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Phoenix Phamaceuticals/ABCB6 Protein (260-301) (Human) - Purified IgG Antibody/100 μg/G-006-23A
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2021-08-26
本方法成功的关键是模板 DNA 的纯度。琼脂糖、盐和蛋白质的污染都会导致 DNA 聚合酶的提前终止或暂停，而 DNA 和 RNA 降解所产生的寡核苷酸将造成引物错配。这些污染会严重导致假阳性条带或空白出现。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。 查看更多
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2021-09-02
端粒是真核生物染色体末端的特异DNA-蛋白结构，端粒DNA是一系列重复的富含G的DNA序列，这一序列在生物进化中有高度的保守性（人重复序列为TTAGGG）。已确认端粒在保护基因组DNA不被降解、防止染色体有害的结合（如染色体末端融合、重排、染色体移位和染色体缺失）中起重要作用。 查看更多
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2021-09-20
本方案设计为 24 个 PCR 反应，使用 3 种 cDNA 亚群（利用方案 3 中的 H-T11M 引物进行 RT 反应），引物为荧光染料标记的锚定引物（FH-T11M) 与 24 种上游任意引物 (HAP) 的组合。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。 查看更多
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2018-08-06
使用合成的寡核苷酸构建文库时，PCR 有两个重要的作用。第一，用与特定侧翼序列退火的引物来扩增文库，仅用少量的不同模板，就可以得到大量的 PCR 产物。第二，若要产生文库 DNA 的复杂互补链，PCR 合成法是有效的方法。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。 查看更多
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2018-08-06
该方案中，用 PCR 分析由质粒载体编码的随机多肽文库。该文库是由连接反应的产物转化细菌后得到的，方案 2 已经介绍过，然后再用标准的程序对质粒进行扩增和纯化。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。 查看更多
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2018-11-28
Athena Enzyme Systems公司产品介绍【代理商代购现货】 查看更多
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2021-07-21
PCR扩增产物的克隆可以：（1）获得目的DNA片段；（2）用于原核表达的研究；（3）广泛应用于分子生物学相关研究。 查看更多
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2018-12-26
The following protocol is designed for subcloning inserts (I) from one vector into another vector (V). The inserts can be anywhere from 30 bp to 8 kb (possibly 查看更多
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2018-08-06
在该方案中，用限制性内切酶的混合物处理人类基因组 DNA(内切酶混合物的识别位点为 4bp)，产生大概 50〜500bp 的片段。最终使用这一类型的表达文库，是通过利用表型的和生化的筛选方法，分离编码功能多肽或蛋白片段的基因片段。用KlenowDNA 聚合酶处理后，基因组 DNA 片段成为平末端，然后连接到 Pml Ⅰ (—个可以产生平端产物的酶）线性化的载体上，再转化细菌，扩增得到文库。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。 查看更多
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2021-08-17
对应于 mRNA 的 DNA 序列，可以被回收、克隆、测序，可以用作杂交或筛库的探针。 查看更多
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2021-07-22
PCR扩增产物的克隆可以：（1）获得目的DNA片段；（2）用于原核表达的研究；（3）广泛应用于分子生物学相关研究。 查看更多
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2021-07-26
原位PCR是原位杂交细胞定位和PCR的高灵敏度相结合的技术，使得靶基因检测有了极大的改进。此技术是在细胞（爬片、甩片或涂片）或组织（石蜡、冰冻切片）上直接对靶基因片段进行扩增，通过掺入标记基团直接显色或结合原位杂交进行检测的方法。 查看更多
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【求助】如何克隆启动子 经验共享 123
drcrc2021-08-24
打算克隆某个基因的启动子，基因5‘端上游基因组序列，在pubmed里能查到。
是不是只要从细胞里面提取基因组DNA,然后按照pubmed上的5端上游序列做一个PCR就可以了？
是不是只要从细胞里面提取基因组DNA,然后按照pubmed上的5端上游序列做一个PCR就可以了？
cDNA文库与基因组文库有什么不同_123
忻忻相惜3462021-08-26
基因组DNA文库含有一种生物的全部基因，从基因组文库中获得的基因是完整的
cDNA文库含有一种生物的部分基因，cDNA本质就是外显子
基因组文库大，其中基因含有启动子和内含子
cDNA文库小，没有内含子和启动子
cDNA文库含有一种生物的部分基因，cDNA本质就是外显子
基因组文库大，其中基因含有启动子和内含子
cDNA文库小，没有内含子和启动子
关于病毒在宿主细胞内的复制过程,正确的描述是中华考试网123
2021-08-04
病毒通常由具有蛋白质外壳的遗传物质组成，它通过穿透细胞膜并向细胞释放大量的病毒遗传物质而感染细胞。利用宿主细胞上特定的膜上病毒输送蛋白，进入感染的宿主细胞，向细胞释放大量的病毒遗传物质而感染细胞。由于细胞为无性体，因此它们依赖复制蛋白质或宿主细胞的“机体”来复制自己的DNA物质。从而篡夺细胞功能为其服务。其结果或使细胞死亡。病毒控制细胞。或着产生变异。正常细胞的蛋白质合成，细胞分裂是受结构基因、基因的调节系统所控制的。由于控制细胞增殖的结构基因发生突变，调节系统对它失去控制，结果就会造成细胞无限的增殖。如果是有关的调节基因发生了突变，它不再能产生有效的阻遏物质，控制增殖的结构基因的转录和翻译就会不断地进行，结果也将导致细胞的无限增殖。细胞发生变异。从而导致细胞癌变。
荧光原位杂交（FISH）操作方法123
bachongwang792021-07-20
各位老师好！！
我现在做的课题研究的是肾脏肿瘤。其中有实验涉及到FISH。咨询和查阅过相关文献和公司，一个染色体荧光探针的价格贵的惊人（动不动近万），做过这方面实验的老师，情况是这样的吗？
我要做的是在石蜡切片上进行FISH实验，操作难度是不是很大？有没有公司可以帮助完成此类实验呢？
请知道的老师给我帮助，谢谢！！
我现在做的课题研究的是肾脏肿瘤。其中有实验涉及到FISH。咨询和查阅过相关文献和公司，一个染色体荧光探针的价格贵的惊人（动不动近万），做过这方面实验的老师，情况是这样的吗？
我要做的是在石蜡切片上进行FISH实验，操作难度是不是很大？有没有公司可以帮助完成此类实验呢？
请知道的老师给我帮助，谢谢！！
网传“猪坚强”已入弥留!比克隆体都活得久的它,是如何成为生命的...123
易利仁一2021-08-11
基克隆即重组DNA技术,指体外DNA按照既定目案,采用酶同源DNA体外剪切重新连接,组装新DNA.基础,DNA导入定宿主细胞,使能够宿主细胞扩增,形量代,程即称基克隆.基克隆包括四基本技术环节:
DNA拓扑异构酶概述123
0864181662017-11-07
依托泊苷，抑制有丝分裂，属于细胞周期特异性药物，使细胞分裂停止于S期或G2期，此方案应先用VP-16，后顺铂:VP-16的作用靶点是DNA拓扑异构酶Ⅱ。顺铂属于细胞周期非特异性药物
乙型脑炎减毒活疫苗株全长感染性克隆的构建及表达外源基因的初步研...123
hubing007hb2011-09-03
各位大侠：
大家好，小弟最近做做乙脑病毒（JEV）全长感染性克隆，实验遇到一些问题，希望得到园子里面高手的指点。乙脑为单股正链RNA病毒，病毒基因组全长约为11kb，小弟以takarapMD19-TsimpleT载体（该载体来源PUC载体系列，含有PUCori，2700bp）为模板，为了克隆乙脑全长CDNA，将JEV全长基因组分四段进行RT-PCR扩增，得到JEV-A（2.2kb）,JEV-B（3.5kb）,JEV-C（3.3kb）,JEV-D（1.9kb）四个片段，JEV-***段5.端加上了T7启动子为后面进行体外转录用，在克隆前对宝生物的pMD19-TsimpleT载体进行了改造，连了一段linker序列（500bp左右），该序列中含有克隆JEV四段序列的单一酶切位点（克隆过程中的酶切位点均为常见酶，排除未切开的可能性，而且每次酶切均发现有小片段被切下）。采用分四段分部克隆的策略将乙脑病毒全长基因组连上改造后的载体。JEV-A很顺利一次连上，再连JEV-D也很顺利也一次连上，再连JEV-C，连了很多次，用了TAKARAT4，solutionI和NEB的连接酶均为能连上，也调整了DNA和载体的比例均未能连上，是不是PUC系列载体容量有限，装不下太大的片段，载体上连上的片段加起来越大了往上面再连就越困难。问了宝生物的客服说PUC载体最大能容下18kb的片段。之前也将JEV基因组分两段进行克隆，每段5000多bp，连了很多次一段都没连上去，故将全长DNA分四段，想每次往上面连一部分，每连上一段载体相当于变成了一个新载体，载体大小也变大了，能插入的片段也会相应变大。另外，实验室另一个学生拿pbluescriptsk载体（3.0kb）来连，采用类似的克隆策略均为连上，大家觉得是什么原因，是不是得换载体，换大载体，我查了很多别人也有拿pbluescriptsk载体建其他病毒感染性克隆的也能连上（都是连10kb以上的片段），到底是哪个环节出问题已经做了一个暑假2个多月均未得到克隆，急死了，请大家给点高见。
大家好，小弟最近做做乙脑病毒（JEV）全长感染性克隆，实验遇到一些问题，希望得到园子里面高手的指点。乙脑为单股正链RNA病毒，病毒基因组全长约为11kb，小弟以takarapMD19-TsimpleT载体（该载体来源PUC载体系列，含有PUCori，2700bp）为模板，为了克隆乙脑全长CDNA，将JEV全长基因组分四段进行RT-PCR扩增，得到JEV-A（2.2kb）,JEV-B（3.5kb）,JEV-C（3.3kb）,JEV-D（1.9kb）四个片段，JEV-***段5.端加上了T7启动子为后面进行体外转录用，在克隆前对宝生物的pMD19-TsimpleT载体进行了改造，连了一段linker序列（500bp左右），该序列中含有克隆JEV四段序列的单一酶切位点（克隆过程中的酶切位点均为常见酶，排除未切开的可能性，而且每次酶切均发现有小片段被切下）。采用分四段分部克隆的策略将乙脑病毒全长基因组连上改造后的载体。JEV-A很顺利一次连上，再连JEV-D也很顺利也一次连上，再连JEV-C，连了很多次，用了TAKARAT4，solutionI和NEB的连接酶均为能连上，也调整了DNA和载体的比例均未能连上，是不是PUC系列载体容量有限，装不下太大的片段，载体上连上的片段加起来越大了往上面再连就越困难。问了宝生物的客服说PUC载体最大能容下18kb的片段。之前也将JEV基因组分两段进行克隆，每段5000多bp，连了很多次一段都没连上去，故将全长DNA分四段，想每次往上面连一部分，每连上一段载体相当于变成了一个新载体，载体大小也变大了，能插入的片段也会相应变大。另外，实验室另一个学生拿pbluescriptsk载体（3.0kb）来连，采用类似的克隆策略均为连上，大家觉得是什么原因，是不是得换载体，换大载体，我查了很多别人也有拿pbluescriptsk载体建其他病毒感染性克隆的也能连上（都是连10kb以上的片段），到底是哪个环节出问题已经做了一个暑假2个多月均未得到克隆，急死了，请大家给点高见。
EST序列的基因克隆 123
颜魅家族Gj2021-08-15
利用计算机协助克隆基称电基克隆（sillcon cloning）与定位克隆、定位候选克隆策略并列即采用物信息延伸EST序列获基部乃至全cDNA序列EST数据库迅速扩张已经并继续导致识别与克隆新基策略发革命性变化
4.1
EST序列获取
利用计算机协助克隆第步必须获兴趣ESTdbEST数据库找EST途径寻找同源序列标准：度≥100bp同源性50%、85%通数万维网界使用BLAST检索程度实现其用NCBI（National Center for Biotechnology Information）GenBank、意利TigemESTmachine（包括EST提取者EST组装机器）、THC（Tentative Human Consensus Sequences）数据库、ESTBlast检索程序——通英类基组作图项目资源（Human Genome Mapping Project Resource CenterHGMP—RC）服务器访问检序列组装重叠群（contig）重叠群检序列重复进行BLAST检索与序列组装延伸重叠系列重复程直没更重叠EST检或者说重叠群序列能继续延伸获全基编码序列获些EST序列数据再与GeneBank核酸数据库进行相似性检测假凤精确匹配基EST序列数据据EST六种阅读框翻译蛋白质接着与蛋白质序列数据库进行比较析基析结致三种：第已知基研究象类已鉴定解基；第二前未经鉴定新基；第三未知基部基间同种或异种基匹配新基未知基进步用于物研究
4.2
基电定位
基电定位采用NCBI电PCR程序进行检索寻找EST序列否存序列标签位点（sequence tagged sites,STS）STS作基组单拷贝序列新代遗传标记系统其数目覆盖密度较达平均每1kbSTS或更密集寻找STS与相应染色体相比较即序列定位该染色体
4.3
IMAGE克隆索取
许ESTs所应cDNA克隆通基组及其表达整合析（intergrated molecular analysis of genomes and their expressionIMAGE）协定免疫索取与电基克隆相辅相IMAGE协定由美LLNL家实验室主持宗旨共享排列cDNA文库克隆重规模EST测序项目Merk&Cow公司投资类ESTs项目等都加入IMAGE协定研究者通另外途径基部序列并通同源性检索发现该片段与加入IMAGE协定EST序列高度同源便免费索取其原始克隆通美ATCC组织（American Type Culture Collection）索取避免或减轻筛选全基麻烦集精力进行基功能研究图" class="ikqb_img_alink">
4.1
EST序列获取
利用计算机协助克隆第步必须获兴趣ESTdbEST数据库找EST途径寻找同源序列标准：度≥100bp同源性50%、85%通数万维网界使用BLAST检索程度实现其用NCBI（National Center for Biotechnology Information）GenBank、意利TigemESTmachine（包括EST提取者EST组装机器）、THC（Tentative Human Consensus Sequences）数据库、ESTBlast检索程序——通英类基组作图项目资源（Human Genome Mapping Project Resource CenterHGMP—RC）服务器访问检序列组装重叠群（contig）重叠群检序列重复进行BLAST检索与序列组装延伸重叠系列重复程直没更重叠EST检或者说重叠群序列能继续延伸获全基编码序列获些EST序列数据再与GeneBank核酸数据库进行相似性检测假凤精确匹配基EST序列数据据EST六种阅读框翻译蛋白质接着与蛋白质序列数据库进行比较析基析结致三种：第已知基研究象类已鉴定解基；第二前未经鉴定新基；第三未知基部基间同种或异种基匹配新基未知基进步用于物研究
4.2
基电定位
基电定位采用NCBI电PCR程序进行检索寻找EST序列否存序列标签位点（sequence tagged sites,STS）STS作基组单拷贝序列新代遗传标记系统其数目覆盖密度较达平均每1kbSTS或更密集寻找STS与相应染色体相比较即序列定位该染色体
4.3
IMAGE克隆索取
许ESTs所应cDNA克隆通基组及其表达整合析（intergrated molecular analysis of genomes and their expressionIMAGE）协定免疫索取与电基克隆相辅相IMAGE协定由美LLNL家实验室主持宗旨共享排列cDNA文库克隆重规模EST测序项目Merk&Cow公司投资类ESTs项目等都加入IMAGE协定研究者通另外途径基部序列并通同源性检索发现该片段与加入IMAGE协定EST序列高度同源便免费索取其原始克隆通美ATCC组织（American Type Culture Collection）索取避免或减轻筛选全基麻烦集精力进行基功能研究图" class="ikqb_img_alink">
基因克隆在医学的应用 123
2021-08-07
引物设计:primer 5oligo 7
序列析：SnapGene ViewerSerialCloner 2-6-1
序列析：SnapGene ViewerSerialCloner 2-6-1
快速克隆基因(一) | | 百迈客生物123
林夕妮儿2021-08-18
辩论稿:克隆的好处与坏处123
梅桂华丽2021-09-01
克隆许优点：
1）克隆技术减轻些能母亲性痛苦
2）克隆实验实施推遗传发展制造物器官移植辟前景
3）克隆技术用于治疗神经系统损伤神经组织再干细胞修复神经损伤
克隆许缺点避免： 1）克隆技术干扰自演化程
2）克隆技术种昂贵技术需要量资金物专业参与失败率高
3）克隆技术应用于体导致代遗传性状工控制4）克隆技术用于创建超或强壮体魄智力迟钝外克隆技术效使用类遗传男性失意义
所说科技双刃剑优点缺点并没标准答案看着使用
1）克隆技术减轻些能母亲性痛苦
2）克隆实验实施推遗传发展制造物器官移植辟前景
3）克隆技术用于治疗神经系统损伤神经组织再干细胞修复神经损伤
克隆许缺点避免： 1）克隆技术干扰自演化程
2）克隆技术种昂贵技术需要量资金物专业参与失败率高
3）克隆技术应用于体导致代遗传性状工控制4）克隆技术用于创建超或强壮体魄智力迟钝外克隆技术效使用类遗传男性失意义
所说科技双刃剑优点缺点并没标准答案看着使用
请问用RNAi干扰抗凋亡基因的表达能否筛选出稳定转然的克隆? ...123
sunyy19762021-08-27
我想用RNAi干扰的基因具有抑制凋亡的功能。
昨天看了一篇文章，用antisense阻断BMP2（具有抑制凋亡的作用）的表达，不能筛选出稳定转然的克隆，因为发生了细胞凋亡。所以现在很迷茫，请各位老师帮忙！
谢谢！
昨天看了一篇文章，用antisense阻断BMP2（具有抑制凋亡的作用）的表达，不能筛选出稳定转然的克隆，因为发生了细胞凋亡。所以现在很迷茫，请各位老师帮忙！
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