免疫组化染色方法(SP法和SABC法)资讯
| 实验方法原理 | SP（streptavidin-perosidase）法，即链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法。SP法是最常使用的方法。 | ||||
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| 试剂、试剂盒 | 二甲苯酒精PBS双氧水枸橼酸缓冲液羊血清工作液辣根过氧化物酶链霉素卵白素苏木素DAB 仪器、耗材 | 冰箱显微镜烧杯玻璃缸 实验步骤 | 1. 烤片：68℃，20min。 2. 常规二甲苯脱蜡，梯度酒精脱水：二甲苯I 20min⇒二甲苯II20min⇒00%酒精10min⇒100%酒精10min⇒95%酒精5min⇒80%酒精5min⇒70%酒精5min。 3. 阻断灭活内源性过氧化物酶：3%H2O2 37℃孵育10min，PBS冲洗3X5min。 4. 抗原修复：置0.01M枸橼酸缓冲液（PH6.0）中用煮沸（95℃，15-20min），自然冷却20min以上，再用冷水冲洗缸子，加快冷却至室温，PBS冲洗3X5min。 5. 正常羊血清工作液封闭，37℃10min，倾去勿洗。 7. 滴加辣根过氧化物酶标记的链霉素卵白素工作液，37℃孵育30min，PBS冲洗3X5min。 8. DAB/H2O2反应染色，自来水充分冲洗后，苏木素复染，常规脱水，透明，干燥，封片。 |
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发布于 ： 2021-07-14
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