利用CRISPR_Cas9技术构建ApoE基因敲除的金黄仓鼠高脂血症模型...
| 实验材料 | PCR扩增SSLP的变性聚丙烯酰胺凝胶 试剂、试剂盒 | 乙醇硝酸硝酸银染色溶液显色液乙酸 仪器、耗材 | Whatman滤纸染色仪器80℃真空电炉 实验步骤 |  1.电泳后，小心的打开仪器，分开玻璃板。将有胶的那块板子放于染色一起的底部，仔细地将上面的架子和垫圈放置于胶边缘的上面，拧紧闩子。 胶里如果有小空隙的话将会使溶液从胶和玻璃板间流出，可以通过加（逐滴注入）一点含有高农度过硫酸铵的Sequagel-6(NationalDiagnostics)将缝隙填满，胶将会快速地聚合。 2.在10%的乙醇里洗胶5min，然后倒掉乙醇，在1%的硝酸溶液里氧化胶3min，倒掉硝酸溶液。用水漂洗胶5s，然后倒掉水。 3.加硝酸银染液，盖好一起以防透光，染20min后，倒掉硝酸银溶液并按安全的规章制度处理这些溶液，用水漂洗胶5min后倒掉。 4.加显色液还原胶（溶液最初的颜色是黄褐色），轻轻地晃动染色仪使溶液没过胶，倒掉再加人新鲜的显色液，直到溶液不再改变颜色，溶液变清（溶液变清大约2min后，条带将开始显现）。 5.在条带开始显现而胶边棕色前将展开液倒掉（避免展开过度），在10%乙酸中、浸泡1Imin终止展开，倒掉乙酸溶液，用水漂洗5s。 6.将Whatman的滤纸直接放到胶上，轻轻地把胶从玻璃板上转移到滤纸上，直空干胶lh，记录结果。切掉多余的胶保存有结果信息的部分（真空抽干的胶可以2年而没明显的信息丢失）。 |
|---|
免责声明 本文仅代表作者个人观点，与本网无关。其创作性以及文中陈述文字和内容未经本站证实，对本文以及其中全部或者部分内容、文字的真实性、完整性、及时性本站不做任何保证或承诺，请读者仅作参考，并请自行核实相关内容。
版权声明 未经蚂蚁淘授权不得转载、摘编或利用其他方式使用上述作品。已经经本网授权使用作品的，应该授权范围内使用，并注明“来源：蚂蚁淘”。违反上述声明者，本网将追究其相关法律责任。
发布于 ： 2021-08-21
阅读（373）
▍
相关分类
▍
相关文章
▍
相关问答
