【供应德国Bruno bock 3巯基丙酸2乙基己酯 2EHMP 与 ...
| 实验方法原理 | |||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 实验材料 | CDNA 试剂、试剂盒 | 载体感受态细菌 仪器、耗材 | 核酸自动测序仪 实验步骤 | 1.cDNA片段与载体进行联接反应（多在4℃下进行低温联接）； 2.使用两次CaCl2沉淀法制成的感受态细菌（如DH5a或Jm109等菌株），进行转化； 3.结合载体抗生素抗性特点，进行菌落的蓝白斑筛选； 4.单个菌落的扩增培养及质粒的提取，酶切鉴定； 5.阳性质粒的纯化及序列测定； 6.cDNA序列的测定：现在多使用核酸自动测序仪来进行序列的测定。使用仪器多为PE公司的337型自动测序仪。这种仪器一个反应可以读出约700bp长的核酸序列，正确率在90％以上，一个反应的成本约在100元（人民币）左右。由专业人员进行的测序一般可以保证正确率达到95％以但要完全正确的读出序列。则需通读双链，并进行技术性分析及纠错才可得到。一般认为，在技术完善的情况下，影响测序的因素主要适cDNA本身的结构，如G和C含量过高，序列的一端有polyT结构等。 注意事项 | 其他 | |
免责声明 本文仅代表作者个人观点，与本网无关。其创作性以及文中陈述文字和内容未经本站证实，对本文以及其中全部或者部分内容、文字的真实性、完整性、及时性本站不做任何保证或承诺，请读者仅作参考，并请自行核实相关内容。
版权声明 未经蚂蚁淘授权不得转载、摘编或利用其他方式使用上述作品。已经经本网授权使用作品的，应该授权范围内使用，并注明“来源：蚂蚁淘”。违反上述声明者，本网将追究其相关法律责任。
发布于 ： 2018-08-07
阅读（171）
▍
相关分类
▍
相关文章
