Type:Protein
SpeciesReactivity:H
B=Bovine;Ca=Cat;Ch=Chicken;D=Dog;EQ=Equine;GP=GuineaPig;H=Human;M=Mouse;P=Porcine;Pr=Primate;R=Rat;Rb=Rabbit;Y=Yeast;Xe=Xenopus;Ze=Zebrafish;;;;NA-NotApplicable;STP=Step-TactinProteins;AllActivins,membersoftheTGF-betasuperfamily,aredisulfide-linkeddimericproteinsoriginallypurifiedfromgonadalfluidsasproteinsthatstimulatedpituitaryfolliclestimulatinghormone(FSH)release.ActivinproteinshaveawiderangeofBIOLOGicalactivities,includingmesoderminduction,neuralcelldifferentiation,boneremodeling,hematopoiesisandrolesinreproductivephysiology.ActivinisoformsandothermembersoftheTGF-betasuperfamilyexerttheirbiologicaleffectsbybindingtoheteromericcomplexesofatypeIandatypeIIserine-threoninekinasereceptor,bothofwhichareessentialforsignaltransduction.
Activinsarehomodimersorheterodimersofthevariousbetasubunitisoforms,whileinhibinsareheterodimersofauniquealphasubunitandoneofthevariousbetasubunits.Fivebetasubunits(mammalianbetaA,betaB,betaC,betaEandXenopusbetaD)havebeenclonedtodate.Theactivin/inhibinnomenclaturereflectsthesubunitcompositionoftheproteins:ActivinA(betaA-betaA),ActivinB(betaB-betaB),ActivinAB(betaA-betaB),InhibinA(alpha-betaA)andInhibinB(alpha-betaB).
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自噬是一个吞噬自身细胞质蛋白或细胞器并使其包被进入囊泡,并与溶酶体融合形成自噬溶酶体,降解其所包裹的内容物的过程,藉此实现细胞本身的代谢需要和某些细胞器的更新。
原核生物比如大肠杆菌促进增殖药物还不如提供更好的营养条件、足够的环境;抑制类药物如上。
根据细胞种类不同,可能需要不同成分的培养液,来达到促进/抑制的作用
①持续分裂细胞,又称周期性细胞, 即在细胞周期中连续运转的细胞。机体内某些组织需要不断的更新,组成这些组织的细胞就必须通过不断分裂产生新细胞。此类细胞的分裂周期非常正常, 有丝分裂的活性很高。如性细胞(包括卵母细胞和精原细胞),它们要不断地产生配子; 造血干细胞需要不断地产生红细胞和白细胞;上皮基底层细胞需要通过分裂不断补充表面老化死亡的细胞; 植物的根茎尖端细胞需要通过分裂进行生长等都是具有正常周期的持续分裂细胞。
②终端分化细胞, 即永久性失去了分裂能力的细胞,它们不可逆地脱离了细胞周期, 但保持了生理活性机能。这些细胞都是高度特化的细胞, 如哺乳动物的红细胞、神经细胞、多形性白细胞、肌细胞等, 这些细胞一旦分化,就永远保持这种不分裂状态直到死亡。
③G0细胞,又称休眠细胞,暂时脱离细胞周期,不进行DNA复制和分裂, 也称静止细胞群。但这些细胞可在某些条件的诱导下重新开始DNA合成, 进行细胞分裂。如肝细胞, 外科手术切除部分肝组成后可以诱导进入细胞分裂。淋巴细胞可通过与抗原的相互作用诱导增殖。在胚胎发育早期(卵裂期),所有的细胞均为周期性细胞, 以后随着发育成熟, 某些细胞进入了GO期, 某些细胞分化后丧失分裂能力。到成体时,只有少数细胞处于增殖状态, 它们的增殖仅作为补充丢失的细胞, 或对外界刺激的反应。
做一个药物对细胞增殖和迁移的抑制的研究,已知药物对细胞增殖有影响,想要继续做迁移实验,怎么排除药物对细胞的抑制作用对细胞迁移产生的影响?谢谢大家!
细胞增殖是生物体生长、发育、繁殖和遗传的基础。
解析:细胞增殖是重要的细胞生命特征。
1,一个孔中应接种多少个细胞?
当使用标准96孔板时,贴壁细胞的最小接种量至少为1,000个/孔(100μl培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低,因此推荐接种量不低于2,500个/孔(100μl培养基)。如果要使用24孔板或6孔板实验,请先计算每孔相应的接种量,并按照每孔培养基总体积的10%加入CCK-8溶液。
能否用384孔板进行试验?
2,可以。向各孔中加入培养基体积10%的CCK-8溶液,如果加入的CCK-8体积太少,可以先将CCK-8溶液稀释1倍,然后加入培养基体积20%的量。
3,能否用24孔板进行试验?
可以。向各孔中加入培养基体积10%的CCK-8溶液。
4,酚红会影响检测吗?
不会。培养基中酚红的吸光度可以在计算时,通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去,因此不会对检测造成影响。
5,CCK-8与胸苷结合检测之间是否有相关性?
有。然而,请注意由于CCK-8使用的检测原理与胸苷检测的不同,因此结果可能不同。
6,CCK-8能否检测细菌细胞?
可以检测E.coli,但不能检测酵母细胞。向100μlE.coli培养液中加入10μlCCK-8溶液,并培养1-4个小时或过夜。
7,CCK-8稳定吗?
CCK-8在0-5℃下能够保存至少6个月,在-20℃下避光可以保存1年。如果需要长期保存,我们推荐-20℃的储藏条件。
8,如果没有450nm的滤光片,还可以使用哪些其他滤光片?
还可使用450nm到490nm之间的滤光片。
9,如何减少由于CCK-8试剂在枪头上或孔壁上的残留所带来的误差?
可以在加样前用培养基稀释CCK-8试剂并混匀后加样。
10,CCK-8是什么颜色?
应该是粉红色。若颜色不一样,有可能会影响测定。
以上内容来自英格恩生物CCK8试剂盒
自我复制也叫"自体复制"(self-duplication).生物体内通过代谢作用,按照原有结构复制成为完全相同的结构的生物合成过程.例如脱氧核糖核酸(DNA)在生物体内以原有的DNA分子为模板,合成两个完全相同的DNA分子的过程.
细胞分裂(cell division)是指活细胞增殖其数量由一个细胞分裂为两个细胞的过程。分裂前的细胞称母细胞,分裂后形成的新细胞称子细胞。通常包括细胞核分裂和细胞质分裂两步。在核分裂过程中母细胞把遗传物质传给子细胞。
由结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuberculosis,Mtb)引起的结核病是一种古老的慢性传染病,并且至今仍是全球死亡人数最多的单一传染病。据世界卫生组织(WHO)报道:2015年全球有1040万新发结核病患者,有180万人死于结核病。Mtb是一种胞内病原菌,可分泌多种效应蛋白至宿主细胞中,进而干扰细胞信号通路和生物学功能,最终促进病原菌在宿主细胞中的存活并导致宿主细胞病变。中国科学院微生物研究所刘翠华课题组长期致力于研究Mtb等重要病原菌与宿主相互作用的分子机制,近年来先后在NatureImmunology,TheJournalofImmunology等杂志发表系列研究工作,发现了Mtb通过分泌一系列效应蛋白调控宿主细胞功能进而逃逸宿主固有免疫清除的新机制,并揭示了病原菌与宿主间相互博弈的动态过程及分子机制,为抗结核药物研发提供了新思路和特异靶点。
近年来,越来越多的研究表明病原微生物(包括多种病毒和细菌等)感染引起的慢性炎症可增加肿瘤发生发展的危险性,有关感染相关的慢性炎症诱发肿瘤的分子机制研究已成为当前生物医学领域的热点之一。然而,Mtb导致的慢性感染与肺癌的相关性至今尚无定论,关于Mtb效应蛋白在肿瘤发生发展中的分子调控机制更是知之甚少。刘翠华课题组之前的研究表明:Mtb效应蛋白PtpA(一种真核样酪氨酸磷酸酶)可被分泌至宿主细胞中结合泛素分子并被后者激活,进而去磷酸化宿主的p-JNK和p-p38并抑制JNK/p38信号通路的激活;同时PtpA还能以磷酸酶活性非依赖性的方式抑制NF-κB信号通路的激活(NatureImmunology,2015)。进一步的研究发现PtpA的宿主互作蛋白TRIM27(一种泛素连接酶)可作为宿主限制因子抑制分枝杆菌在巨噬细胞内的存活,而PtpA则可通过结合TRIM27蛋白的RING结构域而拮抗TRIM27介导的抗病原菌感染免疫功能(ScientificReports,2016)。最近,该课题组又发现PtpA不仅可在宿主细胞质中调控固有免疫信号通路,还可进入宿主细胞核内(图1)。ChIP-seq分析结果提示:PtpA在宿主细胞核内可调控一系列宿主基因的表达,这些基因主要涉及免疫调控(如TNFRSF8)以及细胞增殖和迁移(如GADD45A)等生物学功能。进一步研究发现PtpA可直接结合至GADD45A基因的启动子区并抑制该基因的转录,并进而促进人非小细胞肺癌A549细胞的增殖和迁移能力及其在裸鼠中的成瘤能力,且该调控功能依赖于PtpA的DNA结合能力而不依赖于其磷酸酶活性。此外,受PtpA调控的宿主细胞核内的潜在靶基因中还包括某些与肿瘤发生发展密切相关的非编码RNA基因(如miR-488、CASC2和miR-622)(图2)。该研究发现了首个可进入宿主细胞核内调控宿主免疫及细胞增殖功能的Mtb效应蛋白PtpA,揭示了Mtb可通过其分泌的效应蛋白在特定情况下促进肺癌发生发展的分子机制。
相关结果已在国际权威期刊NatureCommunications《自然通讯》在线发表,题为“ThemycobacterialphosphatasePtpAregulatestheexpressionofhostgenesandpromotescellproliferation”。刘翠华课题组的助理研究员汪静、研究生葛浦浦为该文章的共同第一作者,刘翠华研究员为该文的通讯作者。该研究得到了国家科技部、国家自然科学基金委、北京市自然科学基金委和中科院的资助。
文章链接:http://www.nature.com/articles/s41467-017-00279-z.pdf
图1.MtbPtpA可进入宿主细胞核内
图2.宿主细胞核内的MtbPtpA抑制固有免疫功能并促进肿瘤细胞增殖的机制示意图