请问用RNAi干扰抗凋亡基因的表达能否筛选出稳定转然的克隆？
2021-08-27
问题描述：
我想用RNAi干扰的基因具有抑制凋亡的功能。
昨天看了一篇文章，用antisense阻断BMP2（具有抑制凋亡的作用）的表达，不能筛选出稳定转然的克隆，因为发生了细胞凋亡。所以现在很迷茫，请各位老师帮忙！
谢谢！
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liven
用户
再详细一点吧，否则很难帮到你的！我的专业里BMP2指骨形态发生蛋白2，再说了抗凋亡基因的knockdown效应应该是凋亡呀，做梯度转染观察凋亡就可以了，筛稳定克隆做什么？非要做的话，就用诱导型RNAi表达载体，可以在诱导前筛稳定克隆。
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sunyy1976
用户多谢liven老师！其实我不做BMP2，文献上说它是TGF-B超家族的成员之一，与细胞凋亡有关。筛选稳定克隆我想看看它与其它基因或蛋白的关系。请问什么是诱导型RNAi表达载体？谢谢！
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liven
用户好像现在有TetOn型的RNAi载体，用GOOGLE查查看！
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victoh
用户sunyy1976我想用RNAi干扰的基因具有抑制凋亡的功能。昨天看了一篇文章，用antisense阻断BMP2（具有抑制凋亡的作用）的表达，不能筛选出稳定转然的克隆，因为发生了细胞凋亡。所以现在很迷茫，请各位老师帮忙！谢谢！能否提供该文,学习学习!!
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sunyy1976
用户我不会上传文章，就先发送到victoh的信箱。不好意思，我写得有错误，不是用的antsense,是转染的点突变的BMP2的质粒。
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victoh
用户收到了,谢谢!可以帮你上传吗?
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sunyy1976
用户可以，谢谢！liven老师，我听说tet挺难做的，我想问一下哪个公司的siRNA表达载体比较好用，转染哺乳动物细胞的。谢谢！
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victoh
用户sunyy1976可以，谢谢!BMP1Bapoptosis.part1.rar(390.63k)
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victoh
用户2Pt2BMP1Bapoptosis.part2.rar(296.63k)
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liven
用户Teton的PolIII的表达载体出现于2000年的humangenetherapy，去年又出现了几篇文献，难道大家都没有注意吗？使用PolII启动子可以达到组织特异性，已经有文献报道使用PolII启动子引导siRNA表达获得了满意的结果。
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happy_qiu
用户liven主任：能否将关于使用PolII启动子引导siRNA表达和Teton的PolIII的表达载体的文章发到我的邮箱happy_qiu@yeah.net或告知文章在哪个期刊，哪卷哪期第几页，谢谢！
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