| Overview |  PrinterFriendlyVersion |
| Ex/Em(nm) | 500/525 |
| MW | N/A |
| CAS# | N/A |
| Solvent | N/A |
| Storage | F/D/L |
| Category | NucleicAcidDetection RNADetection |
| Related | LabelingCells FluorescenceImaging BiochemicalAssays |
1.PreparingtheStrandBrite™Greenworkingsolution:
1.1 PrepareanaqueousworkingsolutionoftheStrandBrite™Greenbymakinga200-folddilutionoftheconcentratedDMSOsolutioninTE(10mMTris-HCl,1mMEDTA,pH7.5inDEPCtreatedwater).Forexample,add50μLStrandBrite™Greento10mLTEbuffertoprepareenoughworkingsolutiontoassay100samplesina200µLfinalvolume.Protecttheworkingsolutionfromlightbycoveringitwithfoilorplacingitinthedark.
Note1:Werecommendpreparingthissolutioninaplasticcontainerratherthanglass,asthedyemayadsorbtoglasssurfaces.
Note2:Forthebestresults,thissolutionshouldbeusedwithinafewhoursofitspreparation.
2.PrepareserialdilutionsofRNAstandard(0to1µg/mL):
2.1 Preparea100μg/mLstocksolutionofRNAinDEPCtreatedwater.
2.2 Add10μLof100μg/mLRNAstocksolution(fromStep2.1)to490µLofAssaybuffer(ComponentB)tohave2μg/mLRNAsolution,andthenperform1:2serialdilutionstoget1000,500,250,125,62.5,31.3,15.6,and0ng/mL.
2.3 AddRNAstandardsandRNAcontainingtestsamplesintoa96-wellsolidblackmicroplateasdescribedinTables1and2.
Table1.LayoutofRNAstandardsandtestsamplesinasolidblack96-wellmicroplate*
BL | BL | TS | TS | …. | …. |
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RS1 | RS1 | …. | …. | …. | …. |
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RS2 | RS2 |
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RS3 | RS3 |
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RS4 | RS4 |
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RS5 | RS5 |
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RS6 | RS6 |
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RS7 | RS7 |
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*Note:RS=RNAStandards;BL=BlankControl;TS=TestSamples
Table2.Reagentcompositionforeachwell*
RNAStandard | BlankControl | TestSample |
Serialdilutions*(100μL) | TE:100μL | 100μL |
*Note:AddtheseriallydilutionsofRNAstandardsfrom15.6to1000ng/mLintowellsfromDS1toDS7induplicate.
3.RundsDNAassay:
3.1 Add100μLofStrandBrite™Greenworkingsolution(fromStep2)toeachwelloftheRNAstandard,blankcontrol,andtestsamples(seeStep3)tomakethetotalRNAassayvolumeof200µL/well.
Note:Fora384-wellplate,add25μLsampleand25μLofStrandBrite™Greenworkingsolutionperwell.
3.2 Incubatethereactionatroomtemperaturefor5to10minutes,protectedfromlight.
3.3 MonitorthefluorescenceincreasewithaspectrofluorometeratEx/Em=490/525nm(cutoffat515nm).
Note:Tominimizephotobleachingeffects,keepthetimeforfluorescencemeasurementconstantforallsamples.
3.4 Thefluorescenceinblankwells(withtheassaybufferonly)isusedasacontrol,andissubtractedfromthevaluesforthosecuvetteswithRNAstandardortestsamples.TheRNAconcentrationofthesampleisdeterminedaccordingtotheRNAstandardcurve.
| References&Citations |  PrinterFriendlyVersion |
1. PetersonEJ,KireevD,MoonAF,MidonM,JanzenWP,PingoudA,PedersenLC,SingletonSF.(2013)InhibitorsofStreptococcuspneumoniaesurfaceendonucleaseEndAdiscoveredbyhigh-throughputscreeningusingaPicoGreenfluorescenceassay.JBiomolScreen,18,247.
2. ChenY,SonnaertM,RobertsSJ,LuytenFP,SchrootenJ.(2012)ValidationofaPicoGreen-basedDNAquantificationintegratedinanRNAextractionmethodfortwo-dimensionalandthree-dimensionalcellcultures.TissueEngPartCMethods,18,444.
3. MorenoLA,CoxKL.(2010)QuantificationofdsDNAusingtheHitachiF-7000FluorescenceSpectrophotometerandPicoGreendye.JVisExp.
4. DraganAI,Casas-FinetJR,BishopES,StrouseRJ,SchenermanMA,GeddesCD.(2010)CharacterizationofPicoGreeninteractionwithdsDNAandtheoriginofitsfluorescenceenhancementuponbinding.BiophysJ,99,3010.
5. DraganAI,BishopES,Casas-FinetJR,StrouseRJ,SchenermanMA,GeddesCD.(2010)Metal-enhancedPicoGreenfluorescence:applicationtofastandultra-sensitivepg/mlDNAquantitation.JImmunolMethods,362,95.
6. ABIodunOO,GbotoshoGO,AjaiyeobaEO,HappiCT,HoferS,WittlinS,SowunmiA,BrunR,OduolaAM.(2010)ComparisonofSYBRGreenI-,PicoGreen-,and[3H]-hypoxanthine-basedassaysforinvitroantimalarialscreeningofplantsfromNigerianethnomedicine.ParasitolRes,106,933.
7. DraganAI,BishopES,Casas-FinetJR,StrouseRJ,SchenermanMA,GeddesCD.(2010)Metal-enhancedPicoGreenfluorescence:applicationfordouble-strandedDNAquantification.AnalBiochem,396,8.
8. HoldenMJ,HaynesRJ,RabbSA,SatijaN,YangK,BlasicJR,Jr.(2009)FactorsaffectingquantificationoftotalDNAbyUVspectroscopyandPicoGreenfluorescence.JAgricFoodChem,57,7221.
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10. RenX,XuQH.(2009)Label-freeDNAsequencedetectionwithenhancedsensitivityandselectivityusingcationicconjugatedpolymersandPicoGreen.Langmuir,25,43.
AAT Bioquest AAT Bioquest是一家位于美国的生物公司，前身为ABD Bioquest，总部位于加利福尼亚州。专门从事光学检测技术十多年，一直致力于光谱学检测领域技术的创新和突破。其独特的光学检测技术，综合了化学、生物学和信息学等各个领域的研究，引领了比色、荧光和发光技术新一代光学探针的浪潮。AAT Bioquest在全球拥有强大的经验丰富的专业分销商网络，为从小型研究机构到《财富》500强企业的各类客户提供卓越的产品和定制服务。
美国AATBioquestInc.(前身是ABDBioquest，Inc.)是一家为从事生命科学研究、诊断研发及药物开发的科学家研发、生产和销售生物分析研究试剂和试剂盒的公司。公司致力于光谱学检测领域，包括吸收（颜色），荧光和发光技术。AATBioquest的产品帮助全世界的科学家和生物医药研究者更好的了解生物化学，免疫学，细胞生物学和分子生物学等领域。AATBioquest会不断介绍新产品，快速的丰富各个领域的产品。
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AATBioquest,Inc.(formerlyABDBioquest,Inc.)develops,manufacturesandmarketsbioanalyticalresearchreagentsandkitstoscientistsengagedinlifesciencesresearch,diagnosticR&Danddrugdiscovery.Wespecializeintheareaofphotometricdetectionsincludingabsorption(color),fluorescenceandluminescencetechnologies.TheCompany"sproductsenablescientistsandbiomedicalresearcherstobetterunderstandbiochemistry,immunology,cellBIOLOGyandmolecularbiology.AATBioquestconstantlyintroducesnewproducts,andoffersarapidlyexpandinglistofproductsthataregroupedintoseveralproductlines.
1)Ourreactivefluorescentandluminescentprobes,biotinsandtagenzymesareusedforlabelingsmalldrugmoleculesandbiopolymers,e.g,proteins,nucleicacidsandcarbohydrates;2)Wedevelopfluorescentandluminescentprobesfordetectingproteins,nucleicacidsandlivecells;3)Weconstantlyintroducenovelfluorescentandluminescentprobesfordetectingvariousenzymes,inparticular,hydrolyticandredoxenzymes;4)Wefocusondevelopingreagentsforsignaltransductionresearch;and5)Wealsoofferphysiologicalandneurologicalprobes,e.g.,calciumindicatorsandmembranepotentialprobes.
Besidesthestandardcatalogproductswealsooffercustomservicetomeetyourspecialresearchneeds.Ourcurrentservicesincludecustomsynthesisofcolorimetric,fluorescentandluminescentprobes,customdevelopmentofbiochemical,cell-basedanddiagnosticassaysandcustomscreeningofyourcompoundlibrariesagainstyourdefinedtargetsusingourvalidatedHTSassays.
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健那绿——高中唯一一个活体染色剂。染线粒体的，染成蓝绿色
请各位大侠给予帮助！！
谢谢！！
2、苏丹三 脂肪 橙红
3、苏丹四 脂肪 红
4、双缩脲 蛋白质 紫
5、龙胆紫 染色质 紫
6、碘 淀粉 蓝
7、健那绿 线粒体 绿
8、甲基绿 DNA 绿
9、吡罗红 RNA 红
10、溴麝香草酚蓝 CO2 由蓝变绿再变黄
11、重铬酸钾 酒精 酸性条件下由橙色变成灰绿
12、醋酸洋红（龙胆紫、改良苯酚品红） 染色质 红
13、台盼蓝 检验活死细胞 死细胞会被染成蓝色（不常用）
健那绿染液是一种活体染液，实验对象必须是活细胞，健那绿可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色，而细胞质接近无色。
分子生物学实验的染料主要涉及到核酸染料和蛋白质染料.核酸染料主要有EB（溴化乙锭,高致癌性）,goldview,sybr green（实时定量PCR时常用染料）.这些染料可以和核酸双链分子特异性结合发出强荧光而被检测到.蛋白质染料最常用的是考马斯亮蓝 R-250,硝酸银.其中硝酸银有时也用于核酸染色.
染料分为天然染料和人工染料两种。天然染料有胭脂虫红、地衣素、石蕊和苏木素等，它们多从植物体中提取得到，其成分复杂，有些至今还未搞清楚。目前主要采用人工染料，也称煤焦油染料，多从煤焦油中提取获得，是苯的衍生物。多数染料为带色的有机酸或碱类，难溶于水，而易溶于有机溶剂中。为使它们易溶于水，通常制成盐类。
染料可按其电离后染料离子所带电荷的性质，分为酸性染料、碱性染料、中性（复合）染料和单纯染料四大类。 标本干燥后即进行固定，固定的目的有三个：
1）杀死微生物，固定细胞结构。
2）保证菌体能更牢的粘附在载玻片上，防止标本被水冲洗掉。
3）改变染料对细胞的通透性，因为死的原生质比活的原生质易于染色。
产品主要应用：点击化学(Clickchemistry)、蛋白质组学研究中的双向荧光差异凝胶电泳(2DDIGE)和实时荧光定量PCR(RealtimePCR)。
氨基类染料是包含自由氨基的活性染料，染料可与活化羧酸衍生物和其他亲电子的试剂结合。比如：氨基与EDC-活化的羧基结合。
相关产品如下：
中文名英文名产品编号分子结构Cy7.5胺Cy7.5amineAGF1350A[img]/KindEditor_4.0.1/attached/image/20130704/20130704110804_5250.jpg[/img]Cy5胺Cy5amineAGF1332A[img]/KindEditor_4.0.1/attached/image/20130704/20130704110715_7750.jpg[/img]相似系列产品：
抗体、核酸、蛋白质等生物分子标记染料
羰基活性荧光染料
巯基反应性染料
羧酸类染料
而且样品中的无水硫酸钠未变色,而做标准曲线的五个和空白对照的变为蓝色了,请高手指教,多谢!
还有,是否变蓝对测定结果有影响吗?
谢了哈
欢迎你！请下次规范发贴:)
取片剂一片，照溶出度测定法（中国药典2000年版二部附录ⅩC第三法），以水250ml为溶剂，转速为每分钟50转，依法操作，分别经15、30、45、60、75、210分钟取溶液滤过，精密量取续滤液5ml于分液漏斗中，加入pH7.4磷酸盐缓冲液5ml，5ml0.3%溴麝香草酚蓝溶液，用15ml氯仿分两次萃取，合并萃取液，加入0.4g无水硫酸钠，照分光光度法（中国药典2000年版二部附录ⅥA），在410nm波长处测得溶出A值。现15、30、45、60、75、210分钟溶出A值分别为0.0413、0.0544、0.0437、0.0479、0.0394、0.0302。（测定吸收度偏小是否不准，有影响。）
请各位站友指教。
