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biopioneerinc/Genomic DNA miniprep kit for plant, 100 preps/1/GDMIP-P100
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BP-10 Spin Column Genomic DNAMinipreps Kit, Plant
BP-10 Spin GenomicDNA Minipreps Kit, Plant | GDMIP-100P, 100 Preps |
RNase A (10 mg/ml)(a) PCLSolution PPSolution PBSolution WashSolution(b) ElutionBuffer(c) EZ-10 SpinColumn & 2.0-ml Collection Tube Protocol | 300 ml 30 ml 4 ml 40 ml 24 ml 10 ml 100 1 |
Introduction
The BP-10Spin Column Kits provide a simple and efficient method for purification ofgenomic DNA from different sources such as Bacteria, Plant, Animal and Blood.
The DNA isselectively adsorbed in silica gel-based BP-10 Spin Column and other componentsare washed away. The genomic DNA is eluted off the column and can be used forany downstream applications, including restriction enzyme digestion, PCR,Southern-blotting, etc.
Thepurification methods used in these protocols do not require use of phenol,chloroform, or CsCl. The DNA is purified without an additional step of ethanolprecipitation.
These kitsare designed for research only. The purified DNA should not be used for liveanimal transfections. It is also not to be used for human diagnostic or drugproduction purposes.
Features
- Simple, fast and efficient
- Preparation of high quality genomicDNA from various sources
- High yield and reproducible
- No phenol / chloroform extraction orethanol precipitation required
- High capacity: up to 10µg of DNA percolumn
Applications
Efficient ofup to 10µg of genomic DNA purification from different sources
Storage
With theexception of the Proteinase K, the kit may be stored at room temperature.Proteinase K should be stored at 4ºC for short term or -20ºC for longterm. The kit is stable for 12 months at room temperature. For longer storage,keep all contents in cold place.
Quality Control
Each lot ofBP-10 Spin Column kit is tested against predetermined specifications to ensureconsistent product quality.
- PCLSolution DOES NOT contain RNase A (100 µg/ml). Please add entire contents ofRNAse A into PCL Solution and store at 4ºC for long term storage. PCL Solution may form a precipitate upon storage. If necessary,dissolve the precipitate by warming up to room temperature.
- Beforeuse, add 96ml of 100% ethanol to 24ml Wash Solution for GDMIP-100P.For other volumes of wash solution, simplyadd enough ethanol to make a 4:1 ratio (volume of added ethanol : volume of WashSolution = 4:1).
- ElutionBuffer is 2.0mM Tris-HCl pH 8.0~8.5. Although TE buffer pH 8.0 or water can beused, yield may be 20% lower.
Procedures for Isolation of Genomic DNA from Plants
- PlantTissue Sample Preparation
- Grind plant tissue under liquid nitrogen to a finepowder using a mortar and pestle. Transfer the powder and liquid nitrogen to1.5ml Eppendorf tube and allow liquid nitrogen to be evaporated. Do not allowthe sample to thaw. Proceed immediately to Step 2.
- Note:
- Ifsample can not be used immediately for genomic DNA extraction, it isrecommended to store at -20ºC for long-term use.
- Avoid repeated freezing and thawing of stored samples, since this leads to reduced DNA size and yield.
- Incubation period depends on the nature of sample. Longer period incubation even overnight incubation will not affect the result.
- Better results could be achieved if starting material is less than 60mg.In any case, the quantity of samples should not exceed 100 mg for one BP-10 Spin Column.
- Checkthe volume of grounded material, and add equal volume (approximately 150µl) ofPCL Solution (Plant Cell Lysis Solution).
- Vortexand shake the tube several times. Incubate at 65ºC for 20 minutes,vortex or pipette up and down to further remove any clumps. Clumped tissue willnot lyse properly and will result in a lower yield of DNA.
- Add25µl PP Solution. Mix well. Keep the solution on ice for 15 minutes.
- Centrifugeat 4ºC, 8,000 x g (10,000 rpm) for 5 minutes. Apply the clearlysate to an BP-10 Spin Column.
- Add300µl PB buffer to the BP-10 Spin Column. Mix gently by inverting the tube.Incubate the mixture for 3 minutes at room temperature. During incubation, mixoccasionally by inverting the tube.
- Centrifugeat 4ºC, 8,000 x g(10,000 rpm) for 2 minutes.
- Discardthe flow-through in the Collection Tube. Add 500µl of Wash Solution, and spinat 8,000 x g (10,000 rpm) for 2 minutes.
- RepeatStep 8.
- Discard flow-through. Spin at 8,000 xg (10,000 rpm) for an additional minute to remove residual amount of WashSolution.
- Place the column into a clean 1.5mlEppendorf tube. Add 30-50µl Elution Buffer into the center part of membrane inthe column. Incubate at RT for 2 or 3 minutes. Incubating the tube at 37 or 50ºC for 2 minutes may increase recovery yield.
- Spin at 8,000 x g (10,000 rpm) for 2minutes to elute DNA from the column. Measure DNA quantity by UV absorption atA260 (1.0 OD unit is equivalent of 50µg).
- For long term storage, keep aliquotsof purified genomic DNA at -20ºC.
Measure DNA quantity by UV absorption at A260(1.0 OD unit is equivalent of 50 µg). Assess genomic DNA quality by ananalytical 0.7% agarose gel. Isolated genomic DNA should not contain RNA. Itslength should be over 50 kb.
Troubleshooting Guide: BP-10 SpinColumn Genomic DNAMinipreps Kit, Plant
- Low Yield
- There are a number of variables that can cause low yield.
- Inefficienthomogenization.
- Ensure that the material is completely disrupted. If necessary, increase time of homogenization.
- Low DNA content of plant tissue.
- Increase the amount of starting material to 200mg.
- RNA contamination
- RNase activity is weakened or lost.Add 30% additional RNAse A, and store solution at 4ºC.
- OD 260nm/280nm ratio outside1.9-2.2 range
- If the ratio of OD260nm/280nm is greater than 2.2, there maybe traces of ethanol present. If the ratio of OD260nm/280nm is smaller than1.9, there is a chance of protein contamination. Make sure the sample is mixedwell after Proteinase K digestion.
Biopioneer Brand:
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ebiomall.com
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公司简介
蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
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运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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聚合酶链式反应简称PCR（Polymerase Chain Reaction） (又称：多聚酶链式反应) PCR是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法，由高温变性、低温退火（复性）及适温延伸等反应组成一个周期，循环进行，使目的DNA得以迅速扩增,具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。它不仅可用于基因分离、克隆和核... 查看更多
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2021-08-04
广州市锐博生物科技有限公司在发布的高通量测序服务—扩增子测序供应信息，浏览与高通量测序服务—扩增子测序相关的产品或在搜索更多与高通量测序服务—扩增子测序相关的内容。 查看更多
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2021-09-02
QuantStudio™ 12K Flex Real-Time PCR Systeml-Time PCR System 品牌: Life Technologies 产地: 美国 样本: 【暂无】 信息完整度: 典型用户: 0 分享:... 查看更多
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2021-09-09
北京普凯瑞生物科技有限公司在发布的二手 ABI PCR 扩增仪供应信息，浏览与二手 ABI PCR 扩增仪相关的产品或在搜索更多与二手 ABI PCR 扩增仪相关的内容。 查看更多
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2021-08-22
在塑料配混中，改善合成树脂与无机填充剂或增强材料的界面性能的一种塑料添加剂。又称表面改性剂。它在塑料加工过程中可降低合成树脂熔体的粘度，改善填充剂的分散度以提高加工性能，进而使制品获得良好的表面质量及机械、热和电性能。其用量一般为填充剂用量的0.5～2%。偶联剂一般由两部... 查看更多
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2018-02-09
北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司在发布的伯乐T100 全新原装进口 基因扩增仪供应信息，浏览与伯乐T100 全新原装进口 基因扩增仪相关的产品或在搜索更多与伯乐T100 全新原装进口 基因扩增仪相关的内容。 查看更多
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2021-07-29
上海超研生物科技有限公司在发布的小鼠尾巴基因组DNA提取扩增试剂盒供应信息，浏览与小鼠尾巴基因组DNA提取扩增试剂盒相关的产品或在搜索更多与小鼠尾巴基因组DNA提取扩增试剂盒相关的内容。 查看更多
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2018-03-24
郑州博邦科贸有限公司在发布的MGL96G基因扩增仪\郑州PCR仪\河南PCR仪\PCR仪价格\PCR仪厂家供应信息，浏览与MGL96G基因扩增仪\郑州PCR仪\河南PCR仪\PCR仪价格\PCR仪厂家相关的产品或在搜索更多与MGL96G基因扩增仪\郑州PCR仪\河南PCR仪\PCR仪价格\PCR仪厂家相关的内容。 查看更多
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2018-05-28
上海卓康生物科技有限公司在发布的质粒扩增、筛选用试剂供应信息，浏览与质粒扩增、筛选用试剂相关的产品或在搜索更多与质粒扩增、筛选用试剂相关的内容。 查看更多
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2018-12-26
The binding of ?-arrestins to agonist-occupied GPCRs triggers the assembly of a MAP kinase activation complex using ?-arrestin as a scaffold, with subsequent a 查看更多
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The binding of ?-arrestins to agonist-occupied GPCRs coincides with the recruitment of Src family tyrosine kinases, including c-Src, Hck and c-Fgr (Src-TK), to 查看更多
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2021-08-03
Paragon Genomics是一家位于美国硅谷的生命科技初创公司。我们致力于开发具有突破性且易于使用的超高多重PCR技术, 用于基因组分析和临床诊断市场。我们的核心技术将首先应用于下一代基因测序文库制备市场，从而实现更准确, 更快, 并且更便宜的DNA测序样品制备和个体化医疗。基因检测是整个精准医学的基础，来自美国硅谷的Paragon Genomics正是一家致力于突破目前基因检测领 查看更多
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利用恒温扩增技术对常见致病菌进行检测,食品行业里应用的前景怎么样...123
淡雅生活之夕阳2018-01-24
应用很广泛，因为比荧光定量PCR的操作简单方便，无需专业人员操作，仪器的性价比高，挺受食品企业的追捧，食药系统也用的不少，现在技术越来越成熟，以后的应用会越来越广
环介导等温扩增_LAMP_技术的应用研究123
serain332021-07-27
大家好，现在做LAMP结果颠倒了，阴性对照会出现LAMPladder条带，而加了基因组DNA的反而扩增不出来，有没有人遇见这种情况？最后如何解决了呢？
鹤刺绣衬衫搭配|鹤刺绣衬衫穿搭|鹤刺绣衬衫品牌|尺寸 淘宝海外123
5910456602018-01-24
主要是该方法使用了Bst酶，双链的DNA有一个特性，就是在65度时双链之间的结合较为松散，称之为动态平衡状态，所以不需要预变性使双链解开，而Bst酶在65度时的活性是最高的，这样LAMP反应就能正常进行了
【求助】梯度PCR有条带,恒温扩增无条带 核酸基因技术论坛123
yangjunfly2010-09-09
环介导等温扩增技术(loopmediated isothermal amplification,LAMP)123
mylab2021-07-20
各位战友：
今天发现，我在核酸技术区开辟的“DIG/Biotin标记的Southern/Northern杂交专题讨论”4个月，今天回帖数破100，点击达1500多次。能和大家一起分享和交流，并且得到共同提高，心情很是愉快。
所以想借PCR技术区的宝地，新开辟“环介导等温扩增技术(Loop-MediatedIsothermalAmplification,LAMP)专题讨论”。我做LAMP一年多了，有些经验。而最近，和我谈起LAMP的朋友明显增多。所以在这方面大家有什么心得、体会、资料和实验困难，希望能一起交流讨论。谢谢支持！
今天发现，我在核酸技术区开辟的“DIG/Biotin标记的Southern/Northern杂交专题讨论”4个月，今天回帖数破100，点击达1500多次。能和大家一起分享和交流，并且得到共同提高，心情很是愉快。
所以想借PCR技术区的宝地，新开辟“环介导等温扩增技术(Loop-MediatedIsothermalAmplification,LAMP)专题讨论”。我做LAMP一年多了，有些经验。而最近，和我谈起LAMP的朋友明显增多。所以在这方面大家有什么心得、体会、资料和实验困难，希望能一起交流讨论。谢谢支持！
LAMP(环介导等温扩增)技术 实验方法 123
cxbyunong2021-07-24
欢迎讨论环介导的恒温扩增法（LAMP）
恒温扩增RPA实验中如何避免污染123
xiaohe199004252018-01-24
(1)严格分区操作，样品提取区、配液区、扩增区、检测区应相互独立，各区耗材及移液器应专用，实验前先用紫外线消毒以破坏残留的核酸。
(2)操作多份样品时，应先配制反应混合液并分装，减少操作，避免污染，同时增加反应的精确度。试剂的配置和分装应在装有紫外灯的超净工作台或负压工作台操作。
(3)移液器和吸头需专用。由于移液器极易受气溶胶或模板核酸的污染，移液器应尽可能使用可替换或可高压处理的，吸头尽可能使用带滤芯的吸头。
(4)防止操作人员污染，使用一次性手套，EP管与吸头应一次性使用，吸头不要长时间暴露于空气中，避免气溶胶的污染。
(5)加样或吸取模板核酸时要十分小心，吸样要缓慢，防止样品进入移液器内；吸样时尽量一次性完成，忌多次抽吸，以免交叉污染或产生气溶胶污染。
(6)EP管打开应先离心，将管壁及管盖上的液体甩至管底部。开管动作要轻，以防管内液体溅出。若不小心溅到手套或桌面上，应立刻更换手套并用稀酸擦拭桌面。
(7)模板核酸应密封保存，防止外溢及外来核酸的进入。
(8)设立适当的阴阳性对照及重复实验，既可验证LAMP反应的准确性，又可以协助判断扩增系统的可信性。
(9)扩增产物应妥善处理，尽量避免开盖检测，开盖极易产生气溶胶污染。本公司的试剂均采用闭管检测，有效防止污染发生。展开
(2)操作多份样品时，应先配制反应混合液并分装，减少操作，避免污染，同时增加反应的精确度。试剂的配置和分装应在装有紫外灯的超净工作台或负压工作台操作。
(3)移液器和吸头需专用。由于移液器极易受气溶胶或模板核酸的污染，移液器应尽可能使用可替换或可高压处理的，吸头尽可能使用带滤芯的吸头。
(4)防止操作人员污染，使用一次性手套，EP管与吸头应一次性使用，吸头不要长时间暴露于空气中，避免气溶胶的污染。
(5)加样或吸取模板核酸时要十分小心，吸样要缓慢，防止样品进入移液器内；吸样时尽量一次性完成，忌多次抽吸，以免交叉污染或产生气溶胶污染。
(6)EP管打开应先离心，将管壁及管盖上的液体甩至管底部。开管动作要轻，以防管内液体溅出。若不小心溅到手套或桌面上，应立刻更换手套并用稀酸擦拭桌面。
(7)模板核酸应密封保存，防止外溢及外来核酸的进入。
(8)设立适当的阴阳性对照及重复实验，既可验证LAMP反应的准确性，又可以协助判断扩增系统的可信性。
(9)扩增产物应妥善处理，尽量避免开盖检测，开盖极易产生气溶胶污染。本公司的试剂均采用闭管检测，有效防止污染发生。展开
交叉引物恒温扩增技术（CPA）研究进展_爱学术123
qiqishichaoren2021-07-25
实时荧光核酸恒温扩增检测技术在肺结核临床诊断中价值研究123
脆乳2018-01-24
基因扩增技术（PCR）聚合酶链反应（polymerase chain reaction简称PCR）又称无细胞分子克隆系统或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增法，是基因扩增技术的一次重大革新。可将极微量的靶DNA特异地扩增上百万倍，从而大大提高对DNA分子的分析
【分享】欢迎加入环介导的恒温扩增法(LAMP)讨论群70918628 ...123
cxbyunong2021-07-22
欢迎加入环介导的恒温扩增法（LAMP）讨论群70918628
恒温荧光PCR是什么技术 食品微生物检测 食品论坛123
神马3lI2018-01-24
基因扩增技术（PCR）聚合酶链反应（polymerase chain reaction简称PCR）又称无细胞分子克隆系统或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增法，是基因扩增技术的一次重大革新。可将极微量的靶DNA特异地扩增上百万倍，
【原创】一种新的RNA恒温扩增技术SAT技术_问答123
rdbio2010-08-03
技术原理
同一温度下，首先通过M-MLV反转录酶产生靶标核酸（RNA）的一个双链DNA拷贝，然后利用T7RNA多聚酶从该DNA拷贝上产生多个（100～1000个）RNA拷贝；每一个RNA拷贝再从反转录开始进入下一个扩增循环；还可以加入荧光探针（分子信标），带有荧光标记的探针和这些RNA拷贝特异结合，产生荧光。该荧光信号可由实时荧光PCR仪实时捕获，直观反映扩增循环情况。
SAT检测技术的优势
→先进的恒温扩增技术
核酸扩增在一个温度下进行（42℃），无需热循环。
→领先的RNA检测技术
SAT技术直接以病原体特异性RNA为扩增靶标，以扩增产物RNA为检测靶标，在实际应用中更显优势意义。
→更高的检测灵敏度和准确性
SAT技术的扩增效率极高，15～30分钟即可将模板扩增109倍，检测灵敏度和准确性远高于其他核酸检测技术。扩增时间短，效率高。
→有效减少假阴性结果
SAT技术采用M-MLV逆转录酶和T7RNA多聚酶进行核酸扩增，相对于其它核酸扩增技术，反应抑制物更少，有效减少假阴性结果。
→有效的解决了扩增产物的污染问题
由于扩增产物为RNA，环境中极易降解，从而大幅度提高检测结果的可靠性。
→大大降低了核酸扩增实验室的要求
同一温度下，首先通过M-MLV反转录酶产生靶标核酸（RNA）的一个双链DNA拷贝，然后利用T7RNA多聚酶从该DNA拷贝上产生多个（100～1000个）RNA拷贝；每一个RNA拷贝再从反转录开始进入下一个扩增循环；还可以加入荧光探针（分子信标），带有荧光标记的探针和这些RNA拷贝特异结合，产生荧光。该荧光信号可由实时荧光PCR仪实时捕获，直观反映扩增循环情况。
SAT检测技术的优势
→先进的恒温扩增技术
核酸扩增在一个温度下进行（42℃），无需热循环。
→领先的RNA检测技术
SAT技术直接以病原体特异性RNA为扩增靶标，以扩增产物RNA为检测靶标，在实际应用中更显优势意义。
→更高的检测灵敏度和准确性
SAT技术的扩增效率极高，15～30分钟即可将模板扩增109倍，检测灵敏度和准确性远高于其他核酸检测技术。扩增时间短，效率高。
→有效减少假阴性结果
SAT技术采用M-MLV逆转录酶和T7RNA多聚酶进行核酸扩增，相对于其它核酸扩增技术，反应抑制物更少，有效减少假阴性结果。
→有效的解决了扩增产物的污染问题
由于扩增产物为RNA，环境中极易降解，从而大幅度提高检测结果的可靠性。
→大大降低了核酸扩增实验室的要求
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