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Enzymatics/T7 DNA Polymerase/3,500 U/P7260L
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Enzymatics/T7 DNA Polymerase/3,500 U/P7260L
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酶科技公司
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P7260L
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T7 DNA Polymerase is the mesophilic, highly processive, replicative DNA polymerase from bacteriophage T7 that is responsible for the rapid and accurate replication of the virus’ genome during its infection cycle. T7 DNA Polymerase is a two subunit protein, consisting of a polymerase domain (gene 5 from the T7 bacteriophage) and a processivity factor (E. coli trxA gene thioredoxin) (1,2). The enzyme possesses a powerful (3’→5′) nuclease activity that acts on both single and double stranded DNA and appears to be responsible for the high fidelity of this enzyme and prevents strand displacement synthesis (3,4,5).

Source of ProteinA recombinant E. coli strain carrying the bacteriophage T7 gene 5.

Supplied in50 mM KPO40.1 mM EDTA1.0 mM DTT50% glycerolpH 7.0 @ 25°C

Supplied WithB7260 (10X T7 DNA Polymerase Buffer)10X T7 DNA Polymerase Buffer (B7260)400 mM Tris-HCl200 mM MgCl2500 mM NaClpH 7.5 @ 25°C

Unit Definition1 unit is defined as the amount of polymerase required to convert 10 nmol of total dNTPs into acid insoluble material in 30 minutes at 37°C.

Enzymatics专注于于酶产品的研发,为市场带来了特殊的、高品质的产品。是一家试剂、试剂盒和测定的领先生产商,使全球客户变革了诊断、治疗和生命科学的研究。业务包括:试剂、供应链解决方案,应用科学,其测序产品市场占有率达80%。


酶科技公司产品包括八类:超纯连接酶如T4连接酶、超纯poly酶、ArcherTM系列测序工具(ArcherProducts)、连接蛋白、DNA修饰酶、NGS文库制备(NGSLibraryConstruction)、核酸和RNA酶。


Enzymatics是分子生物学试剂和制造服务的L先供应商,提供了无与伦比的质量,*性和价值的商业基因组科学界。该公司在美国制造商在ISO13485认证,专注于建立长期合作伙伴关系,并利用内部和外部创新的突破性技术商业化。


Enzymatics专注于于酶产品的研发,为市场带来了特殊的、高品质的产品。是一家试剂、试剂盒和测定的领先生产商,使全球客户变革了诊断、治疗和生命科学的研究。业务包括:试剂、供应链解决方案,应用科学。目前市场上80%测序产品来自Enzymatics(“Todayourproductsunderpinover80%ofthesequencingreactionsthatarerunaroundtheglobe”)。Enzymatics产品的好处之一--能提高效率:NatureMethods中提到“使用Enzymatics超纯连接酶,连接步骤的效率得以提高,连接片段的产量增加了20-30%”。好处之二--有效降低测序成本:遗传学界的泰斗GeorgeChurch更是认为Enzymatics是"apowerfulcatalystinthedemocratizationofsequencing"。合作伙伴包括:BGI,BerryGenomics,Illumina,454LifeSciences和IonTorrentSyst,皆对Enzymatics的出品赞不绝口。


Enzymatics--核酸25mM100µmoldNTPSolutionMix--N2050L,N2050F

核酸25mM100µmoldNTPSolutionMix

摘要:四种天然脱氧核苷酸的等摩尔混合溶液(25mM)

产品描述

Anequimolar(25mM)mixtureofthefournaturaldeoxynucleotides.

四种天然脱氧核苷酸的等摩尔混合溶液(25mM)

SuppliedAs:25mMeachdNTP(dATP,dCTP,dGTP,dTTP)atpH7.5

产品信息

PartNumberN2050L,N2050F

Concentration25mM

UnitSize100µmol,20µmol

产品特性

StorageTemperature-25to-15°C

Purity≥99%

BasePurity≥99.5%

Pyrophosphate≤0.003pmol/pmolofnucleotide

EnzScript™(MMLV逆转录酶,RNaseH-)

摘要:基于RNA的DNA聚合酶,无核酸内切酶活性

产品描述:

EnzScript™(M-MLV逆转录酶RNaseHminus)属于RNA依赖的DNA聚合酶,该酶无RNaseH活性。EnzScript™被用于从polyAmRNA或总RNA中产生首链CDNA以用于下游的一些用途,如RT-PCR,cDNA克隆或RNA-Seq的文库构建。RNaseH结构域中的点突变能增加酶的热稳定性,相比于野生型M-MLV逆转录酶,它支持全长转录物种产生更高的cDNA产量

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2013年6月21日在上海举行的“第二代基因工程酶与二代测序技术专题研讨会”圆满的落下了帷幕。此次活动是由美国KAPABiosystems公司,上海希匹吉生物技术有限公司与生物360携手举办的一次全球最新DNA聚合酶开发技术与二代测序技术讲座,同时也是美国KAPABiosystems公司第1次在中国上海举办技术研讨会。本次活动为期半天,在学术气氛浓厚的中科院上海生命科学信息中心隆重召开。来自KAPABiosyst... 查看更多>
NextSeq二代测序系统是由北京安麦格贸易有限公司代理或销售的Illumina品牌的仪器,产品来源于美国。北京安麦格贸易有限公司是中国最权威的NextSeq二代测序系统销售服务商之一,在北京等地方销售NextSeq二代测序系统已经多年。同时,生物在线为您提供众多企业NextSeq二代测序系统仪器产品及图片,以便挑选到性价比高,合适的NextSeq二代测序系统产品 查看更多>
二代测序(Next Generation Sequencing,NGS)技术如今大行其道,各科研单位和检测服务公司都相继引入二代测序系统。然而,二代测序过程烦琐精密,其中对样本核酸量的准确定量是成败关键之一。现今在 NGS 过领域中,荧光核酸定量检测为业界比较认可和普及的方法。在法方上,常见的是 Life Technologies 公司的 Qubit 仪器配上其荧光探针。可是此方案每次检测单个样本,未必可轻松应付高通量样本。再者,对于珍... 查看更多>
上海若谷生物科技有限公司在发布的二代测序数据生物信息学分析供应信息,浏览与二代测序数据生物信息学分析相关的产品或在搜索更多与二代测序数据生物信息学分析相关的内容。 查看更多>
       SNP是遗传学研究是不可缺少的一部分,目前成熟的SNP分型方法有很多,各有各的特点和适用性,其中直接测序法是堪称为“金标准”的一种手段。但其由于受到分型通量及分型成本的限制,无法在大规模的分型项目中得到推广,因此随之产生了基于二代测序发并结合多重PCR技术的高通量SNP分型法。       随着二代测序技术的普及,相比Sanger测序,二代测序降低了测序读长,但是大大增加的测序通量同时大幅降低测序成本。利用二代测序进行... 查看更多>
高通量台式二代测序仪是由北京安麦格贸易有限公司代理或销售的Illumina品牌的仪器,产品来源于美国。北京安麦格贸易有限公司是中国最权威的高通量台式二代测序仪销售服务商之一,在北京等地方销售高通量台式二代测序仪已经多年。同时,生物在线为您提供众多企业高通量台式二代测序仪仪器产品及图片,以便挑选到性价比高,合适的高通量台式二代测序仪产品 查看更多>
2016年12月19日,美国食品和药物管理局(FDA)批准了Foundation Medicine公司的FoundationFocus CDxBRCA产品,成为市场上第一个基于二代测序的伴随诊断试剂盒。该产品被批准用于鉴定携带BRCA突变的晚期卵巢癌患者,这些患者更易对Clovis Oncology公司生产的PARP抑制剂Rubraca(rucaparib)有反应。与此同时,FDA加速批准了Rubraca这一新药,该药物适用于已经用两种... 查看更多>
IlluminaNextSeq桌上型二代测序仪是由北京安麦格贸易有限公司代理或销售的Illumina品牌的仪器,产品来源于美国。北京安麦格贸易有限公司是中国最权威的IlluminaNextSeq桌上型二代测序仪销售服务商之一,在北京等地方销售IlluminaNextSeq桌上型二代测序仪已经多年。同时,生物在线为您提供众多企业IlluminaNextSeq桌上型二代测序仪仪器产品及图片,以便挑选到性价比高,合适的IlluminaNextSeq桌上型二代测序仪产品 查看更多>
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2019年7月24日-FormuMaxGelcompanyGeneMarkbioGenWayGloboZymesHeliosHMGBiotechHybrigenicsHycult BiotechIBA Life SciencesImmundiagnostikImmun... 查看更多>
目前"精准医疗"成为覆盖全球的热门话题,二代测序、液态活检等新技术在精准医学中扮演着越来越重要的角色,尤其在肿瘤的靶向治疗领域倍受瞩目,各类二代测序服务公司如雨后春笋般不断涌现。然而,二代测序的实验复杂、流程冗长,任何一个环节出问题都可能造成最终检测结果的错误,进而误导临床决策。因此,二代测序市场亟需规范和管理。本期网络研讨会将带您了解基因诊断市场风向,为提高您的检测灵敏度、稳定性和重复性出谋划策。拥有基因检测的金标准,才能得到"精准... 查看更多>
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SNP数据构建系统进化树123
爆儿███2b揯2017-10-02
1.TaqMan探针法 针对染色体上的不同SNP位点分别设计PCR引物和TaqMan探针,进行实时荧光PCR扩增。探针的5’-端和3’-端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。当溶液中存在PCR产物时,该探针与模板退火,即产生了适合于核酸外切酶活性的底物,从而将探针5’-端连接的荧光分子从探针上切割下来,破坏两荧光分子间的PRET,发出荧光。通常用于少量SNP位点分析。
2.SNaPshot法 该技术由美国应用生物公司(ABI)开发,是基于荧光标记单碱基延伸原理的分型技术,也称小测序,主要针对中等通量的SNP分型项目。在一个含有测序酶、四种荧光标记ddNTP、紧临多态位点5’-端的不同长度延伸引物和PCR产物模板的反应体系中,引物延伸一个碱基即终止,经ABI测序仪检测后,根据峰的移动位置确定该延伸产物对应的SNP位点,根据峰的颜色可得知掺入的碱基种类,从而确定该样本的基因型。对于PCR产物模板可通过多重PCR反应体系来获得。通常用于10-30个SNP位点分析。
构建重组质粒,在pSET4S质粒上插入一段基因的上下游同源臂,双酶切验证正确,同时以重组质粒为模板PCR扩增插入的片段,均与阳性对照一致,但测序结果进行NCBI比对,发现插入的一段序列不正确。而且这个重组质粒曾经构建出来过,因其中一个碱基突变所以重新构建,使用了primestar重新构建却总是测序不正确或者酶切不正确

1、目的基因与质粒载体(pET21b)双酶切连接,转DH5a感受态细胞,挑取单菌落,菌落PCR可以P出目的条带(引物是pET21b载体上设计的),扩大培养,提取质粒,但是双酶切只有一条带,测序显示目的基因已连在载体上,双酶切了很多次,都切不出来目的条带,也不是酶切体系(20-100ul都尝试过)和酶切时间(3-4h,过夜都试过)的问题。

求高手指点,到底哪里出问题了!!!

1.TaqMan探针法 针对染色体上的不同SNP位点分别设计PCR引物和TaqMan探针,进行实时荧光PCR扩增。探针的5’-端和3’-端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。当溶液中存在PCR产物时,该探针与模板退火,即产生了适合于核酸外切酶活性的底物,从而将探针5’-端连接的荧光分子从探针上切割下来,破坏两荧光分子间的PRET,发出荧光。通常用于少量SNP位点分析。
2.SNaPshot法 该技术由美国应用生物公司(ABI)开发,是基于荧光标记单碱基延伸原理的分型技术,也称小测序,主要针对中等通量的SNP分型项目。在一个含有测序酶、四种荧光标记ddNTP、紧临多态位点5’-端的不同长度延伸引物和PCR产物模板的反应体系中,引物延伸一个碱基即终止,经ABI测序仪检测后,根据峰的移动位置确定该延伸产物对应的SNP位点,根据峰的颜色可得知掺入的碱基种类,从而确定该样本的基因型。对于PCR产物模板可通过多重PCR反应体系来获得。通常用于10-30个SNP位点分析。
片段长度143bp,酶切位点kpn1和Hind3,连入pGL3b载体,测序引物公司用的pGL3-,第一次反向测序不成功,原因是质粒出现重叠峰,正向加测后成功,对比发现下游引物的酶切位点(Hind3)少了一个碱基(aagtcc变成aagct),重组质粒酶切切不出插入片段;之后将测序成功的质粒重新转化DH5α,再提质粒酶切还是切不出来。质粒小提试剂盒Qiagen的,提取菌液1.5mL,浓度608.2ng/uL,酶切质粒2ug。
【之前构建的4个重组质粒里也有两个出现这样的问题(aagtcc变成agtcc),但是酶切能切出插入的片段】
目前问测序公司得到的答复是样品可能不是单克隆,测序结果是不准确的,建议重新挑取单克隆测序。
不知道还有没有别的方法?
PCR程延伸阶段温度升72摄氏度左右高温度所溶液四种脱氧核苷酸需要耐高温Taq DNA聚合酶作用据碱基互补配原则合新DNA链
我在做基因敲除实验(CRISPR/Cas9),实验室一直都是直接送测序验证的,又看到资料说,有用T7E1酶的,也有用SURVEYOR的。
不是很相信网上的商家,遂求助各位路过的大虾们,有用过的吗?这些酶特异性怎样啊?贵不贵,跟我直接测序相比,有优势吗?

利用NheI和HindIII双酶切插入目的片段,为什么双酶切有目的片段和切开的质粒,测序却没有?

并且测序后在NheI位点后的序列变成了-GGCTAGGTAC-Kpn位点(CGTTTAAACTTAAGCTTG消失。之前和之后的序列都相符),之间的怎么都没了?

两个基因大小分别230kb和450kb,酶切后,450kb的有目的条带,但很弱,230kb的质粒条带亮,其下方有一很微弱条带,用的酶分别是:Ncol和Spel体系是(Takara,两个酶切体系不同,用的官网推荐体系):

NcoI1μl

Spel1μl

10×KBuffer2μl
0.1%BSA2μl
DNA3ul
灭菌水upto20μl37℃4h电泳1h

最近在构建质粒,遇到奇怪的问题,向大牛们求助!!通过CDNA文库扩增目的基因片段后连接至载体上,转化后挑取克隆进行菌落PCR鉴定,选择阳性菌落扩增后提取质粒,再将质粒酶切鉴定,选择酶切结果正确的质粒送测序,通用引物测序结果显示上游测序结果为载体序列,无目的基因序列,下游引物无信号?!崩溃了,为嘛!我同一批做的其他几个质粒都没有问题,这个质粒构了两次了都这样。。。欲哭无泪啊,求大神们慷慨相助!!

DNAsanger测序法原理.pdf123
专心学生物2017-10-02
为甚么只有加法系统不行?最好举例说明,谢谢!!!
正在做bmp4启动子的一段序列,两端分别加的Sac1和Nhe1的位点,pcr之后跑胶显示条带位置正确,回收后分别与pgemt-easy载体和peasy-t5zero载体连接,连接之后单酶切和双酶切均显示连接成功,但测序结果就是不对,已经测了3次,求哪位大神指教一二,多谢了!!难道真的是pcr出的序列本来就是错的?而且连接peasy-t5zero载体后双酶切切不开。我用的Sac1和Nhe1是Thermo的,正在尝试换takara的重新双酶切。
pgem-teasy载体插入片段位点两侧各有一个EcoR1的位点。