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Excellgen/HiFi ÄQStartTM Taq DNA Polymerase/EG-1018/250 Units
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| Description | HiFiÄQStartTMTaqDNApolymeraseisanenzymemixtureofrecombinantTaqDNApolymerasepreparation,athermalstableDNApolymerasewith3’→5’exonucleaseactivity,andmonoclonalantibodiesthatbindtothepolymeraseandkeepitinactivepriortoPCRthermalcycling.Uponheatactivation(1minuteat94°C),theantibodiesdenatureirreversIBLy,releasingfullyactive,unmodifiedTaqDNApolymerase.Thisenablesspecificandefficientprimerextensionwiththeconvenienceofroomtemperaturereactionassembly.ThisenzymemixtureandoptimizedHiFiPCRbufferenablesupto6foldhigherfidelitythanTaqDNApolymeraseandallowsamplificationofDNAfragmentsupto20-kb. |
| Applications | RoutinePCRamplificationofupto20kbDNAfragmentfollowedbycloningoftheamplifiedfragment. |
| Features |
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| Components |
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| Storage | HiFiÄQStartTMTaqDNApolymeraseisstablefor2yearswhenstoredinaconstanttemperaturefreezerat-20°C. |
| Shipping | 4°C |
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ebiomall.com
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蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
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2021-08-17
对应于 mRNA 的 DNA 序列，可以被回收、克隆、测序，可以用作杂交或筛库的探针。 查看更多
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2021-08-10
反转录 PCR ( reversetranscriptase'PCR，RT-PCR ) 是一种从 RNA 扩增 cDNA 拷贝的方法。RT-PCR 对于获得与克隆 mRNA 的5'、3' 末端序列和从非常少量的 mRNA 样品构建大容量的 cDNA 文库方面都是极为灵敏与通用的方法。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。 查看更多
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2018-12-26
生化方法l 磷酸钙介导的质粒DNA转染真核细胞1. 转染前24 h，通过胰酶消化收集细胞，用适当的完全培养基以1×105至4×105细胞/cm2的密度平铺细胞于60 mm组织培养皿或12孔板上。于含5%～7% CO2的37℃温箱孵育20～24 h。转染前1 h换液。2. 按照下属方法制备磷酸钙-DNA沉淀：于5 ml 查看更多
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2021-09-06
聚合酶链式反应（polymerase chain reaction, PCR）是一种体外核酸扩增系统，是分子克隆技术中的常用技术之一。PCR具有反应快速、灵敏、操作简便等优点，已广泛应用于分子生物学的各个领域。实验目的是掌握PCR原理，学习PCR操作过程 查看更多
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2021-08-31
本方案基于一种 DNA 测序反应，该反应测定紧邻测序引物（在方案中称为 SNP 引物）3'端的一个碱基的性质。SNP 引物设计成可以紧邻于待分型 DNA 的多态位点上游夏性。当目的 DNA 和合适的经染料标记的终止分子（terminator) 以及 DNA 聚合酶温育时，在多态位点出现的等位碱基的互补碱基使 SNP 引物延伸。通过检测组装的终止分子类别，就能推知目的 DNA 上出现的等位碱基 查看更多
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2021-09-18
父子关系的分子分析实验的相关实验步骤、实验技巧、实验protocol、实验经验及常见问题。 查看更多
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2021-07-26
原位PCR是原位杂交细胞定位和PCR的高灵敏度相结合的技术，使得靶基因检测有了极大的改进。此技术是在细胞（爬片、甩片或涂片）或组织（石蜡、冰冻切片）上直接对靶基因片段进行扩增，通过掺入标记基团直接显色或结合原位杂交进行检测的方法。 查看更多
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2021-07-19
无缝克隆（Seamless Cloning/In-Fusion Cloning），区别于传统PCR产物克隆，唯一的差异在于载体末端和引物末端应具有15-20个同源碱基，由此得到的PCR产物两端便分别带上了15-20个与载体序列同源性的碱基，依靠碱基间作用力互补配对成环，无需酶连即可直接用于转化宿主菌，进入宿主菌中的线性质粒（环状）... 查看更多
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2018-12-26
The following protocol is designed for subcloning inserts (I) from one vector into another vector (V). The inserts can be anywhere from 30 bp to 8 kb (possibly 查看更多
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2018-11-27
ImmunoChemistry Technologies公司产品介绍【代理商代购现货】 查看更多
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2018-08-06
在该方案中，用限制性内切酶的混合物处理人类基因组 DNA(内切酶混合物的识别位点为 4bp)，产生大概 50〜500bp 的片段。最终使用这一类型的表达文库，是通过利用表型的和生化的筛选方法，分离编码功能多肽或蛋白片段的基因片段。用KlenowDNA 聚合酶处理后，基因组 DNA 片段成为平末端，然后连接到 Pml Ⅰ (—个可以产生平端产物的酶）线性化的载体上，再转化细菌，扩增得到文库。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。 查看更多
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2018-12-26
原核细胞l 用IPTG诱导启动子在大肠杆菌中表达克隆化基因含重组表达载体的大肠杆菌菌株的构建1. PCR修饰或限制性内切酶消化分离DNA片段，片段5’端和3’端带有与IPTG诱导表达载体对应的限制酶位点。2. 含靶cDNA/基因的DNA片段与表达载体连接。3. 重组质粒转化有lacIq 等位基因的大肠杆菌菌株。如果质 查看更多
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EST序列的基因克隆 123
颜魅家族Gj2021-08-15
利用计算机协助克隆基称电基克隆（sillcon cloning）与定位克隆、定位候选克隆策略并列即采用物信息延伸EST序列获基部乃至全cDNA序列EST数据库迅速扩张已经并继续导致识别与克隆新基策略发革命性变化
4.1
EST序列获取
利用计算机协助克隆第步必须获兴趣ESTdbEST数据库找EST途径寻找同源序列标准：度≥100bp同源性50%、85%通数万维网界使用BLAST检索程度实现其用NCBI（National Center for Biotechnology Information）GenBank、意利TigemESTmachine（包括EST提取者EST组装机器）、THC（Tentative Human Consensus Sequences）数据库、ESTBlast检索程序——通英类基组作图项目资源（Human Genome Mapping Project Resource CenterHGMP—RC）服务器访问检序列组装重叠群（contig）重叠群检序列重复进行BLAST检索与序列组装延伸重叠系列重复程直没更重叠EST检或者说重叠群序列能继续延伸获全基编码序列获些EST序列数据再与GeneBank核酸数据库进行相似性检测假凤精确匹配基EST序列数据据EST六种阅读框翻译蛋白质接着与蛋白质序列数据库进行比较析基析结致三种：第已知基研究象类已鉴定解基；第二前未经鉴定新基；第三未知基部基间同种或异种基匹配新基未知基进步用于物研究
4.2
基电定位
基电定位采用NCBI电PCR程序进行检索寻找EST序列否存序列标签位点（sequence tagged sites,STS）STS作基组单拷贝序列新代遗传标记系统其数目覆盖密度较达平均每1kbSTS或更密集寻找STS与相应染色体相比较即序列定位该染色体
4.3
IMAGE克隆索取
许ESTs所应cDNA克隆通基组及其表达整合析（intergrated molecular analysis of genomes and their expressionIMAGE）协定免疫索取与电基克隆相辅相IMAGE协定由美LLNL家实验室主持宗旨共享排列cDNA文库克隆重规模EST测序项目Merk&Cow公司投资类ESTs项目等都加入IMAGE协定研究者通另外途径基部序列并通同源性检索发现该片段与加入IMAGE协定EST序列高度同源便免费索取其原始克隆通美ATCC组织（American Type Culture Collection）索取避免或减轻筛选全基麻烦集精力进行基功能研究图" class="ikqb_img_alink">
4.1
EST序列获取
利用计算机协助克隆第步必须获兴趣ESTdbEST数据库找EST途径寻找同源序列标准：度≥100bp同源性50%、85%通数万维网界使用BLAST检索程度实现其用NCBI（National Center for Biotechnology Information）GenBank、意利TigemESTmachine（包括EST提取者EST组装机器）、THC（Tentative Human Consensus Sequences）数据库、ESTBlast检索程序——通英类基组作图项目资源（Human Genome Mapping Project Resource CenterHGMP—RC）服务器访问检序列组装重叠群（contig）重叠群检序列重复进行BLAST检索与序列组装延伸重叠系列重复程直没更重叠EST检或者说重叠群序列能继续延伸获全基编码序列获些EST序列数据再与GeneBank核酸数据库进行相似性检测假凤精确匹配基EST序列数据据EST六种阅读框翻译蛋白质接着与蛋白质序列数据库进行比较析基析结致三种：第已知基研究象类已鉴定解基；第二前未经鉴定新基；第三未知基部基间同种或异种基匹配新基未知基进步用于物研究
4.2
基电定位
基电定位采用NCBI电PCR程序进行检索寻找EST序列否存序列标签位点（sequence tagged sites,STS）STS作基组单拷贝序列新代遗传标记系统其数目覆盖密度较达平均每1kbSTS或更密集寻找STS与相应染色体相比较即序列定位该染色体
4.3
IMAGE克隆索取
许ESTs所应cDNA克隆通基组及其表达整合析（intergrated molecular analysis of genomes and their expressionIMAGE）协定免疫索取与电基克隆相辅相IMAGE协定由美LLNL家实验室主持宗旨共享排列cDNA文库克隆重规模EST测序项目Merk&Cow公司投资类ESTs项目等都加入IMAGE协定研究者通另外途径基部序列并通同源性检索发现该片段与加入IMAGE协定EST序列高度同源便免费索取其原始克隆通美ATCC组织（American Type Culture Collection）索取避免或减轻筛选全基麻烦集精力进行基功能研究图" class="ikqb_img_alink">
启动子的克隆和研究方法123
天生我才2021-08-06
我想得到水稻一个基因的启动子序列，只知道基因序列，不知道启动子的序列，想的到启动子序列，各位大侠帮帮忙。先谢谢了。
WB试验常见问题解答123
yawenjilin2021-07-28
我现在要用bac克隆自己标记成探针做人类染色体水平的fish，以确定染色体的具体断裂位置。
现在已经把bac克隆的质粒DNA提取出来了，但是在标记探针前，有以下几个疑问：
1：提取出的质粒DNA是否需要通过测序等方法进行验证该克隆的准确性？
2：是否需要把bac克隆的DNA从载体上酶切下来？如果酶切，UCSC数据库中提供的两侧序列末端的酶切位点就是吗？如果不用酶切，那载体片断在探针标记时会不会一同标记上从而影响后续试验结果？
3：在探针标记前，酶切或不酶切得到的bac克隆DNA是否需要进一步纯化？用普通的琼脂糖电泳切胶回收纯化就可以吗？那所用的切胶回收试剂盒应该是哪种的呀？
4：像我这种自己标记好探针，在作fish时，有现成的试剂盒吗？
第一次做fish，有好多不是很清楚的地方，查阅大量文献中也只是提供其中几个关键步骤，希望有经验的朋友提供宝贵意见，给与指导。
非常感谢！！！
现在已经把bac克隆的质粒DNA提取出来了，但是在标记探针前，有以下几个疑问：
1：提取出的质粒DNA是否需要通过测序等方法进行验证该克隆的准确性？
2：是否需要把bac克隆的DNA从载体上酶切下来？如果酶切，UCSC数据库中提供的两侧序列末端的酶切位点就是吗？如果不用酶切，那载体片断在探针标记时会不会一同标记上从而影响后续试验结果？
3：在探针标记前，酶切或不酶切得到的bac克隆DNA是否需要进一步纯化？用普通的琼脂糖电泳切胶回收纯化就可以吗？那所用的切胶回收试剂盒应该是哪种的呀？
4：像我这种自己标记好探针，在作fish时，有现成的试剂盒吗？
第一次做fish，有好多不是很清楚的地方，查阅大量文献中也只是提供其中几个关键步骤，希望有经验的朋友提供宝贵意见，给与指导。
非常感谢！！！
【求助】克隆基因要转到真核作表达,模板的选择问题, ,希望大家多多...123
无双蛛蛛2021-08-30
大家好，小人是一只小小菜鸟，做实验遇到了很大的问题，希望大家伸出友爱之手，帮帮痛苦中的我
我要克隆一个基因，这个基因有3个外显子，然后和质粒相连，重组载体，转到真核细胞中做表达，我用基因组DNA做模板，请问这么做可以吗，有人做过类似的实验吗？
请大家帮帮忙，本人毕业在即，谢谢大家
我要克隆一个基因，这个基因有3个外显子，然后和质粒相连，重组载体，转到真核细胞中做表达，我用基因组DNA做模板，请问这么做可以吗，有人做过类似的实验吗？
请大家帮帮忙，本人毕业在即，谢谢大家
克隆给人类带来的坏处有哪些最好不少于10条.我是要开辩论会,需要...123
10426729322021-07-21
少于10条．我要辩论需要些资料我反．给我答案详细点．谢谢
编码DNA结合蛋白的cDNA克隆的检测、纯化和鉴定实验 实验方法 ...123
小锋4912021-08-29
难需要看蛋白纯化工艺DNA处理
举例言目前家药典条宿主DNA残留检测
举例言目前家药典条宿主DNA残留检测
功能基因的克隆及生物信息学分析123
牛阿乾afFB392021-07-24
基克隆70代发展起项具革命性研究技术概括∶、切、连、转、选终目于通相应技术手段目基导入寄主细胞宿主细胞内目基量复制
"切"指用序列特异限制性内切酶切载体DNA或者切目基；"连"指用DNA连接酶目DNA同载体DNA连接起形重组DNA；"转"指通特殊重组DNA送入宿主细胞进行复制扩增；"选"则宿主群体挑选携带重组DNA体基工程技术两基本特点水平操作细胞水平表达水平操作即体外重组程实际利用工具酶DNA进行"外科手术"
"切"指用序列特异限制性内切酶切载体DNA或者切目基；"连"指用DNA连接酶目DNA同载体DNA连接起形重组DNA；"转"指通特殊重组DNA送入宿主细胞进行复制扩增；"选"则宿主群体挑选携带重组DNA体基工程技术两基本特点水平操作细胞水平表达水平操作即体外重组程实际利用工具酶DNA进行"外科手术"
【求助/交流】求助基因克隆方面的问题解决方案 微生物 综合其他 ...123
kflame1232008-03-31
我想克隆山羊的一个基因，可是在NCBI上只找到小鼠的序列，请教一下大家该怎么做，尽量说的详细一点，谢谢了
克隆新基因(cDNA)的几种常用方法123
2021-08-10
何鉴定克隆新基调亡相关基
快速克隆基因(一) | | 百迈客生物123
林夕妮儿2021-08-18
怎样用一段基因和基因组的序列进行比对呢? 分子生物 生物信息 ...123
艹你犸c762017-10-01
tair网站
【求助】如何克隆启动子 经验共享 123
drcrc2021-08-24
打算克隆某个基因的启动子，基因5‘端上游基因组序列，在pubmed里能查到。
是不是只要从细胞里面提取基因组DNA,然后按照pubmed上的5端上游序列做一个PCR就可以了？
是不是只要从细胞里面提取基因组DNA,然后按照pubmed上的5端上游序列做一个PCR就可以了？
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