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【求助】急求promega双萤光报告基因试剂盒E1910操作中文指南...
来自 : mayitao
货号:KK4822~KK4850
数量:大量
保质期:18-24月
供应商:KAPA
保存条件:-20℃
规格:见详述

适用平台:
1、IlluminaGenomeAnalyzer
2、Roche454GSTitaniumandFLX
3、ABISOLiD
 
快速、高效定量、可靠的文库定量对于二代测序十分重要
1、过高估计文库的大小,导致数据读取量少,基因组覆盖率低;
2、过低估计文库的大小,导致clusters或多重模板太多,数据质量不高;
 
Real-timePCR与二代测序文库定量
1、只有qPCR可以定量文库中模板的数量,利于emPCR和桥PCR反应;
2、qPCR灵敏度高,可以精确定量,且所需试验材料量极少。
结论:qPCR是二代测序中文库定量的最佳选择。
 
普通qPCR方法的缺点:
1、普通qPCR含有的是野生型Taq酶,而反应体系中的SYBRGreen燃料对其有抑制:
(1)扩增长度大于400bp时,扩增效率降低;
(2)GC或AT含量过高是,扩增效率降低。
2、自制DNA标准品,费时,定量不准,不能保证每个孔的均一性。
 
KAPA二代测序定量试剂盒克服以上缺点:
1、DNA聚合酶是二代酶,对抑制剂不敏感,与DNA结合更好,单位酶扩增效率更高,可以扩增长片段(1kb)和复杂结构的模板;
2、试剂盒中的DNA标准品是专为二代测序平台设计,稳定性高,均一性好。
 
KAPASYBRFASTqPCR试剂盒优点:
1、反应效率高;
2、可扩增AT/GC含量高的模板;
3、高灵敏度和线性特征;
4、动态范围宽
5、重复性强;
6、速度快,且灵敏度与效率高。

美国几大二代测序中心已经开始使用该试剂盒
1、USNextGenerationSequencingCentres(NGSC)
2、BroadInstitute
3、theJointGenomeCentre
4、theJCraigVenterInstitute
5、BeckmannCoulterandUCBerkley
 
详细介绍:http://www.kapabiosystems.com/products/name/kapa-library-quant-kits

 

 

温馨提示:不可用于临床治疗。
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