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NEB/Bst DNA Polymerase, Large Fragment/M0275S/8,000 units
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Description:

BstDNAPolymerase,LargeFragmentistheportionoftheBacillusstearoThermophilusDNAPolymeraseproteinthatcontainsthe5´→3´polymeraseactivity,butlacks5´→3´exonucleaseactivity.
Highlights
- Isolatedfromarecombinantsource
- Sequencingthroughproblematicsecondarystructures
- Suppliedwith10XReactionBuffer
ProductSource
Bst Polymerase,LargeFragmentispreparedfroman E.coli straincontainingageneticfusionofthe Bacillusstearothermophilus DNAPolymerasegene,lackingthe5´→3´exonucleasedomain,andthegenecodingfor E.coli maltosebindingprotein(MBP).ThefusionproteinispurifiedtonearhomogeneityandtheMBPportionofthefusioniscleavedoff invitro.TheremainingpolymeraseispurifiedfreeofMBP(1).ReagentsSupplied
Thefollowingreagentsaresuppliedwiththisproduct:
Storeat(°C) | Concentration | |
ThermoPol® ReactionBufferPack | -20 | 10X |
MagnesiumSulfate(MgSO4)Solution | -20 | 100mM |
Notes:
BstDNAPolymerasedoesnotexhibit3´→5´exonucleaseactivity.100µg/mlBSAor0.1%TritonX-100isrequiredforlongtermstorage.Reactiontemperaturesabove70°Carenotrecommended.BstDNAPolymerase,LargeFragmentcannotbeusedforthermalcyclesequencingorPCR.蚂蚁淘电商平台
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2018-12-26
The motor defects of Parkinson"s disease are related to the loss of dopaminergic neurons in specific brain regions. Examination of these neurons in diseased ti 查看更多
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北京爱尚阳光科技有限公司在发布的TAdvanced 96 基因扩增仪 供应信息,浏览与TAdvanced 96 基因扩增仪 相关的产品或在搜索更多与TAdvanced 96 基因扩增仪 相关的内容。 查看更多
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2018-03-27
宝予德(中国)有限公司(BIO-DL)在发布的Life Eco扩增仪/PCR扩增仪供应信息,浏览与Life Eco扩增仪/PCR扩增仪相关的产品或在搜索更多与Life Eco扩增仪/PCR扩增仪相关的内容。 查看更多
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2021-07-14
实时荧光核酸恒温扩增检测技术(Simultaneous Amplification and Testing,简称SAT)是将新一代的核酸恒温扩增技术和实时荧光检测技术相结合的一种新型核酸检测技术。该技术具有高灵敏度、高特异性、低污染、反应稳定等优点。... 查看更多
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2021-08-08
(1)从兔肝细胞中提取mRNA,在逆转录酶的作用下形成互补DNA,然后以此DNA为模板在体外利用聚合酶链式(PCR)反应大量扩增,得到基因E.在相关酶的作用下,将基因E与Ti... 查看更多
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2021-08-26
StemSpan™ CD34+ Expansion Supplement (10X)/StemSpan™ CD34+扩增添加物是由北京冬歌博业生物科技有限公司代理或销售的Zymo品牌的试剂,产品来源于中国。北京冬歌博业生物科技有限公司是中国最权威的StemSpan™ CD34+ Expansion Supplement (10X)/StemSpan™ CD34+扩增添加物试剂销售服务商之一,在北京等地方销售StemSpan™ CD34+ Expa 查看更多
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2018-06-08
1.1.7 重组酶聚合酶扩增技术重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification, RPA)技术 [61-64]是英国公司 TwistDx Inc 开发的在低温下的恒温... 查看更多
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2021-09-20
一个月内,顶级学术期刊连发两篇顶级论文!上半年引爆生物圈的华人科学家张锋教授团队又有新动作!这次,他在一月内,分别在《Nature》、《Science》连发两篇论文!他将CRISPR-Cas13a改造成了灵敏度达到了阿摩尔级(aM,10的负18次方摩尔每升),可以检测单分子的SHERLOCK技术。而这其中,RPA起到了不小的作用。那么,什么是RPA呢?RPA,即重组酶聚合酶扩增技术,是在由多种酶和蛋白的参与下,在恒温条件下实现核酸指数扩... 查看更多
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2021-09-01
Applied Biosystems ProFlex™ PCR仪 流式细胞仪Attune® Acoustic Focusing Cytometer 便携式分析仪 MagMAX™ Express 磁珠处理仪-Life Tech(Invitrogen) ... 查看更多
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2018-06-03
北京惠博远致科技有限公司在发布的cDNA末端的快速扩增 (RACE)供应信息,浏览与cDNA末端的快速扩增 (RACE)相关的产品或在搜索更多与cDNA末端的快速扩增 (RACE)相关的内容。 查看更多
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2021-09-12
Power LA-Taq DNA聚合酶(长片段高GC模板扩增)是由北京百泰克生物技术有限公司代理或销售的BioTeke品牌的试剂,产品来源于北京,百泰克公司。北京百泰克生物技术有限公司是中国最权威的Power LA-Taq DNA聚合酶(长片段高GC模板扩增)试剂销售服务商之一,在北京等地方销售Power LA-Taq DNA聚合酶(长片段高GC模板扩增)试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业Power LA-Taq DNA聚合酶(长片段高GC模板扩增)仪器产品及图片,以便挑选到性价比高,合适的Power 查看更多
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2021-08-14
威斯腾生物在发布的微生物基因组重测序(ChIP-Seq、扩增子测序、全基因组测序、宏转录组测序、单细胞基因组测序、长链非编码RNA测序、宏基因组测序、外显子组测序、微生物基因组重测序等) 威斯腾生物,让科研更简单!供应信息,浏览与微生物基因组重测序(ChIP-Seq、扩增子测序、全基因组测序、宏转录组测序、单细胞基因组测序、长链非编码RNA测序、宏基因组测序、外显子组测序、微生物基因组重测序等) 威斯腾生物,让科研更简单!相关的产品或在搜索更多与微生物基因组重测序(ChIP-Seq、扩增子测序、全 查看更多
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利用恒温扩增技术对常见致病菌进行检测,食品行业里应用的前景怎么样...123
淡雅生活之夕阳2018-01-24
应用很广泛,因为比荧光定量PCR的操作简单方便,无需专业人员操作,仪器的性价比高,挺受食品企业的追捧,食药系统也用的不少,现在技术越来越成熟,以后的应用会越来越广
【分享】欢迎加入环介导的恒温扩增法(LAMP)讨论群70918628 ...123
cxbyunong2021-07-22
欢迎加入环介导的恒温扩增法(LAMP)讨论群70918628
环介导等温扩增技术的临床应用进展123
火烈鸟20172021-07-28
请问一下,目前环介导等温扩增技术在临床上的应用怎么样?
分子生物学实验报告123
louise36532021-07-23
恒温核酸扩增学术百科知网空间123
冰洁20112012-09-24
LAMP(环介导等温扩增)技术 实验方法 123
cxbyunong2021-07-24
欢迎讨论环介导的恒温扩增法(LAMP)
LAMP(环媒介导恒温扩增法),LAMP (Loopmediated isothermal ...123
momanqian2021-07-26
目前,我在研究有关LAMP的技术,但做了十几次都没有作出来,国外做的多数是用环介导的扩增试剂盒做的,而我们国内买不到相关的试剂,只能是自己配。不知是我配制的试剂不准,还是方法不对,总之是做不出来。有那位大侠做过这个技术的,希望能给我指点,或者我们交流一下。我qq号码为:86339603
恒温扩增可取代变温PCR?技术优劣势看这里!123
bitianxuan2018-01-24
就是原跟过程不一样,结果都一样的吧?不懂啊
环介导等温扩增技术(loopmediated isothermal amplification,LAMP)123
mylab2021-07-20
各位战友:
今天发现,我在核酸技术区开辟的“DIG/Biotin标记的Southern/Northern杂交专题讨论”4个月,今天回帖数破100,点击达1500多次。能和大家一起分享和交流,并且得到共同提高,心情很是愉快。
所以想借PCR技术区的宝地,新开辟“环介导等温扩增技术(Loop-MediatedIsothermalAmplification,LAMP)专题讨论”。我做LAMP一年多了,有些经验。而最近,和我谈起LAMP的朋友明显增多。所以在这方面大家有什么心得、体会、资料和实验困难,希望能一起交流讨论。谢谢支持!
今天发现,我在核酸技术区开辟的“DIG/Biotin标记的Southern/Northern杂交专题讨论”4个月,今天回帖数破100,点击达1500多次。能和大家一起分享和交流,并且得到共同提高,心情很是愉快。
所以想借PCR技术区的宝地,新开辟“环介导等温扩增技术(Loop-MediatedIsothermalAmplification,LAMP)专题讨论”。我做LAMP一年多了,有些经验。而最近,和我谈起LAMP的朋友明显增多。所以在这方面大家有什么心得、体会、资料和实验困难,希望能一起交流讨论。谢谢支持!
恒温扩增技术是什么? 123
oiljdljdio2018-01-24
操作方法?
原理?(没有就算了...)
答的好的提高悬赏50分
有原理的追加50分
谢谢啊~~~~
原理?(没有就算了...)
答的好的提高悬赏50分
有原理的追加50分
谢谢啊~~~~
交叉引物恒温扩增技术(CPA)研究进展123
zheng_ran2021-07-21
交叉引物恒温扩增技术
核酸扩增是核酸分子诊断的关键技术。根据核酸扩增反应中温度变化要求,可以将核酸扩增技术分为两大类:一类是PCR核酸扩增技术,另一类是核酸恒温扩增技术。
PCR技术是指通过控制温度的变化来实现DNA扩增的三个步骤:模板变性(如95℃)-引物杂交(如58℃)-DNA合成(如72℃)。这种温度变化的循环重复(如重复35次)过程通常由精密而复杂的仪器(PCR仪)来控制。核酸恒温扩增技术(NucleicAcidIsothermalAmplification,NAIA)则是扩增反应的全过程均在同一温度下进行,不须象PCR反应那样需要经历几十个温度变化的循环过程。这一特点使得它们对扩增所需仪器的要求大大简化,反应时间大大缩短,因而具有巨大的应用价值,成为分子诊断行业发展中的热点。
目前的NAIA技术主要有滚环扩增技术(RollingCircleAmplification,RCA)、转录酶扩增技术(TranscriptionMediatedAmplification,TMA)、依赖核酸序列扩增技术(NucleicAcidSequenceBasedAmplification,NASBA)、链置换扩增技术(stranddisplacementamplification,SDA)、环介导的等温扩增技术(Loop-MediatedIsothermalAmplification,LAMP)、解链酶扩增技术(HelicaseDependentAmplification,HDA)。上述各种核酸扩增技术均由国外公司所拥有。
交叉引物扩增技术(CrossingPrimingAmplification,CPA)是完全由优思达公司独立研发成功的一种新的核酸恒温扩增技术,也是中国首个具有自主知识产权的核酸扩增技术。CPA与优思达公司其他技术相结合(如快速核酸提取技术、核酸试纸条检测技术等),形成一个完整的现场快速分子检测平台,可以开发出众多恒温扩增检测试剂盒,广泛应用于分子诊断、防疫检疫、生物医学研究、个体化治疗等领域。该技术已申请中国和美国发明专利,在美国《MolecularDiagnostics》等杂志发表论文二篇,并通过了比尔?盖茨基金会资助申请。
CPA扩增体系中除包含具有链置换功能的BstDNA聚合酶外,还主要包括扩增引物和两条交叉引物。这些寡聚核苷酸链能依靠BstDNA聚合酶的高活性的链置换特性,使DNA的循环扩增能不断的实现。CPA扩增主要包含以下几个步骤:
交叉正向引物CPF中的PFs与模板DNA中PFa互补,启动DNA合成,使得PRa被引入到所扩增的产物中;
外围引物DP1s与PFa前端DP1a序列互补,通过链置换型DNA聚合酶向前延伸,一边置换CPF合成的能与CPR和DP2a结合的单链产物(结构3),一边与模板DNA形成双链产物(结构2);
在结构3中,DP2a通过链置换型DNA聚合酶向前延伸,置换出由CPR所延伸的单链产物(结构5),同时合成与步骤2中由CPF延伸所产生单链DNA形成双链产物(结构4),而结构5相对起始的DNA模板,多了PRs和PFs两个片段序列;
单链结构5中的3’端的PFa和PRs可分别与CPF中的PFs和CPR中的PRa互补结合,可在链置换型DNA聚合酶的作用下延伸和置换出相应的单链产物。延伸产物相对结构5来说又增加了一个PFs区域(结构8);
因此,扩增引物CPF和CPR的不断杂交和延伸,不仅使得结构5的长度不断的加长,从而引入更多CPF和CPR3’端互补区域,同时也置换出了各种可与CPF和CPR3’端互补的单链产物;
通过CPF和CPR的不断杂交延伸和DNA聚合酶的链置换作用,使得DNA拷贝数不断的增加,从而达到基因扩增的效果。
使用本装置提取临床生物样品的核酸成本低廉,只需几分钟,可以应用于现场检测或实验资源较少的基层医院和经济不发达地区;同时也可以满足大医院特定情况下的需求,如急诊或床边的核酸快速诊断。该技术已申请发明专利,并取得盖茨基金会研发资助。
CPA基本原理如下:
图2CPA扩增的反应原理图
与目前广泛使用的荧光PCR技术相比较,CPA技术有以下几个优点:
反应速度快:反应时间约1小时,使试剂盒可用于检验检疫、突发性传染病的检测与监控现场检测或医院的床边诊断(Point-of-Testing,POCT);
检测成本低:目前荧光光定量PCR仪价格昂贵,无法在很多中小医院普及。CPA扩增只需要离心机和一台简单的恒温装置,如普通的水浴锅、金属浴,即可进行扩增。
操作简单:对操作人员的技能要求不高,绝大多数人通过简单培训或自学都可掌握,为核酸检测试剂的广泛应用创造了条件。
核酸扩增是核酸分子诊断的关键技术。根据核酸扩增反应中温度变化要求,可以将核酸扩增技术分为两大类:一类是PCR核酸扩增技术,另一类是核酸恒温扩增技术。
PCR技术是指通过控制温度的变化来实现DNA扩增的三个步骤:模板变性(如95℃)-引物杂交(如58℃)-DNA合成(如72℃)。这种温度变化的循环重复(如重复35次)过程通常由精密而复杂的仪器(PCR仪)来控制。核酸恒温扩增技术(NucleicAcidIsothermalAmplification,NAIA)则是扩增反应的全过程均在同一温度下进行,不须象PCR反应那样需要经历几十个温度变化的循环过程。这一特点使得它们对扩增所需仪器的要求大大简化,反应时间大大缩短,因而具有巨大的应用价值,成为分子诊断行业发展中的热点。
目前的NAIA技术主要有滚环扩增技术(RollingCircleAmplification,RCA)、转录酶扩增技术(TranscriptionMediatedAmplification,TMA)、依赖核酸序列扩增技术(NucleicAcidSequenceBasedAmplification,NASBA)、链置换扩增技术(stranddisplacementamplification,SDA)、环介导的等温扩增技术(Loop-MediatedIsothermalAmplification,LAMP)、解链酶扩增技术(HelicaseDependentAmplification,HDA)。上述各种核酸扩增技术均由国外公司所拥有。
交叉引物扩增技术(CrossingPrimingAmplification,CPA)是完全由优思达公司独立研发成功的一种新的核酸恒温扩增技术,也是中国首个具有自主知识产权的核酸扩增技术。CPA与优思达公司其他技术相结合(如快速核酸提取技术、核酸试纸条检测技术等),形成一个完整的现场快速分子检测平台,可以开发出众多恒温扩增检测试剂盒,广泛应用于分子诊断、防疫检疫、生物医学研究、个体化治疗等领域。该技术已申请中国和美国发明专利,在美国《MolecularDiagnostics》等杂志发表论文二篇,并通过了比尔?盖茨基金会资助申请。
CPA扩增体系中除包含具有链置换功能的BstDNA聚合酶外,还主要包括扩增引物和两条交叉引物。这些寡聚核苷酸链能依靠BstDNA聚合酶的高活性的链置换特性,使DNA的循环扩增能不断的实现。CPA扩增主要包含以下几个步骤:
交叉正向引物CPF中的PFs与模板DNA中PFa互补,启动DNA合成,使得PRa被引入到所扩增的产物中;
外围引物DP1s与PFa前端DP1a序列互补,通过链置换型DNA聚合酶向前延伸,一边置换CPF合成的能与CPR和DP2a结合的单链产物(结构3),一边与模板DNA形成双链产物(结构2);
在结构3中,DP2a通过链置换型DNA聚合酶向前延伸,置换出由CPR所延伸的单链产物(结构5),同时合成与步骤2中由CPF延伸所产生单链DNA形成双链产物(结构4),而结构5相对起始的DNA模板,多了PRs和PFs两个片段序列;
单链结构5中的3’端的PFa和PRs可分别与CPF中的PFs和CPR中的PRa互补结合,可在链置换型DNA聚合酶的作用下延伸和置换出相应的单链产物。延伸产物相对结构5来说又增加了一个PFs区域(结构8);
因此,扩增引物CPF和CPR的不断杂交和延伸,不仅使得结构5的长度不断的加长,从而引入更多CPF和CPR3’端互补区域,同时也置换出了各种可与CPF和CPR3’端互补的单链产物;
通过CPF和CPR的不断杂交延伸和DNA聚合酶的链置换作用,使得DNA拷贝数不断的增加,从而达到基因扩增的效果。
使用本装置提取临床生物样品的核酸成本低廉,只需几分钟,可以应用于现场检测或实验资源较少的基层医院和经济不发达地区;同时也可以满足大医院特定情况下的需求,如急诊或床边的核酸快速诊断。该技术已申请发明专利,并取得盖茨基金会研发资助。
CPA基本原理如下:
图2CPA扩增的反应原理图
与目前广泛使用的荧光PCR技术相比较,CPA技术有以下几个优点:
反应速度快:反应时间约1小时,使试剂盒可用于检验检疫、突发性传染病的检测与监控现场检测或医院的床边诊断(Point-of-Testing,POCT);
检测成本低:目前荧光光定量PCR仪价格昂贵,无法在很多中小医院普及。CPA扩增只需要离心机和一台简单的恒温装置,如普通的水浴锅、金属浴,即可进行扩增。
操作简单:对操作人员的技能要求不高,绝大多数人通过简单培训或自学都可掌握,为核酸检测试剂的广泛应用创造了条件。
【原创】一种新的RNA恒温扩增技术SAT技术_问答123
rdbio2010-08-03
技术原理
同一温度下,首先通过M-MLV反转录酶产生靶标核酸(RNA)的一个双链DNA拷贝,然后利用T7RNA多聚酶从该DNA拷贝上产生多个(100~1000个)RNA拷贝;每一个RNA拷贝再从反转录开始进入下一个扩增循环;还可以加入荧光探针(分子信标),带有荧光标记的探针和这些RNA拷贝特异结合,产生荧光。该荧光信号可由实时荧光PCR仪实时捕获,直观反映扩增循环情况。
SAT检测技术的优势
→先进的恒温扩增技术
核酸扩增在一个温度下进行(42℃),无需热循环。
→领先的RNA检测技术
SAT技术直接以病原体特异性RNA为扩增靶标,以扩增产物RNA为检测靶标,在实际应用中更显优势意义。
→更高的检测灵敏度和准确性
SAT技术的扩增效率极高,15~30分钟即可将模板扩增109倍,检测灵敏度和准确性远高于其他核酸检测技术。扩增时间短,效率高。
→有效减少假阴性结果
SAT技术采用M-MLV逆转录酶和T7RNA多聚酶进行核酸扩增,相对于其它核酸扩增技术,反应抑制物更少,有效减少假阴性结果。
→有效的解决了扩增产物的污染问题
由于扩增产物为RNA,环境中极易降解,从而大幅度提高检测结果的可靠性。
→大大降低了核酸扩增实验室的要求
同一温度下,首先通过M-MLV反转录酶产生靶标核酸(RNA)的一个双链DNA拷贝,然后利用T7RNA多聚酶从该DNA拷贝上产生多个(100~1000个)RNA拷贝;每一个RNA拷贝再从反转录开始进入下一个扩增循环;还可以加入荧光探针(分子信标),带有荧光标记的探针和这些RNA拷贝特异结合,产生荧光。该荧光信号可由实时荧光PCR仪实时捕获,直观反映扩增循环情况。
SAT检测技术的优势
→先进的恒温扩增技术
核酸扩增在一个温度下进行(42℃),无需热循环。
→领先的RNA检测技术
SAT技术直接以病原体特异性RNA为扩增靶标,以扩增产物RNA为检测靶标,在实际应用中更显优势意义。
→更高的检测灵敏度和准确性
SAT技术的扩增效率极高,15~30分钟即可将模板扩增109倍,检测灵敏度和准确性远高于其他核酸检测技术。扩增时间短,效率高。
→有效减少假阴性结果
SAT技术采用M-MLV逆转录酶和T7RNA多聚酶进行核酸扩增,相对于其它核酸扩增技术,反应抑制物更少,有效减少假阴性结果。
→有效的解决了扩增产物的污染问题
由于扩增产物为RNA,环境中极易降解,从而大幅度提高检测结果的可靠性。
→大大降低了核酸扩增实验室的要求


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