂和材料 PCR技术讨论版 ...

发布人子乔00KJ11 发布时间 2021-08-09

如果你想做荧光定量PCR的根据实验思路来说应该需要一下试剂和仪器1.模板提取（一般为RNA）：Trizol、氯仿、异丙醇、无水乙醇、DEPC处理水2.模板浓度测定：分光光度计或NanoDrop3.逆转录：逆转录试剂盒（或者一步法试剂盒），这一步可以用普通PCR做，也可以用水域做。4.荧光定量PCR试剂：通常有用SYBR Green Mix做的，但是这里建议你用EvaGreen做，灵敏度和平行性都要好于SYBR Green，并且如果你那是ABI或者Stratagene的PCR如果用SYBR Gre...

定量pcr跑出了奇怪的结果,求大神指点 PCR技术讨论版论坛

发布人 gezhigezhi 发布时间 2021-08-08

结果如图。A到E都是一个样本，A123是gapdh，后面共有18种引物。f到h是另一个样本，前三个是gapdh，后面是11种引物。结果是这样的没有起跳。。样本和引物之前做都没有问题。。做这次pcr，我只是在加样完毕到上机器之间有一个多小时在外面，前几十分钟在--20度冰箱。后20分钟在冷库解冻。放冷库的时候，用橡胶手套盖住遮光。不知道是不是这里出了问题。希望能有大神指点。另外还有几个问题。就是跑出来的结果RFU居然有负值，这是怎么回事呢？几乎在0附近，但是在溶解曲线求导前的那个曲线。RFU又是从...

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克隆和表达

克隆试剂盒克隆基因基因突变双杂交系统转录表达

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核酸酶类

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