二代测序(NextGenerationSequencing,NGS)技术如今大行其道,各科研单位和检测服务公司都相继引入二代测序系统。然而,二代测序过程烦琐精密,其中对样本核酸量的准确定量是成败关键之一。现今在NGS过领域中,荧光核酸定量检测为业界比较认可和普及的方法。在法方上,常见的是LifeTechnologies公司的qubit仪器配上其荧光探针。可是此方案每次检测单个样本,未必可轻松应付高通量样本。再者,对于珍贵临床样本进行NGS检测时,现有的方法还是会用上相对多的样本,而且其检测灵敏度未必可检测到低丰度的核酸样本。
针对以上问题,美国Biotium公司研发了AccuBlue™NextGen荧光探针,它通过专利的增强剂技术,大大降低了荧光背景同时大大提高了结合探针的荧光强度。相关的应用资料表明,AccuBlue™NextGen荧光探针和大多数的荧光酶标仪相结合,可以检测低至5pg高至5000pg的动态范围。在Biotium公司的官方试剂盒说明书指出使用来自德国专业酶标仪公司BMGLabtech的CLARIOstar多功能酶标仪为这检测中灵敏度最好的仪器,在96孔板、200μl检测中可低至1pg;384孔板、50μl检测中更可低至0.6pg。而最新BMGLabtech官方的应用案例证明,CLARIOstar更可把该定量方案的灵敏度大大提高了一个数量级低至0.3pgdsDNA。在这强强连手的有机结合下,CLARIOstar与AccuBlue™NextGen造就了目前市场上最灵敏的高通量核酸荧光定量方案。
CLARIOstar多功能酶标仪是目前市场上灵敏度最高的多功能酶标仪,它整合了高品质滤光片滤光系统和专利的LVF光栅技术,把德国精密仪器的精湛工艺发挥到了极致。在CLARIOstar上进行AccuBlue™NexGen核酸荧光定量,不但把传统96孔板体系扩展到了384孔板体系,大大提高了通量、节省了试剂成本,减少对珍贵样本消耗,同时在检测灵敏度上也得到了极大的提升