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全血基因组DNA 提取试剂盒(溶液法)
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实验方法原理

生物半衰期(t1/2)是描述药物在体内消除的重要参数,定义为药物在生物体内消除一半所需要的时间,单位通常为小时(h)。大多数药物遵循一级消除动力学规律(定比消除),其半衰期t1/2为恒定值。多次给药时,通常经过3~5个半衰期达到稳态血药浓度,因此测定半衰期t1/2具有重要的临床意义。实际中,可以通过测定药物血浆浓度,同时结合给药剂量和给药时间,计算半衰期t1/2值。本实验介绍了如何测定水杨酸钠的血浆药物浓度并计算其生物半衰期t1/2值。

水杨酸钠浓度测定原理:水杨酸钠可在酸性条件下生成水杨酸,水杨酸与三氯化铁反应生成一种紫色络合物(图1)。因此通过测定520nm处吸光度值,可计算得到水杨酸钠的浓度。

仪器、耗材
实验步骤
1.麻醉、颈动脉插管 取家兔一只,称重、记录性别,耳缘静脉注射20%乌拉坦5ml/kg麻醉。肝素抗凝后,颈动脉插管,取动脉血备用。

2.留取血样 给药前留取空白动脉血;然后由家兔耳缘静脉注射10%水杨酸钠溶液,2ml/kg。记录给药完毕时间,分别留取注射后0,5,10,20,40min的动脉血样。

3.水杨酸钠血浆浓度的测定

(1)标准曲线制备:将0.05%水杨酸钠标准液倍比稀释为0.05%,0.025%,0.0125%,0.005%浓度的标准液。

(2)测定标准液及不同时间点血样的吸光度值(表23-2)。

(3)计算水杨酸钠浓度:根据标准曲线得到的线性方程,可求得给药后不同时间点(0,5,10,20,40min)时,血浆中水杨酸钠的浓度C0,C5,C10,C20,C40。

4.计算水杨酸钠的生物半衰期t1/2值。利用C0,C5,C10,C20,C40值及给药剂量,可使用作图法、公式法及药代动力学软件等方法计算t1/2值。

Ke为消除速率常数

Co为初始药量

根据药一时曲线求t1/2

按测得的血中水杨酸钠浓度取对数,以对应时间为横坐标,对数浓度为纵坐标作图,在此线上找出血药浓度下降一半的时间,即为该药的血浆半衰期。
注意事项
1.加入10%三氯醋酸后,要立即使用涡旋混合器混匀,防止发生凝固。

2.大多数药物的体内消除过程遵循一级消除动力学规律,药物代谢动力学规律通常使用房室模型进行模拟。其中较为常用的房室模型为双室模型。双室模型包括中央室和周边室,其血药浓度-时间曲线可由分布相(α相)与消除相(β相)组成。
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