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Rapid Method for Preparation of Genomic DNA from P. aeruginosa Inoculate 1 ml of L-broth or other rich media with cells of the strain from which genomic DNA is 查看更多>
Cohesive End Ligation1) The ligation mixture contains the following: vector DNA (~100 ng) insert DNA (equimolar or 2 or 3 X molar concentration of vector) wate 查看更多>
Ⅰ、样品准备 准备以下一种或几种样品A、组织单细胞悬浮液(如淋巴腺、脾、骨髓、胎盘细胞)B、组织培养细胞C、Ficoll-hypaque分离的单核细胞Ⅱ、反应体系-DNA低渗缓冲液柠檬酸三钠     0.25gTriton-X 100 0.75mlPropidium iodide 0.025g核糖核酸酶      0 查看更多>
基因(遗传因子)是产生一条多肽链或功能RNA所需的全部核苷酸序列。基因支持着生命的基本构造和性能。储存着生命的种族、血型、孕育、生长、凋亡等过程的全部信息。环境和遗传的互相依赖,演绎着生命的繁衍、细胞分裂和蛋白质合成等重要生理过程。生物体的生、长、衰、病、老、死等一切生... 查看更多>
Dissociated Cultures of Cerebellar NeuronsHank Dudek (617-355-4735) Protocol Dissection can do on counter (i.e., in non-sterile conditions)use P8 rat pups, or 查看更多>
Electroporation of P. aeruginosa Preparation of Electrocompetent Cells Inoculate a 5-ml of L-broth with cells of the P. aeruginosa strain to be electrotransfor 查看更多>
DNA Plasmid Miniprep Protocol 1. Pick single colony and inoculate 5 ml of LB broth containing 200 g/l ampicillin or 1mg/5ml. Optional: Use a 15ml conical tube 查看更多>
Mini-prep1. Spin down 1.5 ml of overnight culture in eppie for 1 minute on high.2. Asprirate supernatant and resuspend cell pellet in 100 µl Solution I ( 查看更多>
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CTAB法提取DNA中各试剂的用途
buffer P1:除去RNA
buffer P2:裂解细胞
buffer P3:沉淀DNA
buffer WA、buffer WB:都是洗涤液(这两个之间有什么区别我也不清楚)
TE:溶解DNA.
想获得高纯度的组织基因组DNA用于做定量PCR。先将小鼠脚趾放入组织裂解液(10mMTris-Hcl(pH7.5),100mMNaCl,10mMEDTA,and0.5%SDSwith0.4mg/mlproteinaseK)56°过夜,买了生工的:氯仿:异戊醇(25:24:1)溶液PH8.0,接下来该怎么做呀?感谢各位老师帮忙
水稻和棉花的种子
你好,我要开始做实验了,要从血标本里提DNA,后续用来PCR基因分型,想问下有什么试剂盒性价比比较高的?同学说买试剂最好用进口的,但是打听了凯杰的觉得有点贵,不知道有没有其它进口的试剂盒性价比高的?麻烦尽量回复的详细点,因我刚开始做实验,很多东西不懂,多谢了!
DNA提取与纯化123
山中树2021-07-20
我想从植物中提取总DNA做酶切来扩增启动子,但是不论怎么纯化,用平末端的酶老是切不动,请问各位大虾有没有什么高见啊?!对了,我用的是CTAB法,在用无水乙醇沉淀之后不离心直接用枪头把DNA挑出来了洗了,但是还是切不动.好烦啊,请教各位大虾了!
我的天哪,这个东西在专业网站上去查,一抓一大把。或者借本《分子克隆》看看,特别详细!
主要成分是:NaCl,Tris-HCl(PH=8),EDTA(PH=8),SDS.NaCl,Tris-HCl主要是调节溶液的PH,维持一定的离子浓度。EDTA主要是二价金属离子的螯合剂,使影响DNA的DNA酶中的钙离子和镁离子和EDTA结合,使酶失去活性,有利于提取完整DNA;SDS主要是和蛋白质结合,使其变形沉淀,从而利于DNA的提取,减少和清除带白质杂质!
这个与琼脂糖电泳有关。提取的DNA分子量很大,可能在40K到100K左右。也有可能在这个范围。但普通的琼脂糖电泳。在大分子的时候根本分别不出来。如果你有DL15000的MARKER你就知道,象那个一万与一万五和条带差别很近。
dna产物纯化试剂盒可以纯化甲基化之后的dna
1、DNA提取问题:现在核算提取试剂盒大部分都是吸附柱法,相信你应该不会操作错误,如果提取之后进行核酸定量结果很低的话,试着再最后一步溶解核算的时候把水稍微加温(37℃就可以了),溶解时间稍微长一些,然后再离心的时候采用分次离心,比如开始你用200ul溶解的话,你可以分两次用100ul水溶解离心,这样可以提高DNA的产率.
2、电泳问题:如果你核酸定量浓度不低的话就考虑电泳问题,电泳的时候加上1kb的marker,如果marker跑不出来说明你凝胶有问题,一般只要marker跑出来了,DNA浓度又比较高,而没有条带这样的现象很少见,DNA提取比较简单而且相当稳定,本人当时做甲基化提取的DNA有一次拿出来电泳忘了放回冰箱了,结果大夏天的在外面放了一天,心怀忐忑的进行了一次电泳,结果条带依然给力,一点都没有降解.
什么公司的DNA提取试剂盒比较好用?
而且比较容易买到,同时提取的DNA便于纯化
DNA的粗提取和鉴定123
sha2842017-10-03
需要什么试剂?具体的配制方法是怎样的?要非常具体的!