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NEB/NEB® 5-alpha Electrocompetent E. coli/C2989K/6 x 0.1 ml/tube
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4000-520-616
Description:
NEB5-alphaElectrocompetentE.colicellsareoptimizedforhightransformationefficiencybyelectroporation.ThesecellsareidealforDNAlibraryconstructionsandallcloningpurposes.
Highlights
- DH5α™derivative
- Transformationefficiency:>1x1010cfu/µgpUC19DNA
- EfficienttransformationofunmethylatedDNAderivedfromPCR,CDNAandmanyothersources(hsdR)
- ActivityofnonspecificendonucleaseI(endA1)eliminatedforhighestqualityplasmidpreparations
- Suitableforblue/whitescreeningbyα-complementationoftheβ-galactosidasegene(Φ80ΔlacZM15)
- ResistancetophageT1(fhuA2)
- ReducedrecombinationofclonedDNA(recA1)
- K12Strain
- Freeofanimalproducts
Genotype
fhuA2Δ(argF-lacZ)U169phoAglnV44Φ80Δ(lacZ)M15gyrA96recA1relA1endA1thi-1hsdR17ReagentsSupplied
Thefollowingreagentsaresuppliedwiththisproduct:
| Storeat(°C) | Concentration | |
| pUC19Vector | -20 | 0.05ng/μl |
| SOCOutgrowthMedium | 4 | 1X |
Notes:
CAUTION:ThisproductcontainsDMSO,ahazardousmaterial.ReviewtheMSDSbeforehandling.STORAGEANDHANDLING:Competentcellsshouldbestoredat-80°C.Storageat-20°Cwillresultinasignificantdecreaseintransformationefficiency.Cellsloseefficiencywhenevertheyarewarmedabove-80°C,eveniftheydonotthaw.蚂蚁淘电商平台
ebiomall.com
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公司简介
蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
淘搜索全球供应信息，找到合适的产品后在蚂蚁淘下单，然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、
运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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蚂蚁淘所有产品都是自运营的，我们已经跟国外多家厂方建立品牌推广合作关系, 获得对方的支持和授权； 同时客户可以通过订单详情查看到货物从厂方至客户的所有流程， 确保货物的来源； 正规报关，提供13%增值税发票。
及时交付： 限时必达 畅选无忧
蚂蚁淘的运营团队都是有着多年经验的成员，他们熟悉海外采购、仓储物流、报关等环节； 同时通过在线的流程监控，蚂蚁淘的进口速度比传统企业提高了50%以上， 部分产品甚至能做到7-10天到货，即蚂蚁淘的“时必达”服务。
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2018-08-06
PCR可用以指数扩增位于两个特定引物杂交位点之间的DNA片段，而在连接介导 的单侧PCR中，本质上，它只需要一个引物杂交位点的特异性，第二个引物是通过连 接反应加上的单一接头。这个接头和旁侧的基因特异性引物一起可以对任 何DNA片段进行指数级的扩增。由于一个确定的已知长度的序.列被加于每个片段，可以完整地扩增一些复杂的DNA群体，如分辨率达到单碱基水平的序列梯。来源：《精编分子生物学实验指南》第五版 查看更多
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2021-09-20
本方案设计为 24 个 PCR 反应，使用 3 种 cDNA 亚群（利用方案 3 中的 H-T11M 引物进行 RT 反应），引物为荧光染料标记的锚定引物（FH-T11M) 与 24 种上游任意引物 (HAP) 的组合。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。 查看更多
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2021-08-16
部分分解多肽氨基酸序列 20 个左右残基长度，用编码多肽两端的 PCR 引物进行 PCR 反应，能够检测 PCR 产物的长度，用此法得到的 cDNA 只有几十个碱基对，但它将成为后续筛选基因的重要突破口。 查看更多
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2018-08-07
这一章介绍通过使用2A 多肽连接的多顺反子载体从单一可读框来表达多重蛋白质的方法。当这些小的序列被克隆到基因间区时，它们允许通过在2A 多肽序列中的一个新颖的切割方式从单一的载体上高效地产丰不相连的蛋白质产物。作者：T.弗里德曼等,译者：殷勤伟等，本实验来自「基因转移」 查看更多
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2018-12-26
调节瞬时转染基因的表达l 四环素作为哺乳动物细胞中可诱导基因表达的调控物阶段一：pTet-tTAk稳定转染成纤维细胞培养和转染细胞1. 在DMEM完全培养液中培养贴壁细胞。转染前一天，把细胞换到含有0.5μg/ml四环素-HCl（四环素）的DMEM完全培养液中。每个10 cm培养皿中加入足量细胞，使转染那天，细胞可以 查看更多
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2021-09-11
这一部分介绍了一种原位 PCR，特别是逆转录酶原位 PCR 的简略方法。详细讨论了其中的每个实验程序。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。 查看更多
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2018-12-26
Construction of homemade "T-vectors"This method is after Marchuk, D., et al., 1991, Nucl. Acids Res. 19(5), pp 1154. You will need: 10 x Taq buffer (Promega)Ta 查看更多
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2021-07-19
无缝克隆（Seamless Cloning/In-Fusion Cloning），区别于传统PCR产物克隆，唯一的差异在于载体末端和引物末端应具有15-20个同源碱基，由此得到的PCR产物两端便分别带上了15-20个与载体序列同源性的碱基，依靠碱基间作用力互补配对成环，无需酶连即可直接用于转化宿主菌，进入宿主菌中的线性质粒（环状）... 查看更多
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2018-08-06
使用合成的寡核苷酸构建文库时，PCR 有两个重要的作用。第一，用与特定侧翼序列退火的引物来扩增文库，仅用少量的不同模板，就可以得到大量的 PCR 产物。第二，若要产生文库 DNA 的复杂互补链，PCR 合成法是有效的方法。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。 查看更多
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2021-07-14
在分子水平上提供一种纯化和扩增特定DNA片段的方法。常含有目的基因，用体外重组方法将它们插入克隆载体，形成重组克隆载体，通过转化与转导的方式，引入适合的寄主体内得到复制与扩增，然后再从筛选的寄主细胞内分离提纯所需的克隆载体，可以得到插入DNA的许多拷贝，从而获得目的基因的扩... 查看更多
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2018-08-07
尽管整合性转化的频率很低，但可以通过与整合位点同源的克隆化基因内的限制性位点将质粒线性化以提高转化效率。得到的整合体含有完整的质粒，两侧为基因的完整拷贝。 查看更多
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2021-07-31
PCR法检测支原体的相关实验步骤、实验技巧、实验protocol、实验经验及常见问题。 查看更多
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常见问题
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急急急急急急！！！克隆基因目的片断大小为180bp左右、可行吗？_...123
xiaoyao03052021-07-31
苏州大学医学院到底怎么样123
wjy_09122021-09-03
最近克隆了一个基因，想对其进行染色体定位，由于种种原因，自己实验室难以尽快完成实验。浙大有几位高年级师兄师姐都是到苏州做的，我想联系苏州大学医学院同行，帮助提供点负责人联系信息，本人将感激不尽！先谢了。
我的信箱：wjy_0912@hotmail.com
我的信箱：wjy_0912@hotmail.com
克隆技术的好处或坏处有哪些,克隆给人带来的好处与坏处?123
2017-11-01
列举几
DNA转录合成mRNA后,内含子会被切掉.那启动子和转录子那段也会...123
jgc952021-08-01
【求助】如何才算完整地克隆一个基因? 核酸基因技术讨论版...123
ziteng1112021-07-23
我现在需要克隆一个基因的全长编码序列，不知道该怎么办？能教教我吗？还有，我想请教一下，有没有什么网站可以明了的查到某种动物一个基因的外显子数目？谢谢了！
根据保守区克隆基因家族的新基因遇到的问题特来请教 实验方法 ...123
yvette2021-08-16
我的题目是鸡Mx基因的克隆，我的策略是先根据该基因家族(dynaminfamily)的氨基酸保守区设计简并引物克隆出该基因CDNA的部分片段，然后根据该片段序列设计基因特异性引物，利用RACE技术得到cDNA的3‘和5’末端，然后根据末端序列设计引物扩增出该基因全长cDNA.
我用简并引物从鸡cDNA中扩增出一个片段，约250bp,测序后拿来BLAST时却发现，与之同源性最高的并不是其它的Mx基因，而是人的某一个基因，比对的结果中与该序列同源性较高的有人及鼠Mx基因，但是同源性并不是很高。该基因在同一种生物的不同品种中具有多态性，已经有其它的鸡的Mx基因被克隆，按道理如果该片段是Mx基因的一部分它应该与其它的鸡的Mx基因有很高的同源性才对呀，所以，我怀疑简并引物PCR扩增出来的该片段不是Mx基因，因为RACE试剂盒很贵，现在也不敢继续作下去，怕作下去得不到什么结果。现在贴上我BLAST结果中score排在最前面的部分，还请有经验的兄弟帮我分析分析。我不胜感激。
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我用简并引物从鸡cDNA中扩增出一个片段，约250bp,测序后拿来BLAST时却发现，与之同源性最高的并不是其它的Mx基因，而是人的某一个基因，比对的结果中与该序列同源性较高的有人及鼠Mx基因，但是同源性并不是很高。该基因在同一种生物的不同品种中具有多态性，已经有其它的鸡的Mx基因被克隆，按道理如果该片段是Mx基因的一部分它应该与其它的鸡的Mx基因有很高的同源性才对呀，所以，我怀疑简并引物PCR扩增出来的该片段不是Mx基因，因为RACE试剂盒很贵，现在也不敢继续作下去，怕作下去得不到什么结果。现在贴上我BLAST结果中score排在最前面的部分，还请有经验的兄弟帮我分析分析。我不胜感激。
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【求助】请问有人用过链霉素抗性的质粒来克隆基因,表达蛋白吗？_...123
mofatuzi2021-08-21
链霉素抗性的载体好用吗？和氨卞，卡纳（pet32a,28a）比怎样？用来表达蛋白效率高吗？
我想用一个链霉素抗性的载体pCDFDuet™和一个卡纳pet28a或者氨卞pet32a的载体共转化入表达菌株rosetta。有什么可能的问题吗？
我想用一个链霉素抗性的载体pCDFDuet™和一个卡纳pet28a或者氨卞pet32a的载体共转化入表达菌株rosetta。有什么可能的问题吗？
基因克隆的几种常见方法 123
sunny1s52021-08-25
工复制基
第九章目的基因的克隆 123
aisqz2021-08-02
目基克隆利用单基副本行pcr凝胶电泳色谱琼脂糖凝胶电泳质粒等
目基表达基工程叙述~
目基表达基工程叙述~
【求助】我这样克隆基因是否可以写进文章中 PCR技术讨论版...123
实验狂人20132013-12-10
克隆基因的主要目的有四个:(1)(); (2)();&..._123
zqnever2017-11-07
克隆基主要目4
【求助】有人做DNA拓扑异构酶Ⅰ的吗 PCR技术讨论版论坛123
zhangbo71172021-08-13
请问，有人做DNA拓扑异构酶Ⅰ的吗？不知哪个实验室可以提供一些，谢谢。
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