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Excellgen/HiFi ÄQStartTM Taq Mastermix/EG-1017/500 Reactions
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| Description | 2XHiFiÄQStartTMTaqMastermixisformulatedforfasterandeasierpreparationofPCRreactions,requiringonlytheadditionofprimers,templatesandwater.AreductioninthenumberofpipettingstepsalsoensuresmorereproducIBLePCR. HiFiÄQStartTMTaqDNApolymerasecontainspurifiedmonoclonalantibodiesthatbindtothepolymeraseandkeepitinactivepriortotheinitialPCRdenaturationstep.Uponheatactivation(1minuteat94°C),theantibodiesdenatureirreversibly,releasingfullyactive,unmodifiedTaqDNApolymerase.Thisenablesspecificandefficientprimerextensionwiththeconvenienceofroomtemperaturereactionassembly. HiFiÄQStartTMTaqDNApolymerasecontainsasmallamountofultrahighfidelitythermalstableDNApolymerasewith3’→5’exonucleaseactivity.Thisleadstoupto6-foldhigherfidelityPCRamplificationthanTaqDNApolymerasealoneandenablesamplificationofDNAfragmentsupto20-kb. |
| Applications |
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| Features |
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| Components | Finalconcentration(1X):
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| StorageConditions | -20°C |
| StABIlity | 3yearsat-80°C;2yearsat-20°C,upto1yearat4°C.Repeatedfreeze/thawcyclesshouldbeavoidedbutdoesnotaffectproductperformancesignificantly. |
| Shipping | 4°C |
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2018-08-07
这一章介绍通过使用2A 多肽连接的多顺反子载体从单一可读框来表达多重蛋白质的方法。当这些小的序列被克隆到基因间区时，它们允许通过在2A 多肽序列中的一个新颖的切割方式从单一的载体上高效地产丰不相连的蛋白质产物。作者：T.弗里德曼等,译者：殷勤伟等，本实验来自「基因转移」 查看更多
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2018-12-26
调节瞬时转染基因的表达l 四环素作为哺乳动物细胞中可诱导基因表达的调控物阶段一：pTet-tTAk稳定转染成纤维细胞培养和转染细胞1. 在DMEM完全培养液中培养贴壁细胞。转染前一天，把细胞换到含有0.5μg/ml四环素-HCl（四环素）的DMEM完全培养液中。每个10 cm培养皿中加入足量细胞，使转染那天，细胞可以 查看更多
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2021-07-14
在分子水平上提供一种纯化和扩增特定DNA片段的方法。常含有目的基因，用体外重组方法将它们插入克隆载体，形成重组克隆载体，通过转化与转导的方式，引入适合的寄主体内得到复制与扩增，然后再从筛选的寄主细胞内分离提纯所需的克隆载体，可以得到插入DNA的许多拷贝，从而获得目的基因的扩... 查看更多
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2021-08-09
随着转基因农作物的大量种植，其安全性问题也日益受到人们的重视。2002年我国要求对转基因农作物实行标签管理。抗草甘膦（glyphosate）大豆 （商品名，roundup ready soybean）是在传统大豆株Variety A5403中转入外源基因CAMV-35S启动子、抗草甘膦基因CP4-EPSPS和NOS终止子而得到。它是目前使用最广的转基因作物之一，每年至少有 800万吨转基因大豆进入我国市场。因此，研究抗草甘膦大豆的快速检测方法具有重要意义。目前采用PCR检测转基因大豆的方法大多是采用琼脂糖 查看更多
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2021-08-19
单精子分型指的是分析个体雄配子的 DNA 序列。它可以检测单个个体的重组以及其他遗传现象。精子分型的一个优点体现在需要大样本量的遗传研究中，如一份精液样本中的精子数目对于任何研究目的来说都是取之不尽的。 查看更多
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2018-11-28
Severn Biotech公司产品介绍【代理商代购现货】 查看更多
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2021-09-20
本方案设计为 24 个 PCR 反应，使用 3 种 cDNA 亚群（利用方案 3 中的 H-T11M 引物进行 RT 反应），引物为荧光染料标记的锚定引物（FH-T11M) 与 24 种上游任意引物 (HAP) 的组合。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。 查看更多
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2018-08-06
克隆抗原受体重组出现于大多数淋巴瘤细胞，因此该标记被用于第 1 步淋巴组织活检。易位则用于第 2 步检查，对肿瘤进行分型。对于组织学和其他结果预示有特殊移位存在的情况可以直接检测易位。抗原受体重组不适用于大多数非淋巴细胞白血病，在这些病例中染色体易位是唯一适合的分子标记。 查看更多
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2018-12-26
原核细胞l 用IPTG诱导启动子在大肠杆菌中表达克隆化基因含重组表达载体的大肠杆菌菌株的构建1. PCR修饰或限制性内切酶消化分离DNA片段，片段5’端和3’端带有与IPTG诱导表达载体对应的限制酶位点。2. 含靶cDNA/基因的DNA片段与表达载体连接。3. 重组质粒转化有lacIq 等位基因的大肠杆菌菌株。如果质 查看更多
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2021-09-05
许多真核生物的基因所包含的 DNA，远非单个重组子所能容纳得了的。对于大多数染色体来说，更是如此。因此，必须构建一套重叠的 DNA 克隆，这些克隆的 DNA 按次序排列能形成叠连序列（叠连群），可以涵盖一个很大的基因或目的区域。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。 查看更多
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2021-09-02
端粒是真核生物染色体末端的特异DNA-蛋白结构，端粒DNA是一系列重复的富含G的DNA序列，这一序列在生物进化中有高度的保守性（人重复序列为TTAGGG）。已确认端粒在保护基因组DNA不被降解、防止染色体有害的结合（如染色体末端融合、重排、染色体移位和染色体缺失）中起重要作用。 查看更多
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2019-04-16
英国剑桥Horizon Discovery产品介绍|代理商整理 查看更多
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基因克隆在医学的应用 123
2021-08-07
引物设计:primer 5oligo 7
序列析：SnapGene ViewerSerialCloner 2-6-1
序列析：SnapGene ViewerSerialCloner 2-6-1
请教高手:克隆基因的步骤 123
大脑2021-08-12
我刚考上硕士，导师就让我克隆一个基因，可我啥也不会，怎么办？
我已经知道了这个基因在其他物种中的序列和它所编码的蛋白质的序列，导师的意思是让我把它在大豆中克隆出来。我该怎么办？
听导师说，可能要用到RT-PCR。谁能帮帮我？
感激不尽啊！
我已经知道了这个基因在其他物种中的序列和它所编码的蛋白质的序列，导师的意思是让我把它在大豆中克隆出来。我该怎么办？
听导师说，可能要用到RT-PCR。谁能帮帮我？
感激不尽啊！
你认为目前若实施人类克隆,在技术上还存在哪些难题?会引起哪些...123
╲°泪祭_78812021-07-25
基检测：
DNA杂交技术
DNA-RNA杂交技术
抗体抗原杂交技术
DNA杂交技术
DNA-RNA杂交技术
抗体抗原杂交技术
已知一个物种的基因组,怎么克隆目的基因123
a我淡定3242017-11-01
离目基
物芯片高密度固定固相支持介质物信息微列阵列阵每序列及位置都已知并按预先设定顺序点阵基芯片物芯片种其固定核算类物质主要用于DNA、RNA析DNA芯片微点阵两种
离目基指基组发现或找某目（标）基目前通①比较同物种间或同物种同体间；或同体同发育期或同环境条件基差异表达（基表达平行析）实现采用基芯片技术进行基差异表达研究通杂交直接检测细胞mRNA种类及丰度与传统差异显示相比具品用量自化程度高检测目标DNA密度及并行种类等优点②利用同源探针cDNA或EST微列阵筛选离目基目前DNA 芯片、cDNA芯片两种其基本步骤包括：基芯片制备、靶品制备、杂交与检测、目基离并获全
2 基文库技术离目基
基文库指某物类型全部基集合种集合重组体形式现某物DNA片段群体与载体重组重组转化宿主细胞转化细胞选择培养基单菌落（或噬菌斑或细胞）即DNA片段克隆全部DNA片段克隆集合体即该物基文库其类型基组文库与cDNA文库、克隆文库与表达文库按载体智力文库、噬菌体文库、黏粒载体文库、工染色体文库等基文库构建文库筛选基主要几种：核算杂交、免疫检测、DNA同胞选择、PCR筛选等基文库构建目前基工程核工作离目进用
3 功能蛋白组离目基
蛋白组指细胞内全部蛋白存及式即基组表达产总蛋白质统称功能蛋白质组指些能涉及特定功能机理蛋白质群体主要研究蛋白质双向电泳通高效液相色谱、质普蛋白质序列进行析借用物手段则进行目基离：应用PCR进行离目基：通蛋白质序列析通密码简并性设计简并引物利用RT-PCR 目基全；应用核算杂交筛选离目基：即利用简并寡核苷酸探针筛选cDNA或基组文库；免疫雪筛选离目基：通蛋白特异抗体与目蛋白专结合表达文库离目基蛋白基
4 PCR技术基克隆应用
PCR技术已经渗透物各领域克隆获cDNA全面起着重要作用利用 PCR技术特定条件基表达进行检测即通mRNA差别显示（DDRT-PCR）鉴定离所需目基；通RT-PCR克隆目基 cDNA区域进行cDNA文库构建通锚定PCR或反向PCR快速克隆cDNA末端未知序列、功能基调控区等现用于基离克隆 PCR主要：RT-PCRDDRT-PCR用于cDNA末端快速克隆RACE（第3节）用于DNA序列克隆Panhankle- PCR、Cassette-PCR及减cDNA文库PCR构建等Panhankle-PCR、Cassette-PCR基组已知DNA相临未知序列克隆奠定良基础
5 mRNA差别显示技术离差别表达基
mRNA差异显示技术组织特异性表达基进行离种快速行效mRNA反转录与PCR技术结合发展起种RNA指纹图谱技术利用5’锚定引物oligo（dT）12MN3’端随机引物总mRNA进行PCR扩增期差异表达条带并其差异显示条带进行收、克隆
6 插入突变离克隆目基
获突变体进行未知基克隆用举T-DNA标签转座诱变离克隆目基例T-DNA标签T-DNA任何兴趣基处产插入性突变获析该基功能照突变体T-DNA左右边界间携带外源报告基片段作选择性遗传标记插入序列已知获转基重组突变体通各种克隆PCR策略加研究倘若35S强启T-DNA整合宿主基组整合内原基游则产异增加或表达空特异性改变破坏基表达效获性突变功能丧失性突变等转座标签株携带功能性转座系统植物与遗传差异同种植物杂交转座插入某特定基序列破坏该基编码蛋白进导致见表性破坏或改变产代筛选新型突变体
物芯片高密度固定固相支持介质物信息微列阵列阵每序列及位置都已知并按预先设定顺序点阵基芯片物芯片种其固定核算类物质主要用于DNA、RNA析DNA芯片微点阵两种
离目基指基组发现或找某目（标）基目前通①比较同物种间或同物种同体间；或同体同发育期或同环境条件基差异表达（基表达平行析）实现采用基芯片技术进行基差异表达研究通杂交直接检测细胞mRNA种类及丰度与传统差异显示相比具品用量自化程度高检测目标DNA密度及并行种类等优点②利用同源探针cDNA或EST微列阵筛选离目基目前DNA 芯片、cDNA芯片两种其基本步骤包括：基芯片制备、靶品制备、杂交与检测、目基离并获全
2 基文库技术离目基
基文库指某物类型全部基集合种集合重组体形式现某物DNA片段群体与载体重组重组转化宿主细胞转化细胞选择培养基单菌落（或噬菌斑或细胞）即DNA片段克隆全部DNA片段克隆集合体即该物基文库其类型基组文库与cDNA文库、克隆文库与表达文库按载体智力文库、噬菌体文库、黏粒载体文库、工染色体文库等基文库构建文库筛选基主要几种：核算杂交、免疫检测、DNA同胞选择、PCR筛选等基文库构建目前基工程核工作离目进用
3 功能蛋白组离目基
蛋白组指细胞内全部蛋白存及式即基组表达产总蛋白质统称功能蛋白质组指些能涉及特定功能机理蛋白质群体主要研究蛋白质双向电泳通高效液相色谱、质普蛋白质序列进行析借用物手段则进行目基离：应用PCR进行离目基：通蛋白质序列析通密码简并性设计简并引物利用RT-PCR 目基全；应用核算杂交筛选离目基：即利用简并寡核苷酸探针筛选cDNA或基组文库；免疫雪筛选离目基：通蛋白特异抗体与目蛋白专结合表达文库离目基蛋白基
4 PCR技术基克隆应用
PCR技术已经渗透物各领域克隆获cDNA全面起着重要作用利用 PCR技术特定条件基表达进行检测即通mRNA差别显示（DDRT-PCR）鉴定离所需目基；通RT-PCR克隆目基 cDNA区域进行cDNA文库构建通锚定PCR或反向PCR快速克隆cDNA末端未知序列、功能基调控区等现用于基离克隆 PCR主要：RT-PCRDDRT-PCR用于cDNA末端快速克隆RACE（第3节）用于DNA序列克隆Panhankle- PCR、Cassette-PCR及减cDNA文库PCR构建等Panhankle-PCR、Cassette-PCR基组已知DNA相临未知序列克隆奠定良基础
5 mRNA差别显示技术离差别表达基
mRNA差异显示技术组织特异性表达基进行离种快速行效mRNA反转录与PCR技术结合发展起种RNA指纹图谱技术利用5’锚定引物oligo（dT）12MN3’端随机引物总mRNA进行PCR扩增期差异表达条带并其差异显示条带进行收、克隆
6 插入突变离克隆目基
获突变体进行未知基克隆用举T-DNA标签转座诱变离克隆目基例T-DNA标签T-DNA任何兴趣基处产插入性突变获析该基功能照突变体T-DNA左右边界间携带外源报告基片段作选择性遗传标记插入序列已知获转基重组突变体通各种克隆PCR策略加研究倘若35S强启T-DNA整合宿主基组整合内原基游则产异增加或表达空特异性改变破坏基表达效获性突变功能丧失性突变等转座标签株携带功能性转座系统植物与遗传差异同种植物杂交转座插入某特定基序列破坏该基编码蛋白进导致见表性破坏或改变产代筛选新型突变体
【求助】我这样克隆基因是否可以写进文章中 PCR技术讨论版...123
实验狂人20132013-12-10
克隆某个基因的cds序列,大小对,但测序不对怎么回事 123
法官45唜檖5嵾2021-09-04
CDS真转录区域UTR区外显（些基DNA存转录或翻译或存变剪切等）获序列用于构建各种表达载体验证基功能
根据保守区克隆基因家族的新基因遇到的问题特来请教 实验方法 ...123
yvette2021-08-16
我的题目是鸡Mx基因的克隆，我的策略是先根据该基因家族(dynaminfamily)的氨基酸保守区设计简并引物克隆出该基因CDNA的部分片段，然后根据该片段序列设计基因特异性引物，利用RACE技术得到cDNA的3‘和5’末端，然后根据末端序列设计引物扩增出该基因全长cDNA.
我用简并引物从鸡cDNA中扩增出一个片段，约250bp,测序后拿来BLAST时却发现，与之同源性最高的并不是其它的Mx基因，而是人的某一个基因，比对的结果中与该序列同源性较高的有人及鼠Mx基因，但是同源性并不是很高。该基因在同一种生物的不同品种中具有多态性，已经有其它的鸡的Mx基因被克隆，按道理如果该片段是Mx基因的一部分它应该与其它的鸡的Mx基因有很高的同源性才对呀，所以，我怀疑简并引物PCR扩增出来的该片段不是Mx基因，因为RACE试剂盒很贵，现在也不敢继续作下去，怕作下去得不到什么结果。现在贴上我BLAST结果中score排在最前面的部分，还请有经验的兄弟帮我分析分析。我不胜感激。
Sequencesproducingsignificantalignments:(bits)Value
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我用简并引物从鸡cDNA中扩增出一个片段，约250bp,测序后拿来BLAST时却发现，与之同源性最高的并不是其它的Mx基因，而是人的某一个基因，比对的结果中与该序列同源性较高的有人及鼠Mx基因，但是同源性并不是很高。该基因在同一种生物的不同品种中具有多态性，已经有其它的鸡的Mx基因被克隆，按道理如果该片段是Mx基因的一部分它应该与其它的鸡的Mx基因有很高的同源性才对呀，所以，我怀疑简并引物PCR扩增出来的该片段不是Mx基因，因为RACE试剂盒很贵，现在也不敢继续作下去，怕作下去得不到什么结果。现在贴上我BLAST结果中score排在最前面的部分，还请有经验的兄弟帮我分析分析。我不胜感激。
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【求助/交流】求助基因克隆方面的问题解决方案 微生物 综合其他 ...123
kflame1232008-03-31
我想克隆山羊的一个基因，可是在NCBI上只找到小鼠的序列，请教一下大家该怎么做，尽量说的详细一点，谢谢了
DNA转录合成mRNA后,内含子会被切掉.那启动子和转录子那段也会...123
jgc952021-08-01
[原创] Western blot转膜整个过程 123
苦丁奶茶2021-08-31
听说种找相近物种该基全序列做比找内含位置再设计引物内含区域测序没用种能能说具体操作选物种用软件比较序列
【求助】如何设计整个基因的克隆引物？ 实验方法123
沐夕36524柯绽2021-08-08
序列前保留200bp
设计引物候引物度设置25-27左右
设计引物候引物度设置25-27左右
请问用RNAi干扰抗凋亡基因的表达能否筛选出稳定转然的克隆? ...123
sunyy19762021-08-27
我想用RNAi干扰的基因具有抑制凋亡的功能。
昨天看了一篇文章，用antisense阻断BMP2（具有抑制凋亡的作用）的表达，不能筛选出稳定转然的克隆，因为发生了细胞凋亡。所以现在很迷茫，请各位老师帮忙！
谢谢！
昨天看了一篇文章，用antisense阻断BMP2（具有抑制凋亡的作用）的表达，不能筛选出稳定转然的克隆，因为发生了细胞凋亡。所以现在很迷茫，请各位老师帮忙！
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