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来自 : 蚂蚁淘
实验材料
试剂、试剂盒
仪器、耗材
实验步骤
1. 一支针管吸满1×PBS,另一支吸4%PFA固定液(4℃),搁置待用。
 
2. 在袋中用CO2气体处死小鼠。停止吸呼后,立刻背朝下放平小鼠,小心剖开胸腔防止过多出血,小心并迅速切开肋骨,剪去横隔膜,暴露心脏。
 
3. 小心将吸有1×PBS的针管刺入左心室,剖开右心室排液。缓慢但持续将1×PBS灌入心脏(见图一、如灌流正常,血液丰富器官,如肝脏,脾脏和肾脏将转呈灰白色)。
 

图一、小鼠的灌流
 
4. 当多数血液已流出后,拨去1×PBS的针管将吸有4%PFA固定液的针管插入左心室同一进针处,以20ml固定液缓慢灌流小鼠。
 
5. 灌流后,剖下器官或组织,放入盛有4%PFA固定液的做好标记玻璃瓶中,于冰上保存。
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